培養(yǎng)基的實驗室制備:―般要求:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的好基礎(chǔ)步驟之一，使用脫水培養(yǎng)基和其他成分，尤其是含有有毒物質(zhì)（如膽鹽或其他選擇劑）的成分時，應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時，應(yīng)嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量（體積）、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時，應(yīng)按照配方準確配制，并記錄相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間）、配置日期、人員等，以便溯源。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：容器可自行拆卸更換和消毒，操作方便。中國澳門自動培養(yǎng)基制備器

微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點：培養(yǎng)基滅菌處理：分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型：高壓蒸汽滅菌方式，此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。對于小份：使用121°C十五分鐘；大份：121°C三十分鐘；對于含碳水化合物的中.海培養(yǎng)基，需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式，此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。過濾除菌方式，過濾除菌，采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當中'海培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。中國澳門瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。

培養(yǎng)基的配制：分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角瓶：若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15～20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。試管分裝：液體培養(yǎng)基一般裝4～5ml，約試管的1/4高度；固體斜面培養(yǎng)基一般裝3～4ml，約試管的1/5高度。包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養(yǎng)成分會被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個斜面，約占試管長度的1/2。貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

干粉培養(yǎng)基有哪些注意事項：①熔化培養(yǎng)基制備必須在玻璃容器中進行，如果使用銅或鐵器皿，會影響細菌的生長。②注意按照先加水再加顆粒干粉培養(yǎng)基順序，反之則不利于培養(yǎng)基溶解。③單在必要時進行加熱溶解操作，其加熱溫度也不要過高時間不要過長，主要原因是高溫會破壞瓊脂和培養(yǎng)基中的一些營養(yǎng)成分。④生產(chǎn)的干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基都經(jīng)過pH校準，使用時無需特殊驗證。因為高壓會影響pH值，則應(yīng)在高壓后驗證pH值。⑤液體培養(yǎng)基通常是預(yù)先包裝好的，分裝時應(yīng)注意每管的用量不得高于試管的三分之二。⑥高壓后冷卻至五六十度環(huán)境，再導(dǎo)入平板，否則會形成更多的水蒸氣，導(dǎo)致細菌分離數(shù)量。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。

簡單制作培養(yǎng)基，需要完成以下幾個主要步驟：需要對其進行消毒處理，普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備，如無特殊要求，可用于滅菌。一些熱成分，如碳水化合物，應(yīng)該單獨制備20%或更多的濃縮液，過濾或間斷殺菌，然后通過無菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中。在低溫下，明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應(yīng)經(jīng)無菌處理后，加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質(zhì)量進行檢測。每次處理完培養(yǎng)基，都要仔細檢查，如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等，要進行篩選和棄置，才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚，若有細菌生長，培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基，24h培養(yǎng)，對生長不良或無菌的菌株進行培養(yǎng)，追蹤其產(chǎn)生原因，并反復(fù)接種。如不發(fā)生變化，應(yīng)丟棄培養(yǎng)基，禁止使用。培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌。廣西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器可以將配置、滅菌合二為一，較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率。中國澳門自動培養(yǎng)基制備器

配制培養(yǎng)基需要哪些制備：（1）稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖，加水直到培養(yǎng)基較終容積的34，加熱溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基（不加瓊脂）時無需加熱。（2）按需要加入一定量的各種貯存母液，包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要，培養(yǎng)基中所需的維生素，可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。（3）蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，一般以5.66.0為好。（4）培養(yǎng)基分裝，分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌，也可以高壓滅菌后再進行培養(yǎng)基的無菌分裝，室溫下存放備用。暫時不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存，而含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。中國澳門自動培養(yǎng)基制備器