培養(yǎng)基制備的基本方法：1.培養(yǎng)基配方的選定：同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外．一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料．加以比較核對(duì)。2、培養(yǎng)基的制備記錄，每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)推各稱(chēng)，配方及其來(lái)源．和各種成份的牌號(hào)。較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂．較好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱(chēng)取完畢后，即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。湖南觸摸屏培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的儲(chǔ)存：干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處，培養(yǎng)基要避免陽(yáng)光直射；未開(kāi)瓶的培養(yǎng)基在室溫下的保存期限以廠家提供為準(zhǔn)，培養(yǎng)基開(kāi)瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕，應(yīng)注意防潮并盡快用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)檢查，如容器密閉性復(fù)查、一次開(kāi)封日期、內(nèi)容物的感官檢查，如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。廣西實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh) 各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。

培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，較后必須加以補(bǔ)足。

培養(yǎng)基配制：配制用水，培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬(wàn)歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至7.2-7.4，若pH值超過(guò)7.6或遠(yuǎn)低于6.8，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。血清：培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類(lèi)、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備器完全稱(chēng)取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。

過(guò)濾：配成的培養(yǎng)基，若無(wú)特殊要求，可省略此步。若有沉淀或渾濁，需要澄清的，液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾。而固體培養(yǎng)基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過(guò)濾。如果過(guò)濾法還不能達(dá)到澄清的要求，則可用蛋清澄清法，即培養(yǎng)基加熱冷卻到50℃~60℃，裝入三角瓶?jī)?nèi)（不超過(guò)容量的二分之一），按1000ml加入1個(gè)~2個(gè)雞蛋的蛋清，用力搖晃3min~5min，高壓蒸汽滅菌121℃、20min，取出趁熱過(guò)濾即可。擺斜面：裝在試管中的瓊脂培養(yǎng)基，在滅菌完成后，趁熱立即擺放在木棒（或玻璃棒）上，并完成適時(shí)地斜度，冷卻后，瓊脂凝固即成斜面。斜面長(zhǎng)度不要超過(guò)試管的二分之一。培養(yǎng)基制備器具有液量分配，時(shí)間分配，復(fù)制分配三種工作模式。甘肅培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。湖南觸摸屏培養(yǎng)基制備器

分裝：配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中，分裝試管，如果試管量很大，可用自動(dòng)分液器。如果試管量少，可用漏斗分裝。分裝量不超過(guò)容器容積的三分之二。三角瓶以不超過(guò)容積的二分之一為宜；瓊脂斜面以不超過(guò)試管長(zhǎng)度的五分之一為宜，滅菌后，擺成的斜面為培養(yǎng)基的三分之一、底層為三分之二的量為宜；半固體瓊脂分裝量為試管長(zhǎng)度的的三分之一；用來(lái)接種或保菌的高層瓊脂，分裝量為試管長(zhǎng)度的四分之一或三分之一，用來(lái)接種厭氧菌的要達(dá)到三分之二；瓊脂平板，內(nèi)徑90mm的以13ml~15ml為宜，內(nèi)徑70mm的平板為8ml~10ml，制成的瓊脂平板。湖南觸摸屏培養(yǎng)基制備器