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飛秒激光多光子顯微鏡成像分辨率

來源: 發(fā)布時間:2024-07-20

從產(chǎn)品類型及技術方面來看,正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場。2020年,全球多光子激光掃描正置顯微鏡市場達到87.30百萬美元,預計到2027年該部分市場將達到154.02百萬美元,年復合增長率(2021-2027)為8.48%。中國多光子激光掃描正置顯微鏡市場達到13.32百萬美元,預計到2027年該部分市場將達到25.21百萬美元,年復合增長率(2021-2027)為9.58%。從產(chǎn)品市場應用情況來看,研究機構為主要應用領域,2020年約占全球市場46.28%。2020年,全球多光子激光掃描顯微鏡研究機構應用消費量為174臺,預計2027年達到349臺,2021-2027年復合增長率(CAGR)為9.72%。多光子顯微鏡,實現(xiàn)無創(chuàng)、無標記的生物組織觀測方案。飛秒激光多光子顯微鏡成像分辨率

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2020年,JianglaiWu等人提出提高2PM橫向掃描速率的裝置,稱為FACED(free-spaceangular-chirp-enhanceddelay)。圓柱透鏡將激光束一維聚焦,會聚角為Δθ。光束進入到一對幾乎平行的高反射鏡中,其間距為S,偏角為α。經(jīng)過反射鏡多次反射后,激光脈沖被分成多個傳播方向不同的子脈沖(N=Δθ/α),脈沖間以2S/c的時間延遲(c,光速)回射。FACED模塊輸出處的子脈沖序列可以看作從虛擬光源陣列發(fā)出的光,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成了一個空間上分離且時間延遲的焦點陣列。然后將該模塊并入具有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標準雙光子熒光顯微鏡中。光源是具有1MHz重復頻率的920nm的激光器,通過FACED模塊可產(chǎn)生80個脈沖焦點,其脈沖時間間隔為2ns。這些焦點是虛擬源的圖像,虛擬源越遠,物鏡處的光束尺寸越大,焦點越小。光束沿y軸比x軸能更好地充滿物鏡,從而導致x軸的橫向分辨率為0.82μm,y軸的橫向分辨率為0.35μm。美國布魯克多光子顯微鏡Ultima 2P Plus多光子顯微鏡是衡量一個國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標準之一。

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隨著現(xiàn)代分子生物學技術的快速發(fā)展和科學技術的進步,特別是后基因組時代的到來,人們已經(jīng)能夠根據(jù)需要建立各種細胞模型,這為在體內(nèi)研究基因表達、分子間相互作用、細胞增殖、細胞信號轉(zhuǎn)導、誘導分化、細胞凋亡和新生血管生成提供了良好的生物學條件。然而,盡管利用現(xiàn)有的分子生物學方法對基因表達與蛋白質(zhì)的相互作用進行了深入細致的研究,但仍然無法實現(xiàn)對蛋白質(zhì)和基因活性的實時動態(tài)監(jiān)測。在細胞的生理過程中,基因尤其是蛋白質(zhì)的表達、修飾和相互作用往往是可逆的、動態(tài)變化的。目前,分子生物學方法無法捕捉到蛋白質(zhì)和基因的這些變化,但獲得這些信息對于研究基因表達與蛋白質(zhì)的相互作用非常重要。因此,有必要發(fā)展一種動態(tài)、實時、連續(xù)監(jiān)測蛋白質(zhì)和基因活性的方法。

作為一個多學科交叉、知識密集、資金密集的高技術產(chǎn)業(yè),多光子顯微鏡涉及醫(yī)學、生物學、化學、物理學、電子學、工程學等學科,生產(chǎn)工藝相對復雜,進入門檻較高,是衡量一個國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標準之一。過去的5年,多光子顯微鏡市場集中,由于投產(chǎn)生產(chǎn)的成本較高,技術難度大,目前涌現(xiàn)的新企業(yè)不多。顯微鏡作為一個傳統(tǒng)的高科技行業(yè),其作用至今沒有被其他技術顛覆,只是不斷融合并發(fā)展相關技術,在醫(yī)療和其他精密檢測領域發(fā)揮著更大的作用。顯微鏡的商業(yè)化發(fā)展已進入成熟期,主要需求來自教學、生命科學的研究及精密檢測等,全球市場呈現(xiàn)平緩的增長態(tài)勢。然而,顯微鏡產(chǎn)品(如多光子顯微鏡、電子顯微鏡)正拉動市場需求,多光子顯微鏡市場發(fā)展?jié)摿薮?。多光子顯微鏡作為一種研究微觀結構和功能的技術,在眾多領域得到了普遍的應用。

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光學成像技術與分子生物學技術的結合為研究上述科學問題提供了條件與可能。因此,在現(xiàn)代分子生物學技術基礎上,急需發(fā)展新的成像技術。在動物體內(nèi),如何實現(xiàn)基因表達及蛋白質(zhì)之間相五作用的實時在體成像監(jiān)測是當前迫切需要解決的重大科學技術問題。這是也生物學、信息科學(光學)和基礎臨床醫(yī)學等學科共同感興趣的重大問題。對這-一一科學問題的研究不僅有助于闡明生命活動的基本規(guī)律、認識疾病的發(fā)展規(guī)律,而且對創(chuàng)新藥物研究、藥物療效評價以及發(fā)展疾病早期診斷技術等產(chǎn)生重大影響。多光子顯微鏡,提高樣品成像質(zhì)量,降低樣品損害程度。飛秒激光多光子顯微鏡成像分辨率

多光子顯微鏡的分辨率比傳統(tǒng)的單光子共聚焦要低的多。飛秒激光多光子顯微鏡成像分辨率

SternandJeanMarx在評論中說:祖家能夠在更為精細的層次研究樹突的功能,這在以前是完全不可能的。新的技術(如腦片的膜片鉗和雙光子顯微使人們對樹突的計算和神經(jīng)信號處理中的作用有了更好的理解。他們解釋了是樹突模式和形狀多樣性,及其獨特的電、及其獨特的電化學特征使神經(jīng)元完成了一系列的專門任務。雙光子與共聚焦在發(fā)育生物學中的應用雙光子∶每2.5分鐘掃描一次,觀察24小時,發(fā)育到桑椹胚和胚泡階段共聚焦∶每15分鐘掃描一次,觀察8小時后細胞分裂停止,不能發(fā)育到桑椹胚和胚泡階段共聚焦激發(fā)時的細胞存活率為多光子系統(tǒng)的10~20%。飛秒激光多光子顯微鏡成像分辨率