近20年來,隨著流式細(xì)胞儀及其檢測(cè)技術(shù)的日臻完善,人們?cè)絹碓街铝τ跇悠分苽?、?xì)胞標(biāo)記、軟件開發(fā)等方面的工作,以擴(kuò)大流式細(xì)胞儀的應(yīng)用領(lǐng)域和使用效果。流式細(xì)胞儀可以分成三個(gè)基本的結(jié)構(gòu),這三個(gè)基本的結(jié)構(gòu)已經(jīng)形成了完善的系統(tǒng),分別是光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、液流系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀借助了激光的原理,通過單克隆抗體和熒光染料的結(jié)合使用,并且結(jié)合了計(jì)算機(jī)技術(shù),從而可以對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過發(fā)送參數(shù)信號(hào)的方式,確保檢測(cè)效率的提升,而且激發(fā)效率和單色性可以得到保障,在統(tǒng)計(jì)分析的過程中,各類數(shù)據(jù)都非常的精確,在檢測(cè)的過程中靈敏度和特異性都能得到保障。細(xì)胞分析儀可以進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞的分析,支持對(duì)個(gè)體差異的分析。南京外泌體分離分析系統(tǒng)廠商
流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞時(shí),可以從一個(gè)細(xì)胞中同時(shí)獲得多種細(xì)胞信息。由于流式細(xì)胞儀采用的光源不斷改進(jìn)從開始的單一的激光器或紫外光器,至目前發(fā)展為采用2-3個(gè)激光器,或再加一個(gè)紫外光器。有的采用立體空間激光系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)多熒光道分析,Zda程度地減少熒光信號(hào)之間的補(bǔ)償,提高檢測(cè)的靈敏度,所以,利用空間立體激發(fā)的多激光系統(tǒng)可以提高多參數(shù)的分析質(zhì)量。目前的單激光四色分析或雙激光四色分析的流式細(xì)胞儀,488nm激光器激發(fā)出的4種不同熒光光譜之間常有重疊,做4色分析時(shí),難以避免熒光過多重疊而導(dǎo)致的補(bǔ)償困難。利用該系統(tǒng)對(duì)488nm激光產(chǎn)生的3色熒光與635nm激發(fā)而產(chǎn)生的第4種熒光分成兩種信號(hào),能Zda程度地減少補(bǔ)償,使4色熒光達(dá)到Zwan美的效果。杭州細(xì)胞分析儀制造商細(xì)胞分析儀根據(jù)單個(gè)細(xì)胞的特征,如大小、形態(tài)、熒光,實(shí)現(xiàn)快速分析。
細(xì)胞分析儀又叫流式細(xì)胞儀,是以流式細(xì)胞術(shù)為重要技術(shù),集光學(xué)、電子學(xué)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)以及激光和計(jì)算機(jī)等多門學(xué)科和技術(shù)于一體的先進(jìn)科學(xué)技術(shù)設(shè)備。細(xì)胞分析儀主要用作細(xì)胞分析和細(xì)胞分選。細(xì)胞分析原理:將待測(cè)樣品制成單細(xì)胞懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后裝入樣品管,由系統(tǒng)產(chǎn)生一定氣體壓力將樣品管送入流動(dòng)室,細(xì)胞懸液從樣品管射出,樣品管周圍由鞘液包圍。鞘液管與樣品管成一定角度使得待測(cè)細(xì)胞在鞘液的作用下成單行排列,形成細(xì)胞柱,通過噴嘴與入射的激光束垂直相交,細(xì)胞或顆粒被激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號(hào)和非熒光散射信號(hào),Z終通過光學(xué)系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)處理后由計(jì)算機(jī)輸出。
一般來說,在進(jìn)行較大或者脆弱細(xì)胞的分選時(shí),為了得到Z佳結(jié)果,應(yīng)該使用較大的噴嘴和較低的壓力;在分選較小或者非脆弱細(xì)胞時(shí),如果要增加產(chǎn)量,應(yīng)該使用較小的噴嘴和較高的壓力。細(xì)胞分析儀可以對(duì)不同的單細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測(cè),而且在確保細(xì)胞數(shù)量足夠的前提下,可以在短時(shí)間內(nèi)獲取大量的細(xì)胞,可以同時(shí)檢測(cè)數(shù)百萬的細(xì)胞。細(xì)胞分析儀可以對(duì)單個(gè)細(xì)胞的多種特征進(jìn)行分析,對(duì)單個(gè)細(xì)胞的不同的參數(shù)進(jìn)行分析,借助熒光染色的方式對(duì)單細(xì)胞受體的表達(dá)方式和DNA的含量等進(jìn)行分析,實(shí)現(xiàn)了定量分析和定性分析的結(jié)合。細(xì)胞分析儀能夠大幅度提高細(xì)胞分析的效率、精確性和可讀性。
雞血紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)樣品制作過程昭下:取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑:雞血=1:4),經(jīng)PBS清洗3次,再用5~10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細(xì)胞混合,室溫下振蕩醛化24h,Z后經(jīng)PBS再清洗,貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因?yàn)槲唇?jīng)熒光染色,所測(cè)光信號(hào)為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。流式細(xì)胞儀的使用方法:1、打開流式細(xì)胞儀的電源,對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱;2、打開氣體閾,調(diào)節(jié)壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);3、在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);4、利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整流式細(xì)胞儀,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0°和90°散射的熒光強(qiáng)度強(qiáng),并要求變異系數(shù)為?。患?xì)胞分析儀是一種確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確、快速的科研儀器,充分體現(xiàn)了人類探究未知領(lǐng)域的智慧和勇氣。南京外泌體分離分析系統(tǒng)廠商
細(xì)胞分析儀可通過快速識(shí)別和分析細(xì)胞,為新藥研發(fā)和臨床診療提供支持。南京外泌體分離分析系統(tǒng)廠商
運(yùn)用熒光蛋白報(bào)告結(jié)構(gòu)能實(shí)現(xiàn)多種分析,包括基因調(diào)節(jié)、定位以及蛋白質(zhì)相互作用。水果熒光蛋白增加了實(shí)驗(yàn)的廣度和深度,但488nm激光效果欠佳。然而,借助CytoFLEXS流式細(xì)胞儀配備的561nm激光,能夠看到水果染料等您希望看到的一切熒光蛋白。新增的375nm波長(zhǎng)激光,在空間分離光束點(diǎn)中,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)Hoechst、DAPI和亮紫外(BUV)染料的出色激發(fā)。這樣能夠確保無需使用真正的紫外光即可通過上述染料/熒光染料進(jìn)行試驗(yàn),從而避免了相應(yīng)的費(fèi)用,降低研究成本。運(yùn)用Hoechst和DAPI進(jìn)行分析:DNA嵌合染料如Hoechst和DAPI(均可通過近紫外線激發(fā)),均可用于細(xì)胞周期分析。南京外泌體分離分析系統(tǒng)廠商