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培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進(jìn)行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力,破壞細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。重慶實驗室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn),水的電阻應(yīng)為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。河北培養(yǎng)基制備器哪個品牌好半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對.再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。
MS培養(yǎng)基的特點:MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來對愈傷組織可以進(jìn)行誘導(dǎo),或者用來培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時,它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無機養(yǎng)分,能夠滿足植物細(xì)胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化。
Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水浴)模式預(yù)先溶解。同時,直觀的圖形化界面使沒有經(jīng)過專門培訓(xùn)的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設(shè)置多達(dá)50個滅菌程序,比如滅菌溫度、時間、分裝溫度等。它們可以被儲存起來并隨時調(diào)用。培養(yǎng)基制備器開始運行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。黑龍江培養(yǎng)基制備器報價
全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:溫度探頭測量培養(yǎng)基實際溫度,控溫很準(zhǔn)。重慶實驗室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。重慶實驗室培養(yǎng)基制備器