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營養(yǎng)肉湯(NutrientBroth,簡稱NB)是一種常用的細(xì)菌培養(yǎng)基,它的定義、應(yīng)用和制備方法如下:1.**定義**:營養(yǎng)肉湯,也被稱為普通肉湯,是一種用于細(xì)菌類疫苗檢驗(yàn)的培養(yǎng)基,如作為疫苗雜菌計(jì)數(shù)的稀釋液。2.**成分**:營養(yǎng)肉湯的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族維生素、氨基酸和其他生長因子,同時(shí)也提供碳源;氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓。3.**pH值**:營養(yǎng)肉湯的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制備方法**:-將蛋白胨10g、氯化鈉5.0g和牛肉湯加入至1000ml,混合后微熱溶解,然后調(diào)整pH值至7.4-7.6,濾清后分裝并在116℃下滅菌30分鐘。滅菌后的營養(yǎng)肉湯應(yīng)該是淡黃色透明無沉淀的溶液,pH值應(yīng)為7.2-7.4。-另一種配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化鈉5.0g和蒸餾水1000ml。將上述成分溶解在蒸餾水中,攪拌均勻后,使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至7.2±0.2,然后分裝至三角瓶或試管中,121℃高壓滅菌15分鐘。5.**應(yīng)用**:營養(yǎng)肉湯用于細(xì)菌的培養(yǎng),尤其是那些需要豐富營養(yǎng)才能良好生長的細(xì)菌。它適合營養(yǎng)需求較高的細(xì)菌的生長,但不適用于苛養(yǎng)型微生物。去氧膽酸鹽瓊脂(Desoxycholate Lactose Agar,簡稱DC)是一種在微生物檢測(cè)中常用的選擇性培養(yǎng)基。改良GAM肉湯基礎(chǔ)
GC肉湯基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)苛養(yǎng)菌,特別是淋球菌和嗜血桿菌等的微生物培養(yǎng)基。其特點(diǎn)主要包括:1.**營養(yǎng)成分**:GC肉湯基礎(chǔ)含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鈉等成分,為微生物提供必需的營養(yǎng)。這些成分有助于維持微生物生長所需的能量和合成代謝物質(zhì)。2.**pH值**:GC肉湯基礎(chǔ)的pH值通??刂圃?.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長環(huán)境。3.**選擇性添加劑**:為了提高培養(yǎng)基的選擇性,可以添加抗生物質(zhì)添加劑,如VCN添加劑(V.C.N.Supplement)、VCNT添加劑(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制劑(VCAInhibitor)、VCAT抑制劑(VCATInhibitor)、VancloT添加劑、LincoT添加劑等。4.**營養(yǎng)添加劑**:為了增加培養(yǎng)基的營養(yǎng)性質(zhì),可以加入維生素添加劑,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加劑(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要稱取一定量的GC肉湯基礎(chǔ)干粉,溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高壓滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,再加入過濾除菌的血紅蛋白溶液和GC添加劑,混勻后使用。6.**應(yīng)用**:GC肉湯基礎(chǔ)用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無菌血紅蛋白粉各1支。麩皮瓊脂培養(yǎng)基VP半固體瓊脂(Voges-Proskauer Semisolid Agar)是一種生化培養(yǎng)基,主要用于細(xì)菌的V-P試驗(yàn)。
改良R2A瓊脂(R2AAgar)是一種低營養(yǎng)培養(yǎng)基,主要用于對(duì)處理過的飲用水進(jìn)行細(xì)菌學(xué)平板計(jì)數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:改良R2A瓊脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、七水硫酸鎂、木酮酸鈉和瓊脂。這些成分提供氮源、維生素、氨基酸、碳源、礦物質(zhì),同時(shí)木酮酸鈉有利于受損細(xì)胞的恢復(fù),可溶性淀粉能夠吸附有毒的代謝副產(chǎn)物,有利于受損微生物的恢復(fù)。2.**pH值**:改良R2A瓊脂的pH值通??刂圃?.2±0.2(25℃)。3.**用途**:改良R2A瓊脂特別適用于飲用水、純化水、注射用水中微生物的分離、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)和鑒定。它能夠讓受損的和耐氯細(xì)菌恢復(fù)生長,同時(shí)又不會(huì)被快速生長微生物所掩蓋。4.**制備方法**:稱取適量培養(yǎng)基,用蒸餾水重懸溶解,推薦115℃滅菌20分鐘;也可121℃滅菌15分鐘。5.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株,如銅綠假單胞菌ATCC9027、枯草芽孢桿菌ATCC6623、大腸埃希氏菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC6538等,放置30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時(shí),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。
DPD培養(yǎng)基(含維生素、蔗糖、甘露醇、)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:DPD培養(yǎng)基包含多種礦物質(zhì)和維生素,以及蔗糖和甘露醇作為碳源,還含有植物生長調(diào)節(jié)劑,如2,4-D和激動(dòng)素(Kinetin)。這些成分為植物細(xì)胞提供必需的營養(yǎng)和生長因子。具體成分包括硝酸銨、硫酸鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸二氫鉀、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉、硫酸錳、鉬酸鈉、硼酸、硫酸鋅、硫酸銅、氯化鈷、碘化鉀、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、肌醇、葉酸、甘氨酸、生物素等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至5.8,以保證植物細(xì)胞的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:DPD培養(yǎng)基主要用于植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),可以根據(jù)需要額外添加凝膠(如瓊脂、植物凝膠等)、植物素等,根據(jù)需求調(diào)節(jié)pH,過濾除菌或高溫滅菌后備用。4.**制備方法**:稱取本品77.6g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,116℃高壓滅菌30分鐘,備用。使用時(shí),請(qǐng)調(diào)整pH值至5.8。5.**儲(chǔ)存條件**:DPD培養(yǎng)基干粉應(yīng)儲(chǔ)存在2-8℃,密封保存,以保持其有效性。
Preston肉湯基礎(chǔ)是一種專門用于培養(yǎng)空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)的選擇性增菌培養(yǎng)基。其特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**成分**:Preston肉湯基礎(chǔ)包含牛肉浸粉、蛋白胨、氯化鈉、木酮酸鈉、焦亞硫酸鈉和硫酸亞鐵等成分,這些成分為細(xì)菌提供碳氮源、維生素和生長因子,同時(shí)維持細(xì)菌平衡的滲透壓,并提供細(xì)菌生長需要的金屬離子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃)。3.**選擇性添加劑**:Preston肉湯基礎(chǔ)通常需要添加特定的添加劑,如多粘菌素B、利福平和甲氧芐啶,這些添加劑能夠抑制其他細(xì)菌的生長,而放線菌酮?jiǎng)t用于抑制菌生長。4.**制備方法**:稱取Preston肉湯基礎(chǔ)25.75g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶加入一支Preston肉湯添加劑和10ml無菌裂解馬血,混勻,分裝試管,備用。5.**注意事項(xiàng)**:培養(yǎng)基中含少量硫酸亞鐵,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。6.**應(yīng)用**:Preston肉湯基礎(chǔ)用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別適用于從食品和臨床樣本中分離和增菌空腸彎曲桿菌。在使用MEE肉湯進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,需要進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。3%NaCl氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對(duì)照培養(yǎng)基
MRVP培養(yǎng)基是一種用于微生物生化鑒定的培養(yǎng)基,特別是用于進(jìn)行甲基紅(MR)試驗(yàn)。改良GAM肉湯基礎(chǔ)
放線菌肉湯(ActinomycesBroth)是一種用于培養(yǎng)厭氧型放線菌的非選擇性培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)是能夠?yàn)榉啪€菌提供適宜的生長環(huán)境,促進(jìn)其生長和繁殖。以下是放線菌肉湯的一些特點(diǎn):1.**成分**:放線菌肉湯的配方包含多種營養(yǎng)成分,如胰蛋白胨、心浸液肉湯、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣、葡萄糖、L-半胱氨酸鹽酸鹽、酵母提取物和可溶性淀粉等,這些成分有助于提供碳源、氮源和必要的維生素及礦物質(zhì)。2.**外觀**:配制后的放線菌肉湯呈琥珀色透明溶液,具有麥秸色均一粉末的外觀。3.**pH值**:放線菌肉湯的pH值通??刂圃?.9±0.2,以適應(yīng)放線菌的生長需求。4.**滅菌**:培養(yǎng)基在配制后需要進(jìn)行滅菌處理,通常采用121℃高溫蒸汽滅菌15分鐘。5.**應(yīng)用**:放線菌肉湯適用于傳代、培養(yǎng)厭氧型放線菌菌種,如鏈霉菌等。6.**保存條件**:滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)密封并在2-25°C的條件下保存。7.**注意事項(xiàng)**:使用時(shí)需要注意避免攝入、吸入、皮膚接觸,以確保安全。8.**培養(yǎng)效果**:放線菌在放線菌肉湯中生長良好,可以形成典型的菌落,便于觀察和研究。這種培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)是為了滿足放線菌生長的特定條件,因此在微生物學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中有著廣泛的應(yīng)用。改良GAM肉湯基礎(chǔ)