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簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:需要選擇培養(yǎng)基配方,同一種培養(yǎng)基,其表達(dá)方式往往存在著差異。所以,除了應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定編制之外,我們一般應(yīng)盡可能收集有關(guān)數(shù)據(jù),加以比較和核對(duì),然后根據(jù)自己的目的選擇和記錄數(shù)據(jù)來(lái)源。需記錄培養(yǎng)基的制備,培養(yǎng)基的制備記錄包括培養(yǎng)基的名稱、配方及其來(lái)源、pH值、滅菌溫度、時(shí)間、配制日期、制備人等,并且要復(fù)印記錄和保存原始記錄備查。對(duì)副本的記錄應(yīng)該和培養(yǎng)基一起保存,以防出現(xiàn)混亂。需稱重培養(yǎng)基的成分,培養(yǎng)基成分要準(zhǔn)確稱量,并注意防止混淆。每一種成分稱量完畢后,都要在分裝的一面打上記號(hào),然后將分裝的藥物一起放在左邊。每一個(gè)成分稱量完之后,都會(huì)向右移動(dòng)。全部稱量完畢,應(yīng)再次檢查。培養(yǎng)基制備器各種工作模式預(yù)存五組分配參數(shù)。青海不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營(yíng)養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中,于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計(jì)校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用。化學(xué)分類:天然培養(yǎng)基指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物的營(yíng)養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。云南培養(yǎng)基制備器售后制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。
根據(jù)培養(yǎng)基的用途來(lái)區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或克制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等克制原核微生物的生長(zhǎng);而制霉菌素、灰黃霉素等能克制真核微生物的生長(zhǎng);結(jié)晶紫能克制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。2)增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開(kāi)快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。
馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過(guò)程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝:按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞:培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。液體培養(yǎng)基具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點(diǎn)還添加克菌素、色素、和血清。為方便長(zhǎng)期保管,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀。使用時(shí)再配制成可用的培養(yǎng)基,整個(gè)制備過(guò)程培養(yǎng)基需要嚴(yán)格的滅菌。目前對(duì)培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因?yàn)檎羝哂泻軓?qiáng)的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,發(fā)生凝固、變性,從而導(dǎo)致微生物無(wú)法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時(shí)間與滅菌程度和營(yíng)養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。平板培養(yǎng)基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器多少錢
分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。青海不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會(huì)使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細(xì)菌不宜生長(zhǎng),鐵含量超過(guò)0.14mg/L,妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害)。對(duì)容易發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生沉淀的藥品,要分開(kāi)溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。青海不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器