無菌補(bǔ)料：通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過一個(gè)septum膜，使用注射器將添加劑加入，確保了添加劑的無菌添加。無菌分裝：培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開，用于無菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無菌分裝，硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無菌空氣壓力分裝或通過連接到常見的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置，來進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。河北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：培養(yǎng)基分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。江蘇培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)稱為液中培養(yǎng)、液體培養(yǎng)或液內(nèi)培養(yǎng)。

血清培養(yǎng)基主要問題：血清的成份可能有幾百種之多，對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí)，這給研究工作帶來許多困難。血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)（成纖維細(xì)胞）同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)（表皮細(xì)胞）。

配制培養(yǎng)基的原則：控制培養(yǎng)基的條件，控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長(zhǎng)pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細(xì)菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反，C/N低的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，其pH則明顯上升。這是由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累，改變了培養(yǎng)基的pH，若不及時(shí)控制，將導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停止。有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生，或適當(dāng)提高滅菌溫度。

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：培養(yǎng)基分裝，準(zhǔn)備好的中.海培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動(dòng)分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一；瓊脂斜面不要超過試管長(zhǎng)度的五分之一。滅菌后斜面應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之一，底層應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之二；半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一；用于接種或保護(hù)細(xì)菌的高級(jí)瓊脂，分裝試管長(zhǎng)度的三分之一和四分之一，接種厭氧菌的量應(yīng)達(dá)到三分之二；瓊脂平板90毫米內(nèi)徑13~15毫升，內(nèi)徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水，可將平板倒置，置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘，晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中，與該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：儀器蓋設(shè)計(jì)保護(hù)鎖，超過100度自動(dòng)加鎖，使實(shí)驗(yàn)環(huán)境更安全。江蘇培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：力攪拌，確保培養(yǎng)基受熱均勻，營(yíng)養(yǎng)均一。河北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理：血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。若想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。何謂熱滅活：一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和啟動(dòng)。河北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器