什么是細胞培養(yǎng):細胞培養(yǎng)是指從動物或植物中提取細胞,然后在人工環(huán)境中進行培養(yǎng)以進行科學研究。較早的細胞培養(yǎng)技術(shù)是在100多年前開發(fā)的,為科學的巨大突破做出了貢獻。如今,它已成為全世界實驗室用于研究細胞的生理學、生物化學、疾病潛在機制以及藥物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在藥物篩選和大規(guī)模制造生物化合物,諸如疫苗和治病性蛋白質(zhì)。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基制備技術(shù):一、玻璃器皿的清洗:在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經(jīng)過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時,使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。新疆自動培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器分裝好的培養(yǎng)基應立即進行滅菌。
固體培養(yǎng)基的制作步驟:1、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯,然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們在調(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調(diào)到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內(nèi),每一瓶都裝100ml。3、然后我們再把剪碎的瓊脂放進五個錐形瓶里,在給每個錐形瓶中放入2.4克,然后在把這十個錐形瓶瓶口都弄上棉花塞,瓶子也要弄上報紙。4、較后我們就可以將剛才所包扎好的一些錐形瓶放入滅菌鍋里,滅菌時一定要記得滅菌十分鐘,十分鐘到了之后,在將錐形瓶拿出來,冷卻之后就成了固體培養(yǎng)基了。注意事項:倒入時一定要注意容易。滅菌時間十分鐘,要看好時間。注意事項:倒入時一定要注意容易。滅菌時間十分鐘,要看好時間。
制備培養(yǎng)基有什么要求:1、培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。2、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):兩個存儲器;存儲器高度可選。
高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問題:在實驗過程中,檢測人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基制備器對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應先對瓊脂表面進行干燥。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,Z后必須加以補足。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢
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