科學家利用鈣成像技術記錄大腦活動。隨著功能光學成像技術的發(fā)展,神經學家們已經可以研究腦區(qū)和神經元內部的工作情況。功能鈣成像技術就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內游離鈣離子濃度,以此daibiao細胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應用于實時監(jiān)測一群相關神經元內鈣離子的變化,從而判斷其功能活動。該技術的出現使得科學家可以親眼目睹神經信號在神經網絡之中時間和空間上的傳遞穿梭。長時間追蹤相同細胞,進行可重復的科學研究對自由行為動物進行慢性鈣成像研究。美國神經細胞鈣成像生產廠家
nVista神經元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進行大范圍的動態(tài)熒光成像的設備。通過nVist,您可以視覺化細胞活動,同步行為學,以及長期追蹤神經環(huán)路的活動。nVista被應用于全球的研究機構中,產生了影響力的大數據庫。主要特征:利用GCamp鈣離子探針進行成像功能完整的數據采集軟件,實現對焦,調焦,行為同步化單細胞分辨率下,可同時捕獲成百上千神經元活動長時間追蹤細胞,追蹤時間可長達數月電子對焦,保證視野范圍的恒定自由動物行為學:可運用標準行為學測量方法,行為操作箱,迷宮,曠場等可進行皮層,深部核團,以及腦干,中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進行適應性訓練鈣離子成像+自由活動行為學1.錨定特殊細胞類型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率,可以分析細胞在空間內的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內自由活動4.長時程追蹤同一細胞的放電規(guī)律變化:用于學習,記憶,藥物成癮等研究。5.可對腦內的深部核團進行記錄nVista神經元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經元超微鈣成像系統(tǒng)技術參數專業(yè)的數據采集軟件Inscopix數據采集軟件可記錄成百上千個神經元細胞。電子調焦功能,可通過軟件實現物理調焦。美國神經細胞鈣成像生產廠家鈣成像技術利用鈣離子流的優(yōu)勢在活神經細胞上直接可視化鈣信號。
轉基因Ca2+指示劑:轉基因技術和光遺傳技術的飛速發(fā)展,催生了基因編碼的Ca2+指示劑(GECIs)。它們不依賴于熒光染料,可以靶向特定的組織,如神經細胞、心肌細胞、T細胞等,并且可以避免熒光指示劑帶來的的許多問題,是監(jiān)測轉基因動物體內鈣離子的一個極好的工具。個基因編碼的鈣離子指示劑Cameleon早在1997年就發(fā)表了。它是利用與鈣離子結合后發(fā)生結構變化,作為供體的CFP和作為受體的YFP之間產生FRET的原理。2000年,GCaMP誕生了。它是增強型綠色熒光蛋白(EGFP)和鈣調蛋白(結合鈣離子)、鈣調蛋白結合肽M13組成的,結合鈣離子后,鈣調素-M13相互作用引起GFP空間結構變化,發(fā)出綠色熒光(圖5)。GCaMP的問世有著**性的意義,它改變了我們觀察神經元群體活動的方式,讓科學家們可以在成千上萬的細胞中,看到哪些神經元在放電,它們放電的模式和規(guī)律是怎樣的,從而進一步探索各種內在的神經機制。
鈣離子成像系統(tǒng):傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠對大腦淺層的神經元或在離體組織上進行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進行成像的時候實現高分辨率和高信噪比。例如,用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進行成像,研究神經元突觸后長時程控制(Wangetal.,2000);觀察小鼠運動皮層神經元在嗅覺選擇任務中刺激相關電位(Komiyamaetal.,2010)等等。不過,這些實驗還是需要對動物進行麻醉和固定,而神經科學領域很多研究更希望能夠對自由活動的動物進行研究。近年來出現了通過植入性的microscope或microlens進行freelymoving動物鈣成像的技術。如圖6中所示的光纖成像法:使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號被光纖收集,然后通過相機成像。動物頭部只需植入GRINlens,方便活動,而且可以同時植入多個lens來觀察不同的腦區(qū)之間的聯系和相互作用。不過這種成像方法的視野較小,分辨率也比較差。鈣成像相關儀器設備設計團隊一直在研究并提高系統(tǒng)成像幀速、系統(tǒng)信號水平。
對于雙光子(2P)鈣成像而言,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個大的深度限制因素,而對于三光子成像這兩個問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號。功能性三光子顯微鏡比結構性三光子顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,以便及時采樣神經元活動;需要更高的脈沖能量,以便在每個像素停留時間內收集足夠的信號。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經網絡,該網絡既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經元活動與行為聯系起來,需要同時監(jiān)控非常龐大且分布guangfan的神經元的活動,大腦中的神經網絡會在幾十毫秒內處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經元動力學,就需要MPM具備對神經元進行快速成像的能力??焖費PM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術鈣成像技術的不斷進步,使得人們對神經科學領域有了進一步的拓展。哈爾濱神經細胞鈣成像哪個好
鈣信號在大腦皮層中更能反映神經元的活性,因此神經元鈣信號的檢測對研究大腦皮層功能至關重要。美國神經細胞鈣成像生產廠家
鈣成像技術通常使用熒光染料或報告基因來標記細胞中的鈣離子。當細胞受到外界刺激時,鈣離子會進入細胞內,導致熒光染料或報告基因發(fā)出光信號。通過觀察光信號的強度和分布,可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術具有以下優(yōu)點:高靈敏度:可以檢測到細胞內微小的鈣離子濃度變化。實時性:可以實時記錄鈣離子濃度的變化過程。空間分辨率高:可以清晰地觀察到鈣離子在細胞內的分布情況。無創(chuàng)性:可以通過huo體成像技術觀察動物體內的鈣離子變化情況??芍貜托裕嚎梢詫ν蝗后w細胞進行多次成像,以評估不同處理或刺激的影響??傊?,鈣成像技術是一種強大的生物醫(yī)學研究工具,可以幫助科學家們更好地了解細胞生理和病理狀態(tài),為疾病診斷和zhi療提供有力支持。美國神經細胞鈣成像生產廠家