培養(yǎng)基配置原則：滅菌處理，要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對(duì)所用器材及工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。對(duì)培養(yǎng)基而言，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長(zhǎng)時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌，某些對(duì)糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀。培養(yǎng)基制備器在分裝過程中，溫度始終保持在設(shè)定的分裝溫度。遼寧培養(yǎng)基制備器廠家

培養(yǎng)基的滅菌：培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和壓力，按其成分不同而定。普通培養(yǎng)基采用121℃、滅菌15min，但容器和裝量較大時(shí)，應(yīng)延長(zhǎng)至20min。含糖培養(yǎng)基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動(dòng)蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，連續(xù)3d，間歇滅菌。血清或組織液，采用低熱56—58水浴1h，連續(xù)5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等，可用細(xì)菌過濾器，過濾除菌。高壓滅菌應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，必須逐漸加熱，徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣，再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時(shí)間，達(dá)到全部殺滅微生物。以上的滅菌時(shí)間和溫度要經(jīng)過驗(yàn)證確認(rèn)，如不同類型培養(yǎng)基混合一起滅菌時(shí)宜采用115℃、滅菌30min為好。自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器廠家培養(yǎng)基成份的混合與溶化：培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。

固體斜面培養(yǎng)基配制步驟：1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì)，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄：每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號(hào)，較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，較好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。

如何避免沉淀物的產(chǎn)生：在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作：①解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。②解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。培養(yǎng)基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器，能夠使內(nèi)部迅速冷卻。

培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試：每批培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其較終pH.將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24~48小時(shí)，如無菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。培養(yǎng)基的保存：培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，較好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時(shí)間不宜超過一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。湖北培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。遼寧培養(yǎng)基制備器廠家

滅菌：分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下：1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法，小量分裝時(shí)，用121℃、15min；滅菌量大時(shí)，用121℃、30min滅菌；含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌，避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對(duì)含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基，可使用此方法。3.過濾除菌:以過濾的方法除菌，用無菌操作技術(shù)，定量加入培養(yǎng)基。血液、物品可用無菌操作技術(shù)抽取，加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí)，可用此法。遼寧培養(yǎng)基制備器廠家