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培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)好好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基好終pH之用。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):無(wú)需排干空氣。陜西培養(yǎng)基制備器廠(chǎng)家
天然培養(yǎng)基是指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類(lèi)培養(yǎng)基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。較廣使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類(lèi)物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。血清種類(lèi):目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因:來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解。牛血清對(duì)絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。云南瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類(lèi)物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。
培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各類(lèi)微生物生長(zhǎng)繁殖的需要,用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營(yíng)養(yǎng)物。一般用來(lái)分離、培養(yǎng)菌類(lèi)。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)掌握如下原則和要求:(一)培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈,稱(chēng)取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器十分靈活——隨時(shí)可以讓你快速的滅菌制備高質(zhì)量的培養(yǎng)基。這可以好大限度的減少用于儲(chǔ)藏成品培養(yǎng)皿的空間,消除對(duì)培養(yǎng)皿儲(chǔ)存的管理,保證高質(zhì)量的培養(yǎng)基均一性。它能夠迅速而溫和的滅菌培養(yǎng)基并精確監(jiān)控和控制滅菌過(guò)程中的時(shí)間、溫度、壓力等參數(shù),從而保證其所有滅菌的產(chǎn)品都擁有同樣的,其直觀(guān)的圖形界面及可編程功能能使每個(gè)人都能方便的操作這臺(tái)儀器。培養(yǎng)基制備程序:Sampleprep可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水浴)模式預(yù)先溶解。同時(shí),直觀(guān)的圖形化界面使沒(méi)有經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn)的人員也能方便的操作。用戶(hù)可以自定義設(shè)置多達(dá)50個(gè)滅菌程序,比如滅菌溫度、時(shí)間、分裝溫度等。它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用。培養(yǎng)基制備器可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率。
孢子培養(yǎng)基:孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對(duì)這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長(zhǎng),產(chǎn)生較多較好的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對(duì)孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:靠前,營(yíng)養(yǎng)不要太豐富(特別是有機(jī)氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類(lèi)的培養(yǎng)基上都能很好地生長(zhǎng)和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長(zhǎng)菌絲而不長(zhǎng)孢子。第二,所用無(wú)機(jī)鹽的濃度要適量,不然也會(huì)影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因?yàn)樗鼈兒可?,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。大米培養(yǎng)基的水分需控制在21%-50%,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前。培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。陜西培養(yǎng)基制備器廠(chǎng)家
在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。陜西培養(yǎng)基制備器廠(chǎng)家
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類(lèi),應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。陜西培養(yǎng)基制備器廠(chǎng)家