培養(yǎng)基制備的九個步驟關(guān)注要點(diǎn):步驟一:稱取數(shù)量:用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計(jì)算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量,然后用電子天平準(zhǔn)確稱取重量。步驟二:培養(yǎng)基溶化:將培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調(diào)培養(yǎng)基pH:雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過的pH計(jì),則可以使用pH計(jì)。步驟四:培養(yǎng)基過濾:如果對配制的培養(yǎng)基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養(yǎng)基分裝:準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六:培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌?;A(chǔ)培養(yǎng)基:含有細(xì)菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì),可供大多數(shù)細(xì)菌生長。遼寧培養(yǎng)基制備儀廠家
消毒與滅菌的區(qū)別:消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀報(bào)價培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式。
高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問題:在實(shí)驗(yàn)過程中,檢測人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認(rèn)為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長時間存放。以上原因都會導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
培養(yǎng)基的類型:1、根據(jù)對培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因素的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng),但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營養(yǎng)、代謝的研究。(3)半合成培養(yǎng)基。為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時嚴(yán)格滅菌。
培養(yǎng)基的性能測試:1.外觀控制:制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色,一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化,是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制:從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測試(無菌試驗(yàn)),確定無微生物生長方可使用。3.性能測試:(1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法(改進(jìn)的劃線法接種法)。(4)定性測試方法(平板接種觀察法)。用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物,在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基物理分類一種,是相對固體培養(yǎng)基而言的,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。遼寧培養(yǎng)基制備儀廠家
液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。遼寧培養(yǎng)基制備儀廠家
殺毒滅菌方式主要有三種類型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。⑶過濾除菌方式:過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當(dāng)培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。培養(yǎng)基倒入平板:將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水。遼寧培養(yǎng)基制備儀廠家
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