細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基是一種用于從混合微生物群體中分離出單一種類細(xì)菌的培養(yǎng)基。其主要特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基通常包含碳源(如葡萄糖)、氮源(如蛋白胨、牛肉浸粉)、無機(jī)鹽(如氯化鈉、硫酸鎂、磷酸鹽)、維生素和生長(zhǎng)因子,以及凝固劑(如瓊脂)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:某些細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基可能含有特定的選擇性添加劑,如抗生物質(zhì)或特定的化學(xué)物質(zhì),以促進(jìn)目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他不需要的微生物。4.**制備方法**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿或試管中,經(jīng)過高壓滅菌后冷卻凝固。5.**應(yīng)用**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基用于從臨床標(biāo)本、環(huán)境樣本或混合微生物群體中分離和純化特定的細(xì)菌。通過平板分離法,如稀釋倒平板法、涂布平板法和平扳劃線法,可以從混合群體中獲得單一種類的細(xì)菌。6.**保存條件**:培養(yǎng)基應(yīng)儲(chǔ)存在室溫、避光、干燥的條件下,以保持其有效性。7.**注意事項(xiàng)**:在操作過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。使用后的干粉培養(yǎng)基應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。在DC培養(yǎng)基上,典型的大腸菌群菌落為粉紅色、紫紅色或紅色,菌落周圍可能有膽鹽沉淀環(huán)。YSG瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
BPY瓊脂培養(yǎng)基(BeefPrptoneYeastmedium,BPY)是一種富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,常用于菌的培養(yǎng)。它也適用于異養(yǎng)型微生物的分離培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、牛肉粉、葡萄糖和瓊脂,其中蛋白胨、酵母膏粉和牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖作為碳源,瓊脂作為凝固劑。**特點(diǎn)**:1.**營(yíng)養(yǎng)成分豐富**:提供足夠的營(yíng)養(yǎng)以支持微生物的生長(zhǎng)和繁殖。2.**pH穩(wěn)定**:通??刂圃?.0至7.2之間,適宜大多數(shù)微生物生長(zhǎng)。3.**凝固性好**:含有適量的瓊脂,便于制成固體培養(yǎng)基,便于微生物的分離和計(jì)數(shù)。**制備方法**:1.稱取適量培養(yǎng)基,加蒸餾水至1L,攪拌均勻。2.調(diào)pH值至7.2±0.2。3.121℃高溫滅菌15分鐘或115℃高溫滅菌20分鐘。4.冷卻到50-60℃,混勻后傾倒平皿,4℃避光保存,備用。**注意事項(xiàng)**:1.注意無菌操作,避免微生物污染。2.根據(jù)菌株生長(zhǎng)特性,可適當(dāng)調(diào)整pH值。3.該培養(yǎng)基用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其它用途。4.稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。硝酸鐵瓊脂TSI培養(yǎng)基用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)三種糖類(葡萄糖、乳糖和蔗糖)的發(fā)酵能力以及是否產(chǎn)生硫化氫。
秕糠馬拉色拉菌(Malasseziafurfur),是一種與人類皮膚共生的酵母菌,有時(shí)也會(huì)引起皮膚疾病。對(duì)于秕糠馬拉色拉菌的固體培養(yǎng)基,其特點(diǎn)主要包括:1.**特定的營(yíng)養(yǎng)成分**:秕糠馬拉色拉菌的固體培養(yǎng)基通常包含麥芽浸粉、牛膽粉、瓊脂、吐溫40和甘油單油酸酯等成分。這些成分為微生物的生長(zhǎng)提供氮源、碳源、凝固劑以及必需的脂肪酸。2.**抑制其他微生物生長(zhǎng)**:牛膽粉在培養(yǎng)基中的作用是抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),從而為秕糠馬拉色拉菌提供一個(gè)更適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**促進(jìn)脂肪酸的擴(kuò)散**:吐溫40在培養(yǎng)基中的作用是促進(jìn)甘油單油酸酯在培養(yǎng)基中的擴(kuò)散,這對(duì)于秕糠馬拉色拉菌的生長(zhǎng)至關(guān)重要,因?yàn)樗鼈冃枰舅醽砩L(zhǎng)。4.**凝固劑**:瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,它使得培養(yǎng)基能夠固化,便于微生物在固體表面上生長(zhǎng)。5.**優(yōu)化的pH值**:雖然搜索結(jié)果中沒有明確提到pH值,但通常微生物培養(yǎng)基的pH值會(huì)根據(jù)微生物的生長(zhǎng)需求進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于秕糠馬拉色拉菌,其生長(zhǎng)比較好的條件pH值通常在5.0至6.8之間。6.**培養(yǎng)溫度和時(shí)間**:秕糠馬拉色拉菌的培養(yǎng)溫度通常為30°C,培養(yǎng)時(shí)間為24-48小時(shí)。
營(yíng)養(yǎng)肉湯(NutrientBroth,簡(jiǎn)稱NB)是一種常用的細(xì)菌培養(yǎng)基,它的定義、應(yīng)用和制備方法如下:1.**定義**:營(yíng)養(yǎng)肉湯,也被稱為普通肉湯,是一種用于細(xì)菌類疫苗檢驗(yàn)的培養(yǎng)基,如作為疫苗雜菌計(jì)數(shù)的稀釋液。2.**成分**:營(yíng)養(yǎng)肉湯的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族維生素、氨基酸和其他生長(zhǎng)因子,同時(shí)也提供碳源;氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓。3.**pH值**:營(yíng)養(yǎng)肉湯的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制備方法**:-將蛋白胨10g、氯化鈉5.0g和牛肉湯加入至1000ml,混合后微熱溶解,然后調(diào)整pH值至7.4-7.6,濾清后分裝并在116℃下滅菌30分鐘。滅菌后的營(yíng)養(yǎng)肉湯應(yīng)該是淡黃色透明無沉淀的溶液,pH值應(yīng)為7.2-7.4。-另一種配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化鈉5.0g和蒸餾水1000ml。將上述成分溶解在蒸餾水中,攪拌均勻后,使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至7.2±0.2,然后分裝至三角瓶或試管中,121℃高壓滅菌15分鐘。5.**應(yīng)用**:營(yíng)養(yǎng)肉湯用于細(xì)菌的培養(yǎng),尤其是那些需要豐富營(yíng)養(yǎng)才能良好生長(zhǎng)的細(xì)菌。它適合營(yíng)養(yǎng)需求較高的細(xì)菌的生長(zhǎng),但不適用于苛養(yǎng)型微生物。LB瓊脂(Miller)是一種用于細(xì)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E. coli)等革蘭氏陰性菌的培養(yǎng)。
改良DG18瓊脂基礎(chǔ)(DichloranGlycerolAgar,DG18)是一種用于分離和計(jì)數(shù)霉菌和酵母菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于食品工業(yè)中,尤其是在檢測(cè)干制和半干制食品中的嗜滲霉菌時(shí)。這種培養(yǎng)基含有氯硝胺,可以抑制某些霉菌的生長(zhǎng),使得目標(biāo)菌株更容易被分離和計(jì)數(shù)。以下是改良DG18瓊脂基礎(chǔ)的一些特點(diǎn):1.**配方**:基礎(chǔ)配方中含有酪蛋白胨、無水葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯硝胺、氯霉素和瓊脂等成分。每升培養(yǎng)基中,酪蛋白胨5.0g,無水葡萄糖10.0g,磷酸二氫鉀1.0g,硫酸鎂0.5g,氯硝胺0.002g,氯霉素0.1g,瓊脂15.0g,pH值為5.6±0.2。2.**檢驗(yàn)原理**:該培養(yǎng)基利用氯硝胺抑制霉菌菌落蔓延生長(zhǎng),甘油維持較低的滲透壓,適合嗜滲酵母的生長(zhǎng)。3.**使用方法**:稱取31.6gDG18瓊脂基礎(chǔ),加入1升蒸餾水或去離子水,加熱攪拌煮沸至完全溶解。加入200g甘油,混勻后,121℃高壓滅菌15分鐘。4.**質(zhì)量控制**:釀酒酵母ATCC9763和黑曲霉ATCC16404的生長(zhǎng)率(PR)應(yīng)≥0.7,表現(xiàn)為奶油色菌落和白色菌絲、黑色孢子??莶菅堪麠U菌ATCC6633和大腸埃希氏菌ATCC25922的抑菌性應(yīng)≤1。5.**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;未開封產(chǎn)品保質(zhì)期為三年。對(duì)細(xì)菌的糖發(fā)酵能力和硫化氫產(chǎn)生能力進(jìn)行測(cè)試,這是 TSI 培養(yǎng)基的重要作用。酵母氨基酸缺陷型合成液體培養(yǎng)基(色氨酸/尿嘧啶缺陷)
LIM培養(yǎng)基主要用于腸道菌科細(xì)菌,如沙門氏菌和志賀氏菌的鑒定 。YSG瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
Littman瓊脂是一種常用于菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。其基本成分包括蛋白胨、牛膽粉、葡萄糖、結(jié)晶紫和瓊脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生長(zhǎng)因子,牛膽粉提供維生素和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖提供碳源,結(jié)晶紫作為抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng)抑制劑,瓊脂作為凝固劑。**配制方法**:1.稱取50克Littman瓊脂干粉。2.加入1升蒸餾水或去離子水。3.攪拌加熱煮沸至完全溶解。4.進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。5.冷卻至50℃左右時(shí),加入過濾除菌的鏈霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混勻后傾入無菌平皿。**質(zhì)量控制**:-對(duì)于黑曲霉CMCC(B)98003和釀酒酵母菌ATCC9763,其生長(zhǎng)率(PR)應(yīng)≥0.7。-對(duì)于金黃色葡萄球菌ATCC6538和大腸埃希氏菌ATCC25922,其生長(zhǎng)應(yīng)≤1(G≤1)。**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)貯存于避光、干燥處,未開封的保質(zhì)期為三年。Littman瓊脂對(duì)于菌的分離培養(yǎng)具有良好的效果,同時(shí)通過添加鏈霉素可以增強(qiáng)對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制作用,從而更有利于菌的選擇性生長(zhǎng)。YSG瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)