培養(yǎng)基的制備：（1）稱(chēng)量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱(chēng)取適量藥品于搪瓷杯中;（2）溶解：用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;（3）分裝：根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過(guò)三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長(zhǎng)的1/5（需根據(jù)試管的大小而定）.液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.（4）塞硅膠塞：裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內(nèi),這樣即可過(guò)濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應(yīng)用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無(wú)菌水的制備：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中.（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶?jī)?nèi),防止暴沸.（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì)，在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要。湖南培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試

配制培養(yǎng)基的原則：控制培養(yǎng)基的條件，控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類(lèi)微生物要求的適宜生長(zhǎng)pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細(xì)菌為6.5-7.5.放線(xiàn)菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反，C/N低的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，其pH則明顯上升。這是由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累，改變了培養(yǎng)基的pH，若不及時(shí)控制，將導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停止。培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)培養(yǎng)基制備器系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：①概述：培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。有些培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,可煮滅菌。如，含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對(duì)光和熱特別敏感，應(yīng)在煮沸后快速冷卻，避光保存。同樣，一些試劑則不需要滅菌，直接使用(參見(jiàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說(shuō)明）。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過(guò)1000mL，要對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。注：大容量培養(yǎng)基（＞1000mL）滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s，防止沸溢。這對(duì)大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基（如含亮綠的培養(yǎng)基）是非常重要的。

實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：1、培養(yǎng)基成份稱(chēng)量：培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂，較好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱(chēng)取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱(chēng)取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基成份的混合與溶化：培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：保證細(xì)菌不被引入容器中。

血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題：血清的成份可能有幾百種之多，對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子、和脂類(lèi)等尚未充分認(rèn)識(shí)，這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)（成纖維細(xì)胞）同時(shí)抑制另一類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)（表皮細(xì)胞）。培養(yǎng)基制備器應(yīng)存放于冷暗處，較好能放于普通冰箱內(nèi)。福建自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類(lèi)物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。湖南培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試

溶化：培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂，培養(yǎng)基不需要加熱；如果含有瓊脂，則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸，完全溶解后，再補(bǔ)齊所需水，并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大，可用不銹鋼鍋加熱溶化，可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng)，防止焦化，如有焦化現(xiàn)象，配制的培養(yǎng)基就不能使用，要重新配制。配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅或鐵的容器溶化，因銅或鐵制容器可能會(huì)使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo)，影響實(shí)驗(yàn)（培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L，細(xì)菌不宜生長(zhǎng)，鐵含量超過(guò)0.14mg/L，妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害）。對(duì)容易發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生沉淀的藥品，要分開(kāi)溶解，較后加入培養(yǎng)基，如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。湖南培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試

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