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培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。中國(guó)澳門培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
三角培養(yǎng)瓶是細(xì)胞培養(yǎng)中的常用耗材,也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲(chǔ)存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶,很多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。山西瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
購(gòu)買的培養(yǎng)基到貨后,應(yīng)有專人做好接受和驗(yàn)收工作,應(yīng)仔細(xì)核對(duì)生產(chǎn)企業(yè)提供的資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號(hào)、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨后都應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè),滿足檢測(cè)方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基的儲(chǔ)存:干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處,要避免陽(yáng)光直射;未開瓶的培養(yǎng)基在室溫下的保存期限以廠家提供為準(zhǔn),開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應(yīng)注意防潮并盡快用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)檢查,如容器密閉性復(fù)查、開封日期、內(nèi)容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。
簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,必須將其過(guò)濾并澄清液體介質(zhì)必須完全澄清,普通液體介質(zhì)可用濾紙過(guò)濾,濾紙應(yīng)折成折扇狀或漏斗狀,以免濾紙因水力不均而破裂。當(dāng)溫度較高時(shí),培養(yǎng)基可以用干凈的白天鵝絨過(guò)濾。新制肉、肝、血、馬鈴薯等濾液,必須用絲絨布過(guò)濾,再用濾紙一次又一次地過(guò)濾。若過(guò)濾方法不能滿足澄清的要求,則應(yīng)采用蛋清過(guò)濾。需要對(duì)介質(zhì)分類處理,按培養(yǎng)基及試管內(nèi)其它燒瓶使用的容器、用途分為適當(dāng)。貨運(yùn)量超過(guò)每2個(gè)集裝箱3個(gè)容量包裝的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮紙塞紙封堵容器內(nèi)棉。電動(dòng)式裝配機(jī)采用定量很好的重用或半自動(dòng)解。預(yù)處理和預(yù)處理對(duì)滅菌容器的清洗要干燥,滅菌時(shí)要徹底,培養(yǎng)基要干燥。一只小玻璃瓶批培養(yǎng)基被檢測(cè)出,培養(yǎng)基被一批pH批作為該值基準(zhǔn)時(shí),應(yīng)被分成20mL的培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理。要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基配置原則:在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在配制培養(yǎng)基過(guò)程中,泡沫的存在對(duì)滅菌處理極不利,因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋?,使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度。固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。中國(guó)澳門培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì).再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。中國(guó)澳門培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器