培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過(guò)濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過(guò)濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過(guò)濾。如過(guò)濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超過(guò)燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個(gè)雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過(guò)濾即可。固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。山東培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
培養(yǎng)基制備器:1.操作簡(jiǎn)單,安全可靠。溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋子,不存在意外打開(kāi),保證了環(huán)境和操作者的安全。內(nèi)部的管道和容器可以更換,方便移除和清洗。每一款MediaPrep高壓滅菌器都是這樣裝配和控制的,是一種標(biāo)準(zhǔn)配置。2.高效而強(qiáng)大的加熱和制冷系統(tǒng)功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱;快速制冷是通過(guò)循環(huán)水和壓力(加入內(nèi)部的軟化水產(chǎn)生的)所進(jìn)行的。利用與外部水連接的盤(pán)狀熱交換器,能夠使內(nèi)部迅速冷卻,整個(gè)過(guò)程包括:加熱、滅菌和冷卻(至50°C),依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度,只需60-120分鐘即可完成。負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生。空氣壓縮機(jī)是內(nèi)置的。全自動(dòng)控制程序,確保內(nèi)部溫度均一,從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量,整個(gè)過(guò)程,在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi),從初的加熱到混合和滅菌,后到冷卻,都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。中國(guó)澳門(mén)瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器天然培養(yǎng)基是指一類(lèi)利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的滅菌:培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,各種培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和壓力,按其成分不同而定。普通培養(yǎng)基采用121℃、滅菌15min,但容器和裝量較大時(shí),應(yīng)延長(zhǎng)至20min。含糖培養(yǎng)基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動(dòng)蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,連續(xù)3d,間歇滅菌。血清或組織液,采用低熱56—58水浴1h,連續(xù)5—6d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等,可用細(xì)菌過(guò)濾器,過(guò)濾除菌。高壓滅菌應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣,再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時(shí)間,達(dá)到全部殺滅微生物。以上的滅菌時(shí)間和溫度要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證確認(rèn),如不同類(lèi)型培養(yǎng)基混合一起滅菌時(shí)宜采用115℃、滅菌30min為好。
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類(lèi)固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。
在制備培養(yǎng)基時(shí),通常要考慮以下因素:(1)pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH=7.4下生長(zhǎng)得很好。盡管各細(xì)胞株之間細(xì)胞生長(zhǎng)*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細(xì)胞系以pH=7.4~7.7,轉(zhuǎn)化細(xì)胞以pH=7.0~7.4更合適。據(jù)報(bào)道,上皮細(xì)胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個(gè)簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍(lán)色,pH=7.8呈紫色。由于對(duì)顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無(wú)菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣,放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過(guò)測(cè)定滲透壓防止稱(chēng)量和稀釋等造成的誤差。培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。山東培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。山東培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì)。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱(chēng),配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱(chēng)取完畢后,即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。山東培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)