動物卒中模型的制作也是臨床前實驗研究的前提，缺血性卒中的動物實驗模型具有針對性與多樣性的特點，并被不斷地進行改進與創(chuàng)新，力爭制作的動物模型能無限接近真實的人類腦卒中。目前，大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學法、FeCl3誘導法、內(nèi)皮素-1誘導法和自發(fā)性卒中法為常用方法，其中線栓法大腦中動脈栓塞（MCAO）為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。 實驗外包團隊可以根據(jù)科研人員的需求，設計并執(zhí)行各種實驗。艾菱菲生物腦梗MCAO模型多少錢

造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒，取頸正中切口剪開皮膚，分離皮膚下軟組織并暴露頸動脈鞘； 游離出頸總動脈1.5cm，穿線備用； 向遠心端找到頸外側(cè)動脈，游離涌現(xiàn)結扎，提起頸總備用線，在近心端，遠心端用動脈夾夾?。?在近心端動脈夾處，用5mL注射器針頭刺破血管，稍微提起動脈夾，用鑷子夾住線栓，從小口插入動脈后，去掉遠心端動脈夾，然后用鑷子夾住線栓，線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm； 用備用線將頸總和線栓一起結扎住，*好是結扎雙道，記錄線栓插入時間，在將動脈夾另一邊近心端頸總結扎住，去掉動脈夾； 注意縫合時不要將線栓帶出，*后根據(jù)評分來判斷成模性。 線栓法是國內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型，此后 Longa等對該方法進行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進展，但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響，如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時間窗提供基礎依據(jù)，對進一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。南京定制腦梗MCAO模型造模方法通過制備腦局部缺血再灌注損傷動物模型研究腦缺血再灌注損傷的作用機制已成為國內(nèi)外的研究熱點。

缺血性卒中的病理生理及藥物治*缺血性卒中主要誘發(fā)神經(jīng)血管單元（NVU）一系列的缺血級聯(lián)反應（包括興奮性氨基酸毒性，氧（氮）化應激和缺血后炎癥等），從而造成神經(jīng)細胞受損甚至部分死亡細胞凋亡，*終誘發(fā)大腦功能的異常。NVU是由神經(jīng)元，神經(jīng)膠質(zhì)細胞，血管細胞（內(nèi)皮細胞、周細胞、平滑肌細胞）以及基底膜共同構成，這些細胞相互作用，共同調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)在細胞間質(zhì)間的流動和腦血流，維持和修復髓鞘，清*代謝產(chǎn)物，從而實現(xiàn)和維持大腦的正常功能。在缺血發(fā)生時，NVU的各部分細胞發(fā)生不同程度的損傷，誘發(fā)神經(jīng)元細胞的生理生化異常。部分凋亡細胞會進展為梗死灶，而梗死灶周圍受損的神經(jīng)細胞雖然出現(xiàn)了生理生化異常和功能障礙，但尚未死亡，及時低灌注可能可以改善其損傷狀況使之恢復正常。這部分及時搶救仍然可以改善其功能的神經(jīng)細胞一般被稱為“缺血半暗帶”。

局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動脈栓塞（Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO）由于大（小）鼠腦血管解剖結構與人類相似，大腦中動脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位，同時，采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu（持續(xù)）和短暫性損傷等多種狀態(tài)，在評價藥物量效關系和確認治*時間窗等方面有一定優(yōu)勢，因此，MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。神經(jīng)元尼氏體與細胞核呈藍紫色，背景呈淺藍色。結果顯示：假手術組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列規(guī)整，神經(jīng)元胞體及樹突內(nèi)尼氏體豐富;實驗組神經(jīng)元排列紊亂，并伴有細胞水腫和壞死發(fā)生，尼氏體染色較淺，模糊不清;陽性*組神經(jīng)元尼氏體排列較為規(guī)整，偶見神經(jīng)細胞水腫，和溶解。小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)科學研究中具有重要意義。

通過神經(jīng)功能缺損評分，研究人員可以定量地評估腦梗死后對動物神經(jīng)功能的影響。這對于研究腦梗死的病理過程、治*方法以及藥物效果具有重要的意義。同時，這種評分方法也可以為臨床醫(yī)生提供參考，幫助他們更好地評估患者的神經(jīng)功能缺損程度。 需要注意的是，神經(jīng)功能缺損評分只是一種評估方法，不能完全戴*動物的神經(jīng)功能狀態(tài)。因此，在實驗中還需要結合其他指標和方法進行綜合評估。此外，由于實驗動物的個體差異和環(huán)境因素的影響，實驗結果也可能存在一定的誤差。因此，在進行實驗研究時需要嚴格控制實驗條件和操作過程，以保證實驗結果的準確性和可靠性。在成功建立小鼠腦梗模型后，認知功能的檢測可以通過以下方法進行： 1. 迷宮測試：這是一個常用的方法，通過讓小鼠在迷宮中尋找食物，觀察其尋找食物的速度和正確性，來評估其認知功能。 2. 物體識別測試：給小鼠展示兩個相似的物體，觀察其是否能夠正確識別并記住這兩個物體。 3. 社交互動測試：觀察小鼠與其他小鼠的互動情況，包括是否能夠正確識別其他小鼠，以及是否能夠進行正常的社交行為。 這些測試可以幫助評估小鼠的認知功能，從而了解腦梗對其認知功能的影響。進栓長度過長，易造成蛛網(wǎng)膜下腔出血，死亡率較高、模型制備失敗。國內(nèi)腦梗MCAO模型費用

行為學檢測是評估腦梗MCAO模型動物行為變化的一種方法。艾菱菲生物腦梗MCAO模型多少錢

TTC染色如何測定腦梗MCAO面積-TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應，故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。將模型動物大鼠安樂死，解剖取材完整的腦組織，在-20℃速凍20min，便于切片。切片切成6片，每隔2mm切一片。將切片至于2%TTC磷酸緩沖液（PH 7.4）溶液中，用錫箔紙蓋住培養(yǎng)皿，放入37℃溫箱30min，15min后翻動腦切片，使其均勻接觸到染液。艾菱菲生物腦梗MCAO模型多少錢