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簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基成分,介質(zhì)中使用的化學(xué)物質(zhì)應(yīng)該是化學(xué)純品,銅鍋或鐵鍋易導(dǎo)致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細(xì)菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋?zhàn)?,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結(jié)焦。若發(fā)現(xiàn)結(jié)焦,則不能使用介質(zhì),需重新調(diào)配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過程中培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生變化,因此應(yīng)在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調(diào)整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經(jīng)驗(yàn),掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在調(diào)整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。培養(yǎng)基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡易分裝,光耦隔離;外控模擬量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。云南培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基的物理滅菌方法:(一)加熱滅菌法:加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸,導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。(二)紫外線滅菌法:是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~300nm,滅菌力較強(qiáng)的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。紫外線進(jìn)行直線傳播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但較易穿透清潔空氣及純凈的水。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器報價培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。
培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。
溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時攪動,防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細(xì)菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害)。對容易發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):溫度探頭測量培養(yǎng)基實(shí)際溫度,控溫很準(zhǔn)。
培養(yǎng)基制備的基本方法:1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋子。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器報價
在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價值。云南培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基配制:素:為防止培養(yǎng)時期細(xì)菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)素,一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細(xì)胞,但在離體培養(yǎng)過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細(xì)胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。云南培養(yǎng)基制備器定制