培養(yǎng)基的類別按照培養(yǎng)基的成分來分:培養(yǎng)基按其所含成分,可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類。(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是己知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),但價(jià)格較貴,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等。(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,所以常被采用。(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度。西藏瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的安全分裝:無菌補(bǔ)料:通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過一個(gè)septum膜,使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加。無菌分裝:培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開,用于無菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無菌分裝,硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無菌空氣壓力分裝或通過連接到常見的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置,來進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。分裝選項(xiàng):制備和滅菌過的培養(yǎng)基可以通過一個(gè)軟管進(jìn)行分裝。在每次滅菌進(jìn)程中,內(nèi)吸管和分裝口也通過進(jìn)入的蒸汽進(jìn)行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預(yù)先滅菌,并且必須在無菌條件下連接到分裝口。山東自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備儀牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調(diào)節(jié)pH7.2~7.6,經(jīng)滅菌處理后,即為基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基制備器:主要應(yīng)用于液體培養(yǎng)基及微生物培養(yǎng)基的培養(yǎng)基制備器。高效的加熱和冷卻,良好的加熱元件能確保快速加熱。培養(yǎng)基容器外壁的水循環(huán)能保證快速冷卻。通過熱交換器不斷地將熱的去離子水冷卻。總循環(huán)時(shí)間為60至120分鐘,包括加熱、滅菌和冷卻,具體時(shí)間取決于容器的大小,培養(yǎng)基的量和冷卻水的溫度。無菌過濾的支持壓力可以防止培養(yǎng)基發(fā)泡或溢沸。觸摸屏技術(shù),新使滅菌器操作起來有了更多的選擇,增加了靈活性。加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。
馬鈴薯培養(yǎng)基的分裝:1.根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同容量的三角燒瓶、試管中。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時(shí)外溢。2.瓊脂斜面分裝量為試管容量的1/5,滅菌后須趁熱放置成斜面,斜面長(zhǎng)約為試管長(zhǎng)的2/3。3.半固體培養(yǎng)基分裝量約為試管長(zhǎng)的1/3,滅菌后直立凝固待用。4.高層瓊脂分裝量約為試管的1/3,滅菌后趁熱直立,待冷后凝固待用。5.液體培養(yǎng)基分裝于試管中,約是試管長(zhǎng)度的1/3。6.瓊脂平板:將滅菌(或加熱融化)后的培養(yǎng)基冷至50℃左右,以無菌手續(xù)傾人滅菌平皿內(nèi),內(nèi)徑225px的平皿傾注培養(yǎng)基約13~15ml,輕搖平皿底,使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部,待凝固后即成,傾注培養(yǎng)基時(shí),切勿將皿蓋全部啟開,以免空氣中塵埃及細(xì)菌落入新制成的平板培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱平板),表面水分較多,不利于細(xì)菌的分離,通常應(yīng)將平皿倒扣擱置于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約30分鐘待平板平面干燥后使用。為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。
培養(yǎng)基的購置:從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來看,不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品,甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異。對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商,這是培養(yǎng)基購買過程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè);企業(yè)是否通過了質(zhì)量管理體系的認(rèn)證是較為客觀的評(píng)價(jià)指標(biāo)。要求生產(chǎn)企業(yè)提供:培養(yǎng)基成分名稱及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、使用前的pH、儲(chǔ)藏信息和有效期、性能評(píng)價(jià)和所用測(cè)試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。山東自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備儀
微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。西藏瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時(shí)使用的自動(dòng)分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn)。每次使用前后,均要對(duì)分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應(yīng)在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細(xì)玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應(yīng)用布抹去,以避免污染。西藏瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備儀
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