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血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子、和脂類(lèi)等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞)。培養(yǎng)基制備器通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。云南培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制后一般都有沉渣或混濁出現(xiàn)醫(yī)學(xué),需過(guò)濾成清晰透明后方可使用,常用的過(guò)濾方法如下:1.液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基必須清晰,以便觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,常用濾紙過(guò)濾,亦可在加熱前加入用水稀釋的雞蛋白(1000ml培養(yǎng)基用1個(gè)雞蛋白)在100℃加熱后保持60~70℃,40~60分鐘,使其不溶性物質(zhì)附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以濾紙過(guò)濾。2.固體培養(yǎng)基:如系瓊脂培養(yǎng)基,于加熱融化后需趁熱以絨布或兩層紗布中夾脫脂棉過(guò)濾;亦可用自然沉淀法,即將瓊脂培養(yǎng)基盛人鋁鍋或廣口搪瓷容器內(nèi),以高壓(103.43kPa)蒸汽融化15分鐘后,靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜,次日將瓊脂傾出,用刀將底部沉渣切去,再融化即可收清晰的瓊脂培養(yǎng)基。云南培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器自動(dòng)培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋。
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。有些培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對(duì)光和熱特別敏感,應(yīng)在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見(jiàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說(shuō)明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過(guò)1000mL,要對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。注:大容量培養(yǎng)基(>1000mL)滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,防止沸溢。這對(duì)大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基(如含亮綠的培養(yǎng)基)是非常重要的。
培養(yǎng)基是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基物理分類(lèi)一種,是相對(duì)固體培養(yǎng)基而言的,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)稱(chēng)為液中培養(yǎng)、液體培養(yǎng)或液內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。培養(yǎng)基制備器應(yīng)存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內(nèi)。
根據(jù)培養(yǎng)基的用途來(lái)區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。a.選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或壓抑不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱(chēng)之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等壓抑原核微生物的生長(zhǎng);而制霉菌素、灰黃霉素等能壓抑真核微生物的生長(zhǎng);結(jié)晶紫能壓抑革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。b.增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱(chēng)為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。c.鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開(kāi)快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱(chēng)之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。黑龍江大容量 培養(yǎng)基制備器
控制培養(yǎng)基的條件,控制培養(yǎng)基的pH 配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。云南培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):調(diào)培養(yǎng)基pH,雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過(guò)的pH計(jì),則可以使用pH計(jì)。如果沒(méi)有,可以使用精確的pH試紙,然后根據(jù)需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進(jìn)行微調(diào)。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進(jìn)行調(diào)整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對(duì)于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質(zhì),將pH調(diào)至比要求值高0.1~0.2個(gè)單位,因?yàn)橛脷溲趸c調(diào)節(jié)時(shí),高壓滅菌后介質(zhì)的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣,則無(wú)需調(diào)整pH值。云南培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
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