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溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會(huì)使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細(xì)菌不宜生長(zhǎng),鐵含量超過(guò)0.14mg/L,妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害)。對(duì)容易發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生沉淀的藥品,要分開(kāi)溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。培養(yǎng)基制備器可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動(dòng)泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。四川培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2.培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。新疆瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱(chēng),配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂,好好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱(chēng)完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱(chēng)取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱(chēng)取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。
如何避免沉淀物的產(chǎn)生:在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:①解凍血清時(shí),請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產(chǎn)生沉淀物。②解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。培養(yǎng)基是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料。
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水?dāng)嚢杈鶆?。如?zhǔn)備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無(wú)法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因?yàn)殂~或鐵容器可能會(huì)導(dǎo)致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細(xì)菌不適宜生長(zhǎng)。鐵含量超過(guò)0.14毫克每升,防止細(xì)菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨(dú)溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。半組合培養(yǎng)基指一類(lèi)主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。新疆瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。四川培養(yǎng)基制備器定制
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):培養(yǎng)基分裝,準(zhǔn)備好的中.海培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動(dòng)分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。分液量不超過(guò)容器體積的三分之二。三角瓶不要超過(guò)體積的二分之一;瓊脂斜面不要超過(guò)試管長(zhǎng)度的五分之一。滅菌后斜面應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之一,底層應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之二;半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一;用于接種或保護(hù)細(xì)菌的高級(jí)瓊脂,分裝試管長(zhǎng)度的三分之一和四分之一,接種厭氧菌的量應(yīng)達(dá)到三分之二;瓊脂平板90毫米內(nèi)徑13~15毫升,內(nèi)徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水,可將平板倒置,置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘,晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中,與該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。四川培養(yǎng)基制備器定制