過濾:配成的培養(yǎng)基,若無特殊要求,可省略此步。若有沉淀或渾濁,需要澄清的,液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾。而固體培養(yǎng)基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達到澄清的要求,則可用蛋清澄清法,即培養(yǎng)基加熱冷卻到50℃~60℃,裝入三角瓶內(不超過容量的二分之一),按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清,用力搖晃3min~5min,高壓蒸汽滅菌121℃、20min,取出趁熱過濾即可。擺斜面:裝在試管中的瓊脂培養(yǎng)基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并完成適時地斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。培養(yǎng)基制備器是一類化學成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。廣西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營養(yǎng)物質,總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復雜,不同微生物對營養(yǎng)物質的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質、核酸、維生素等復雜的有機物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應該)由簡單的無機物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質,而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言,有細菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實驗室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細菌,用高氏I號合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。江蘇觸摸屏培養(yǎng)基制備器在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)稱為液中培養(yǎng)、液體培養(yǎng)或液內培養(yǎng)。
馬鈴薯培養(yǎng)基的分裝:1.根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同容量的三角燒瓶、試管中。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時外溢。2.瓊脂斜面分裝量為試管容量的1/5,滅菌后須趁熱放置成斜面,斜面長約為試管長的2/3。3.半固體培養(yǎng)基分裝量約為試管長的1/3,滅菌后直立凝固待用。4.高層瓊脂分裝量約為試管的1/3,滅菌后趁熱直立,待冷后凝固待用。5.液體培養(yǎng)基分裝于試管中,約是試管長度的1/3。6.瓊脂平板:將滅菌(或加熱融化)后的培養(yǎng)基冷至50℃左右,以無菌手續(xù)傾人滅菌平皿內,內徑225px的平皿傾注培養(yǎng)基約13~15ml,輕搖平皿底,使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部,待凝固后即成,傾注培養(yǎng)基時,切勿將皿蓋全部啟開,以免空氣中塵埃及細菌落入新制成的平板培養(yǎng)基(簡稱平板),表面水分較多,不利于細菌的分離,通常應將平皿倒扣擱置于37℃培養(yǎng)箱內約30分鐘待平板平面干燥后使用。
培養(yǎng)基的制備:(1)稱量:根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;(3)分裝:根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據(jù)試管的大小而定).液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.(4)塞硅膠塞:裝好培養(yǎng)基的試管應塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無菌水的制備:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶內,防止暴沸.(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質量直接影響培養(yǎng)基的質量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備器全自動程序,無人值守;分裝過程無需人工干預。安徽培養(yǎng)基制備器售后服務
液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。廣西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
一種培養(yǎng)基制備分裝一體機,其中所述自動分裝系統(tǒng)包括一圓形轉盤,所述圓形轉盤上設有多個沿圓周方向均勻間隔設置的凹槽,所述凹槽內設有培養(yǎng)皿,所述圓形轉盤上方還設有隨該圓形轉盤一起轉動的玻璃護蓋,所述出料管的出口段定位于所述玻璃護蓋與所述培養(yǎng)皿之間,出料管的出口與培養(yǎng)皿對應。地,上述的一種培養(yǎng)基制備分裝一體機,其中所述加熱元件為電熱管,該電熱管內設有電熱絲。地,上述的一種培養(yǎng)基制備分裝一體機,其中所述加熱元件為電熱膜,該電熱膜由內向外依次包括覆蓋連接于所述容腔底部壁體上的內絕緣層,厚膜電路層和外絕緣層。廣西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
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