造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒,取頸正中切口剪開皮膚,分離皮膚下軟組織并暴露頸動脈鞘; 游離出頸總動脈1.5cm,穿線備用; 向遠心端找到頸外側動脈,游離涌現(xiàn)結扎,提起頸總備用線,在近心端,遠心端用動脈夾夾住; 在近心端動脈夾處,用5mL注射器針頭刺破血管,稍微提起動脈夾,用鑷子夾住線栓,從小口插入動脈后,去掉遠心端動脈夾,然后用鑷子夾住線栓,線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm; 用備用線將頸總和線栓一起結扎住,*好是結扎雙道,記錄線栓插入時間,在將動脈夾另一邊近心端頸總結扎住,去掉動脈夾; 注意縫合時不要將線栓帶出,*后根據(jù)評分來判斷成模性。 線栓法是國內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型,此后 Longa等對該方法進行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進展,但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響,如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時間窗提供基礎依據(jù),對進一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。腦梗MCAO模型是一種常用的腦梗動物模型,用于研究腦梗死的發(fā)病機制和治*方法。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項
實驗外包團隊在科研領域中扮演著越來越重要的角色。他們通常由具有高度專業(yè)知識和豐富實驗經(jīng)驗的科研人員組成,能夠為科研人員提供*方位的技術支持,幫助他們在實驗過程中解決各種難題。 首先,實驗外包團隊具備較高的學歷背景,通常擁有碩士或博士學位,甚至有些團隊成員擁有海外留學或科研經(jīng)歷。他們通過系統(tǒng)的學習和實踐,掌握了先進的實驗技術和方法,能夠應對各種復雜的實驗需求。 其次,實驗外包團隊具有豐富的實驗操作經(jīng)驗。他們經(jīng)過多年的實踐積累,對實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié)有著深入的了解和掌握,能夠熟練應對各種實驗問題。同時,他們還具備嚴謹?shù)膶嶒瀾B(tài)度和科學的方法論,能夠確保實驗的準確性和可靠性。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項進栓長度過長,易造成蛛網(wǎng)膜下腔出血,死亡率較高、模型制備失敗。
在實驗過程中,動物的表現(xiàn)會被詳細記錄。例如,它們是否能保持平衡,是否出現(xiàn)跌倒,以及跌倒的頻率和持續(xù)時間等。這些數(shù)據(jù)將被用于分析腦梗對動物平衡和協(xié)調(diào)性的影響。 這種實驗方法有助于我們深入理解腦梗對神經(jīng)系統(tǒng)的影響,以及可能對治*方法和康復策略的改進提供重要信息。例如,如果發(fā)現(xiàn)腦梗后的動物在轉棒實驗中的表現(xiàn)明顯下降,這可能表明腦梗影響了動物的平衡和協(xié)調(diào)能力。這可能會引導研究人員尋找新的治*方法,以改善或恢復這些功能。
將小鼠進行呼吸誘導麻醉(異氟烷)后,以仰臥位固定于操作臺上,繼續(xù)維持麻醉,常規(guī)消毒,備皮,取頸部正中切口,分離右側頸部總動脈(CCA)、勁內(nèi)動脈(ICA)和頸外動脈(ECA),結扎ECA遠心端,在ECA起始端留置結扎線,用動脈夾將ICA遠心端、CCA近心端夾閉。在ECA遠心端結扎線外離斷,將ECA拉至與ICA成一條直線,于結扎線近端用顯微剪剪一斜口,將MACO栓線緩緩送入,栓線通過ECA近心端結扎線進入ICA后,單道結扎ECA近心端結扎線,使栓線與血管相對固定,隨即松開ICA上的動脈夾,緩慢上提ECA近心端結扎線,將栓線緩慢送入,進線至線栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓線插入40 min后拔出,隨后將ECA近心端結扎線結扎,松開CCA近心端動脈夾,碘伏消毒后逐層縫合切口。手術有一定技術難度,血管結扎不緊或結扎線脫落,會出血導致病理生理狀態(tài)改變或增加死亡。
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實驗過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標準,對實驗動物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進行比較,可以進一步驗證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時,觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。采用Longa等的5級4分法標準對模型動物進行評價。上海定制腦梗MCAO模型課題研究
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在成功建立小鼠腦梗模型后,認知功能的檢測可以通過以下方法進行: 1. 迷宮測試:這是一個常用的方法,通過讓小鼠在迷宮中尋找食物,觀察其尋找食物的速度和正確性,來評估其認知功能。 2. 物體識別測試:給小鼠展示兩個相似的物體,觀察其是否能夠正確識別并記住這兩個物體。 3. 社交互動測試:觀察小鼠與其他小鼠的互動情況,包括是否能夠正確識別其他小鼠,以及是否能夠進行正常的社交行為。 這些測試可以幫助評估小鼠的認知功能,從而了解腦梗對其認知功能的影響。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項