培養(yǎng)基制備的基本方法:1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基根據物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。中國澳門不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的脫氣:必要時,在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩(wěn)定的添加成分應在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應采用安全的方式,并符合相關法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。廣西Systec培養(yǎng)基制備器平板培養(yǎng)基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。
在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。
根據培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:滅菌-加熱-攪拌-混合-冷卻一體化控制。
購買的培養(yǎng)基到貨后,應有專人做好接受和驗收工作,應仔細核對生產企業(yè)提供的資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數量、外觀特征、批號、保質期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨后都應對培養(yǎng)基的質量進行檢測,滿足檢測方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基的儲存:干粉培養(yǎng)基應保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;未開瓶的培養(yǎng)基在室溫下的保存期限以廠家提供為準,開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應注意防潮并盡快用完。應定期對儲存中的培養(yǎng)基進行常規(guī)檢查,如容器密閉性復查、開封日期、內容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。培養(yǎng)基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)。云南不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器真彩色液晶屏顯示,觸摸屏加按鍵操作。中國澳門不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
高壓滅菌造成培養(yǎng)基結焦焦化問題:在實驗過程中,檢測人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結焦焦化現(xiàn)象。微生物認為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養(yǎng)基結焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。中國澳門不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器