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培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器哪家好

來源: 發(fā)布時間:2023-04-29

培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點(diǎn)還添加克菌素、色素、和血清。為方便長期保管,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀。使用時再配制成可用的培養(yǎng)基,整個制備過程培養(yǎng)基需要嚴(yán)格的滅菌。目前對培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因?yàn)檎羝哂泻軓?qiáng)的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,發(fā)生凝固、變性,從而導(dǎo)致微生物無法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時間與滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器哪家好

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過濾:配成的培養(yǎng)基,若無特殊要求,可省略此步。若有沉淀或渾濁,需要澄清的,液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾。而固體培養(yǎng)基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達(dá)到澄清的要求,則可用蛋清澄清法,即培養(yǎng)基加熱冷卻到50℃~60℃,裝入三角瓶內(nèi)(不超過容量的二分之一),按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清,用力搖晃3min~5min,高壓蒸汽滅菌121℃、20min,取出趁熱過濾即可。擺斜面:裝在試管中的瓊脂培養(yǎng)基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并完成適時地斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器哪家好培養(yǎng)基制備器是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。

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配制培養(yǎng)基的原則:控制培養(yǎng)基的條件,控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細(xì)菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反,C/N低的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后,其pH則明顯上升。這是由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累,改變了培養(yǎng)基的pH,若不及時控制,將導(dǎo)致菌體生長停止。

三角培養(yǎng)瓶是細(xì)胞培養(yǎng)中的常用耗材,也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進(jìn)行過濾。分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶,很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。培養(yǎng)基制備器具有液量分配,時間分配,復(fù)制分配三種工作模式。

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對LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時,有時發(fā)酵管內(nèi)會有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,可以采取以下幾項(xiàng)措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。(4)不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因。微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時才能良好生長。四川培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試

培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器哪家好

制備培養(yǎng)基有什么要求:1、根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。2、PH測定及調(diào)節(jié):PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進(jìn)行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當(dāng)測定好時,按計算量加入堿或酸混勻后應(yīng)再測試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確,否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多,以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器哪家好

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