死細胞利用PI、7-AAD或EMA進行染色,這些染料不能夠?qū)罴毎M行染色。能夠同時進行細胞表面標志和活性分析為這個方法的優(yōu)勢。尤其適用于高度壞死的樣本。Z常用的是7-AAD,由于在488nm激發(fā)下,670nm左右為其Z大發(fā)射光,與FITC或PE進行多色標記非常適合。但是隨著時間延長,在固定的細胞群體,會重新分配7-AAD,很難區(qū)分死活細胞。因此,EMA,對于染色并在固定后12小時以上分析的標本是Z好的選擇。EMA與死細胞DNA穩(wěn)定的共價結(jié)合使長時間固定后仍能很好地區(qū)分固定前的死活狀態(tài)得以保證。細胞分析儀可分析細胞數(shù)量、活性、增殖、凋亡等多項指標。無錫細胞分析儀哪家好
流式細胞儀的光學(xué)檢測系統(tǒng):流式細胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染料染色的細胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的接收方向與激光束垂直,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。光電倍增管接收的信號被積分放大反轉(zhuǎn)換為電子信號輸入電子信息接收器,傳輸給與流式細胞儀相連的計算機。無錫細胞分析儀哪家好細胞分析儀通過多重?zé)晒馊旧慕M合,能夠更為精確地指定不同活細胞。
細胞分析儀又叫流式細胞儀,是以流式細胞術(shù)為重要技術(shù),集光學(xué)、電子學(xué)、流體力學(xué)、細胞化學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)以及激光和計算機等多門學(xué)科和技術(shù)于一體的先進科學(xué)技術(shù)設(shè)備。將待測樣品制成單細胞懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后裝入樣品管,由系統(tǒng)產(chǎn)生一定氣體壓力將樣品管送入流動室,細胞懸液從樣品管射出,樣品管周圍由鞘液包圍。鞘液管與樣品管成一定角度使得待測細胞在鞘液的作用下成單行排列,形成細胞柱,通過噴嘴與入射的激光束垂直相交,細胞或顆粒被激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號和非熒光散射信號,Z終通過光學(xué)系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)處理后由計算機輸出。
流式細胞儀的維護保養(yǎng):選擇正確的熒光染料,一般原則是:低表達抗原標記高S/N(信噪比)熒光素,高表達抗原標記低S/N(信噪比)熒光素。當樣品用2種以上熒光染料時,為消除干擾,需要做熒光補償。在應(yīng)用流式細胞儀軟件作熒光補償時,補償只應(yīng)用在同一個激光激發(fā)的不同熒光素之間,應(yīng)避免補償不足和過度補償。溶液使用前,所用溶液都要進行過濾處理,以免出現(xiàn)沉淀物而堵塞噴嘴。流式細胞儀狀態(tài)穩(wěn)定后,要先排除進樣針內(nèi)的氣泡以保證噴嘴暢通,之后再對樣本進行檢測。細胞分析儀可以直接在已接種細胞的架構(gòu)中進行樣本留取和凈化。
流式細胞儀是一類常見的醫(yī)學(xué)檢測儀器,其可以對單一的細胞進行多色的染色,而且還能對細胞表面進行標記,分析液體中的可溶性成分,分析細胞的大小顆粒。流式細胞儀操作簡單,測試的結(jié)果客觀而精確。流式細胞儀可以進行細胞周期分析,DNA倍體分析,定量分析檢測細胞增殖標志物、細胞表面標志、病基因蛋白產(chǎn)物、耐藥蛋白、細胞凋亡等,從而獲得組織形態(tài)學(xué)方法難以得到的信息,可為疾病的臨床診斷、ZL、預(yù)防和預(yù)后提供幫助。DNA非整倍體的出現(xiàn)可能是發(fā)生早期病變的一個重要指標。流式細胞儀可以提供確切的診斷信息。流式細胞儀對淋巴瘤的早期診斷比形態(tài)學(xué)檢查更為敏感、準確。DNA非整倍體的交界瘤應(yīng)按惡性疾病對待,形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為良性的疾病出現(xiàn)非整倍體提示有惡性轉(zhuǎn)變的可能。細胞分析儀是一種快速分析和診斷單個細胞的設(shè)備。南京BioTek酶標儀批發(fā)
細胞分析儀還可以進行大規(guī)模細胞分離、定量分析等。無錫細胞分析儀哪家好
測量區(qū)光路調(diào)節(jié):這是調(diào)試工作的關(guān)鍵,需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90°散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。流式細胞儀中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定,這樣才能通過相對測量獲得的意義。流式細胞儀校準的標準樣品應(yīng)該穩(wěn)定,有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學(xué)標準樣品,雞血紅細胞做為生物學(xué)標準樣品。微球用樹脂材料制作,或標有熒光素,或不標記熒光素。無錫細胞分析儀哪家好