培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機物。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,較多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh) 各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。
培養(yǎng)基的質(zhì)量測試:每批培養(yǎng)基制備好以后,應(yīng)仔細檢查一遍,如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長,即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24~48小時,如無菌生長或生長不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次,如結(jié)果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不能使用。培養(yǎng)基的保存:培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽。
背景技術(shù):培養(yǎng)基是供微生物、植物、動物組織和細菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料,完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲存,定量使用的,屬于一種高新產(chǎn)業(yè)。傳統(tǒng)的制備培養(yǎng)基的過程先將培養(yǎng)基粉末進行人工配置,攪勻,然后再裝到錐形瓶里邊在蒸汽滅菌器里邊滅菌再使用,這需要耗費大量的人力物力,而且效率不高。目前,國外進口的培養(yǎng)基制備器,可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率,而且節(jié)省了人力物力,但是國外的的進口設(shè)備價格比較昂貴,因此造成了生產(chǎn)成本的高居不下,在用戶的使用范圍上造成了一定的局限性。目前國內(nèi)沒有公司生產(chǎn)該的培養(yǎng)基制備器,因此,完成培養(yǎng)基配置、滅菌一體化顯得尤為重要。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。
簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基成分,介質(zhì)中使用的化學(xué)物質(zhì)應(yīng)該是化學(xué)純品,銅鍋或鐵鍋易導(dǎo)致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋子,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結(jié)焦。若發(fā)現(xiàn)結(jié)焦,則不能使用介質(zhì),需重新調(diào)配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過程中培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生變化,因此應(yīng)在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調(diào)整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經(jīng)驗,掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在調(diào)整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:儀器蓋設(shè)計保護鎖,超過100度自動加鎖,使實驗環(huán)境更安全。陜西培養(yǎng)基制備器價格
低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正。吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器