通常要將有機(jī)溶劑冷卻,然后在不斷攪拌下加入有機(jī)溶劑防止局部濃度過(guò)高,蛋白質(zhì)變性問(wèn)題就可以很大程度上得到解決。對(duì)于一些和脂質(zhì)結(jié)合比較牢固或分子中極性側(cè)鏈較多、不溶于水的蛋白質(zhì),可以用乙醇、**和丁醇等有機(jī)溶劑提取,它們有一定的親水性和較強(qiáng)的親脂性,是理想的提取液。冷乙醇分離法提取免疫球蛋白**早由Cohn于1949年提出,用于制備丙種球蛋白。冷乙醇法也是WHO規(guī)程和中國(guó)生物制品規(guī)程推薦的方法,不僅分辨率高、提純效果好、可同時(shí)分離多種成分,而且有抑菌、***的作用。濟(jì)南蛋白純化填料哪家好
一、根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離 1、蛋白質(zhì)的鹽析法:中性鹽對(duì)蛋白質(zhì)的溶解度有明顯影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質(zhì)的溶解度增加,此稱鹽溶;當(dāng)鹽濃度繼續(xù)升高時(shí),蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現(xiàn)象稱鹽析。 2、等電點(diǎn)沉淀法:蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時(shí)顆粒之間的靜電斥力**小,因而溶解度也**小,各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)有差別,可利用調(diào)節(jié)溶液的pH達(dá)到某一蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)使之沉淀,但此法很少單獨(dú)使用,可與鹽析法結(jié)合用。廣州直銷蛋白純化填料
蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細(xì)純化階段二個(gè)階段。一般蛋白純化采用的方法為樹脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細(xì)胞成分如DNA、RNA等分開,由于此時(shí)樣本體積大、成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開,必要時(shí)可加入相應(yīng)的保護(hù)劑(例如蛋白酶抑制劑),防止目的蛋白被降解。精細(xì)純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些分子量大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開來(lái),要用更小的樹脂顆粒以提高分辨率,常用離子交換柱和疏水柱,應(yīng)用時(shí)要綜合考慮樹脂的選擇性和柱效兩個(gè)因素。選擇性指樹脂與目的蛋白結(jié)合的特異性,柱效則是指各蛋白成分逐個(gè)從樹脂上集中洗脫的能力,洗脫峰越窄,柱效越好。*有好的選擇性,洗脫峰太寬,蛋白照樣不能有效分離。
分離純化某種蛋白質(zhì),首先要把蛋白質(zhì)從原來(lái)的組織或細(xì)胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來(lái)并保持原來(lái)的天然狀態(tài),不丟失生物活性。為此,動(dòng)物材料應(yīng)先剔除結(jié)締組織和脂肪組織,種子材料應(yīng)先去殼甚至去種皮以免受單寧等物質(zhì)的污染,油料種子比較好先用低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑等脫脂。然后根據(jù)不同的情況,選擇適當(dāng)?shù)姆椒?,將組織和細(xì)胞破碎。動(dòng)物組織和細(xì)胞可用電動(dòng)搗碎機(jī)或勻漿機(jī)破碎或用超聲波處理破碎。植物組織和細(xì)胞由于具有纖維素、半纖維素和果膠等物質(zhì)組成的細(xì)胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當(dāng)?shù)奶崛∫阂黄鹧心サ姆椒ɑ蛴美w維素酶處理也能達(dá)到目的。細(xì)菌細(xì)胞的破碎比較麻煩,因?yàn)檎麄€(gè)細(xì)菌細(xì)胞壁的骨架實(shí)際上是一個(gè)借共價(jià)鍵連接而成的肽聚糖囊狀大分子,非常堅(jiān)韌。破碎細(xì)菌細(xì)胞壁的常用方法有超聲波破碎,與砂研磨、高壓擠壓或溶菌酶處理等。組織和細(xì)胞破碎后,選擇適當(dāng)?shù)木彌_液把所要的蛋白提取出來(lái)。細(xì)胞碎片等不溶物用離心或過(guò)濾的方法除去。
離子層析法 當(dāng)被分離的蛋白質(zhì)溶液流經(jīng)離子交換層析柱時(shí),帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質(zhì)被吸附在離子交換劑上,隨后用改變pH等辦法將吸附的蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)。 有機(jī)溶劑提取 蛋白質(zhì)純化有機(jī)溶劑提取的原理是:與水互溶的有機(jī)溶劑(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白質(zhì)在水中的溶解度明顯降低;而且在一定溫度、pH值和離子強(qiáng)度下,引起蛋白質(zhì)沉淀的有機(jī)溶劑的濃度不同,因此,控制有機(jī)溶劑的濃度可以分離純化蛋白質(zhì)。例如,在冰浴中磁力攪拌下,在4℃預(yù)冷的培養(yǎng)液中緩慢加入乙醇(-25℃),可以使冰**白析出,從而純化冰**白。由于在室溫下,有機(jī)溶劑不僅能引起蛋白質(zhì)的沉淀,而且伴隨著變性。鄭州蛋白純化填料制造廠家
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精細(xì)化學(xué)品行業(yè)的傳統(tǒng)領(lǐng)域主要包括微球,聚苯乙烯微球,納米微球,熒光微球等領(lǐng)域。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期積累,我國(guó)精細(xì)化工行業(yè)在傳統(tǒng)領(lǐng)域已經(jīng)基本滿足了國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需要,部分產(chǎn)品已具有一定的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力,染料、農(nóng)藥的產(chǎn)量已處于全球**,涂料產(chǎn)量已達(dá)到全球第四位。精細(xì)化工在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生廢水、廢氣、固體廢物等有害物質(zhì),企業(yè)需加入大量資本用于這些有害物質(zhì)的治理,使生產(chǎn)型企業(yè)生產(chǎn)符合我國(guó)環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)。隨著我國(guó)環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)日益提高,企業(yè)必須持續(xù)加大污染物處理技術(shù)研發(fā)、環(huán)境保護(hù)設(shè)施加入和污染物處置力度。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的穩(wěn)定增長(zhǎng)、工業(yè)化及信息化進(jìn)程的不斷深入、加工企業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整升級(jí),尤其是我國(guó)對(duì)精細(xì)化工行業(yè)的高度重視,2020年我國(guó)精細(xì)化工行業(yè)將迎來(lái)良好機(jī)遇和廣闊空間。精細(xì)化學(xué)品所涉及的生產(chǎn)流程較長(zhǎng),要經(jīng)過(guò)多個(gè)多單元操作,制造過(guò)程較為復(fù)雜,并在生產(chǎn)過(guò)程中滿足溫和的反應(yīng)條件、安全的操作環(huán)境、特定的化學(xué)反應(yīng)等條件,實(shí)現(xiàn)化學(xué)品易于分離、較高的產(chǎn)品收率,這就需要高水平的工藝技術(shù)和反應(yīng)設(shè)備。因此,精細(xì)化工產(chǎn)品一般附加值較高。濟(jì)南蛋白純化填料哪家好
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