對(duì)新藥研究開(kāi)發(fā)過(guò)程和系統(tǒng)性的認(rèn)識(shí)：新藥的開(kāi)發(fā)和評(píng)價(jià)是一個(gè)伴隨新藥開(kāi)發(fā)全過(guò)程的表現(xiàn)為不同階段性（臨床前、臨床開(kāi)發(fā)階段）。與各專業(yè)相互關(guān)聯(lián)性的系統(tǒng)工程。但國(guó)內(nèi)新藥研發(fā)者的認(rèn)識(shí)程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，停留在完成作業(yè)的思維層次。國(guó)內(nèi)新藥開(kāi)發(fā)企業(yè)：有效性綜合性研究和評(píng)價(jià)存在的問(wèn)題（只見(jiàn)樹(shù)木不見(jiàn)樹(shù)林，重單個(gè)研究輕整體策劃一不重視非臨床和臨床藥效的相互呼應(yīng)）。在臨床有效性研究中，也存在著沒(méi)有正確的試驗(yàn)?zāi)康?，研究方案設(shè)計(jì)不夠完善，使得的試驗(yàn)結(jié)果不能對(duì)一些關(guān)鍵的問(wèn)題做出回答；試驗(yàn)中不能?chē)?yán)格按方案內(nèi)容執(zhí)行，使試驗(yàn)結(jié)果無(wú)法評(píng)價(jià)；試驗(yàn)結(jié)果分析不夠等問(wèn)題。關(guān)于藥物功效的合理評(píng)價(jià)。藥物安全評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)

正常成人的心率在每分鐘60～100次之間，如果低于60次稱為心動(dòng)過(guò)緩，是心律失常的一個(gè)重要類型，患者平時(shí)有頭暈、乏力、倦怠、精神差的癥狀。研究表明，斑馬魚(yú)心血管系統(tǒng)的發(fā)育與人高度相似，雖然斑馬魚(yú)是單心房單心室，但其心臟結(jié)構(gòu)及功能與人高度保守。同時(shí)，由于斑馬魚(yú)具有透明易觀察等優(yōu)點(diǎn)，開(kāi)始被大量應(yīng)用于心血管疾病研究和藥物心血管毒性評(píng)價(jià)當(dāng)中。維拉帕米能阻滯心肌細(xì)胞慢通道，抑制Ca2+向細(xì)胞的內(nèi)流，阻礙心臟慢反應(yīng)電活動(dòng)，降低舒張期去極化速度，抑制竇房結(jié)的自律性，減慢心率；亦能延長(zhǎng)房室結(jié)的有效不應(yīng)期，減慢房室傳導(dǎo)。用解剖顯微鏡下觀察斑馬魚(yú)心率，模型對(duì)照組斑馬魚(yú)心率較正常斑馬魚(yú)明顯減慢。藥學(xué)服務(wù)與研究關(guān)于藥物安全性的評(píng)價(jià)。

基于斑馬魚(yú)模型實(shí)驗(yàn)，可進(jìn)行活性化合物發(fā)現(xiàn)、高通量藥物篩選、藥效評(píng)價(jià)、安全性評(píng)價(jià)、生物學(xué)質(zhì)量控制等臨床前研究，實(shí)驗(yàn)周期短、成本低，結(jié)果直觀，助力醫(yī)藥企業(yè)的藥物研發(fā)、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗腫瘤作用【評(píng)價(jià)原理】近三十年來(lái)，世界**發(fā)病率以年均3-5%的速度遞增，*類已成為人類**死因。1.**生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移將熒光標(biāo)記的人腫瘤細(xì)胞（呈紅色）移植到野生型斑馬魚(yú)體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞在斑馬魚(yú)體內(nèi)的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況可以被觀察到。2.腫瘤部位新生血管將熒光標(biāo)記的人腫瘤細(xì)胞（呈紅色）移植到轉(zhuǎn)基因血管熒光斑馬魚(yú)（呈綠色）體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞刺激斑馬魚(yú)新生血管情況可以被觀察到。3.腫瘤細(xì)胞凋亡將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚(yú)體內(nèi)，通過(guò)特異性熒光染色（凋亡細(xì)胞呈綠色），細(xì)胞凋亡情況可以被觀察到。4.腫瘤部位炎癥將人腫瘤細(xì)胞移植到轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞熒光斑馬魚(yú)（呈綠色）體內(nèi)，腫瘤部位炎癥反應(yīng)可以被觀察到。5.**病理將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚(yú)體內(nèi)，制作成病理切片，觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)變化。6.生存期將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚(yú)體內(nèi)，統(tǒng)計(jì)斑馬魚(yú)每日存活率、計(jì)算其生存期。

腦出血是指非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)部血管破裂引發(fā)的腦內(nèi)出血病癥，占全部腦卒中的20%～30%，急性期病死率為30%～40%。羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)是他汀類藥物發(fā)揮抑制作用的直接作用點(diǎn),HMGCR功能被抑制會(huì)影響血管的完整性和穩(wěn)定性，誘發(fā)腦出血。由于斑馬魚(yú)大腦具有典型脊椎動(dòng)物腦部形態(tài)學(xué)特征，血管與神經(jīng)系統(tǒng)在分子信號(hào)通路上與人和哺乳動(dòng)物的同源性達(dá)到85%以上。在大量攝入辛伐他汀后，斑馬魚(yú)腦部也會(huì)出現(xiàn)腦出血的情況，患有腦出血的斑馬魚(yú)的腦部會(huì)出現(xiàn)明顯的片狀出血，而正常斑馬魚(yú)沒(méi)有；由于腦出血斑馬魚(yú)的心搏輸出量和血流速度也會(huì)降低，利用血流分析儀可明顯觀察到。腦出血可直接造成反應(yīng)遲鈍、運(yùn)動(dòng)功能障礙，可通過(guò)行為分析軟件觀察斑馬魚(yú)的行為軌跡。我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚(yú)腦出血有4個(gè)指標(biāo)：1.腦出血發(fā)生率；2.心搏輸出量；3.血流速度；4.行為學(xué)（運(yùn)動(dòng)改善）。斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)半數(shù)致死濃度。

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和抗心衰藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入維拉帕米，模型對(duì)照組與抗心衰藥物組都攝入了等量的維拉帕米（維拉帕米通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）?？剐乃ニ幬锝M在攝入維拉帕米的同時(shí)加入地高辛、美托洛爾類的抗心衰藥物。服用一段時(shí)間抗心衰藥物后，觀察斑馬魚(yú)心包水腫和靜脈淤血的情況；用心跳血流分析系統(tǒng)檢測(cè)心搏出量和血流速度的情況?？梢钥吹?，服用抗心衰藥物組的心包面積和靜脈瘀血面積與未攝入維拉帕米的正常對(duì)照組基本相似，沒(méi)有明顯的心衰情況。轉(zhuǎn)基因NBT斑馬魚(yú)評(píng)價(jià)周?chē)窠?jīng)保護(hù)劑功效。藥物安全性檢測(cè)

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)骨質(zhì)疏松癥。藥物安全評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)

毛蕊異黃酮，作為從黃芪中分離得到的異黃酮類成分已被證明了其具有促血管新生的活性，其表現(xiàn)為促進(jìn)斑馬魚(yú)胚胎腸下血管增粗，誘導(dǎo)血管及血管之間的交聯(lián)的形成。斑馬魚(yú)心血管系統(tǒng)在分子信號(hào)通路上與人和哺乳動(dòng)物的同源性達(dá)到85%以上，近年來(lái)斑馬魚(yú)大量地應(yīng)用于心血管疾病研究領(lǐng)域。我們?cè)u(píng)價(jià)血管形成促進(jìn)功效的指標(biāo)為腸下血管面積。我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成二組，分別是正常對(duì)照組和服用促血管形成劑組。其中正常對(duì)照組不做任何處理。服用促血管形成劑組加入毛蕊異黃酮之類的促血管形成劑。服用藥物一段時(shí)間后在熒光顯微鏡下分析斑馬魚(yú)腸下血管面積。藥物安全評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)