死細(xì)胞利用PI、7-AAD或EMA進(jìn)行染色,這些染料不能夠?qū)罴?xì)胞進(jìn)行染色。能夠同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志和活性分析為這個(gè)方法的優(yōu)勢(shì)。尤其適用于高度壞死的樣本。Z常用的是7-AAD,由于在488nm激發(fā)下,670nm左右為其Z大發(fā)射光,與FITC或PE進(jìn)行多色標(biāo)記非常適合。但是隨著時(shí)間延長(zhǎng),在固定的細(xì)胞群體,會(huì)重新分配7-AAD,很難區(qū)分死活細(xì)胞。因此,EMA,對(duì)于染色并在固定后12小時(shí)以上分析的標(biāo)本是Z好的選擇。EMA與死細(xì)胞DNA穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合使長(zhǎng)時(shí)間固定后仍能很好地區(qū)分固定前的死活狀態(tài)得以保證。細(xì)胞分析儀根據(jù)核染色體DNA量和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,進(jìn)行快速精確的細(xì)胞測(cè)定。江蘇BioTek酶標(biāo)儀供應(yīng)價(jià)格
流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞時(shí),可以從一個(gè)細(xì)胞中同時(shí)獲得多種細(xì)胞信息。由于流式細(xì)胞儀采用的光源不斷改進(jìn)從開始的單一的激光器或紫外光器,至目前發(fā)展為采用2-3個(gè)激光器,或再加一個(gè)紫外光器。有的采用立體空間激光系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)多熒光道分析,Zda程度地減少熒光信號(hào)之間的補(bǔ)償,提高檢測(cè)的靈敏度,所以,利用空間立體激發(fā)的多激光系統(tǒng)可以提高多參數(shù)的分析質(zhì)量。目前的單激光四色分析或雙激光四色分析的流式細(xì)胞儀,488nm激光器激發(fā)出的4種不同熒光光譜之間常有重疊,做4色分析時(shí),難以避免熒光過多重疊而導(dǎo)致的補(bǔ)償困難。利用該系統(tǒng)對(duì)488nm激光產(chǎn)生的3色熒光與635nm激發(fā)而產(chǎn)生的第4種熒光分成兩種信號(hào),能Zda程度地減少補(bǔ)償,使4色熒光達(dá)到Zwan美的效果。江蘇BioTek酶標(biāo)儀供應(yīng)價(jià)格細(xì)胞分析儀通常能夠?qū)?xì)胞的熒光顯微痕跡、單細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞質(zhì)染色體等進(jìn)行分析。
流式細(xì)胞儀選購(gòu)方法是什么?實(shí)際情況:要考慮清楚,需要分析多少樣品,進(jìn)行怎樣的實(shí)驗(yàn)?預(yù)期的參數(shù)是多少?在未來的實(shí)驗(yàn)中研究需求的數(shù)量和復(fù)雜性是否會(huì)增加?是否有可能升級(jí)到你想要的流式細(xì)胞儀?如果流式細(xì)胞儀不能滿足未來實(shí)驗(yàn)的要求,也許應(yīng)該選擇在ZX實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。費(fèi)用總計(jì):進(jìn)行流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所需要的花費(fèi)并不僅是指花在試劑盒,過濾器,其它耗材上的錢,還有零件的更換,以及安裝這些零件花費(fèi)的時(shí)間。一臺(tái)流式細(xì)胞儀細(xì)心維護(hù),半年也需要400美元,一些傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀更是要花費(fèi)上千。
流式細(xì)胞儀在網(wǎng)織紅細(xì)胞的測(cè)定及臨床應(yīng)用:網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映造血功能的重要指標(biāo),流式細(xì)胞儀通過某些熒光染料與紅細(xì)胞中RNA結(jié)合,定量測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA,得到網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)該病的診斷及ZL監(jiān)測(cè),具有檢測(cè)速度快、靈敏度高胞的百分比。流式細(xì)胞儀方法比目測(cè)法結(jié)果精確度更高。此外,流式細(xì)胞儀還可以測(cè)量出網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度,對(duì)紅細(xì)胞增殖能力的判斷很有意義,為干細(xì)胞移植術(shù)后恢復(fù)的判斷、貧血的ZL監(jiān)測(cè)等提供了依據(jù)。細(xì)胞分析儀主要使用光學(xué)和電學(xué)等技術(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)的生理和形態(tài)特性分析。
流式細(xì)胞儀的液流系統(tǒng):將經(jīng)特異性熒光染料染色的待測(cè)細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,加入流式細(xì)胞儀的樣品管中,在氣體壓力推動(dòng)下進(jìn)入流動(dòng)室,不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出。鞘液管入口方向與待測(cè)樣品流呈一定角度,這樣鞘液就能夠包繞著樣品高速流動(dòng),組成一個(gè)圓形的流束,待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列,依次通過檢測(cè)區(qū)域。這種同軸流動(dòng)的設(shè)計(jì),使得樣品流和鞘液流形成的流束始終保持著一種分層銷流的狀態(tài)。利用樣品流和鞘流的氣壓差的層流原理,使細(xì)胞依次排列成單行,每個(gè)細(xì)胞以均等的時(shí)間依次通過測(cè)量區(qū),被熒光染料染色的細(xì)胞受到強(qiáng)烈的激光照射后發(fā)出熒光,同時(shí)產(chǎn)生散射光。細(xì)胞發(fā)出的熒光信號(hào)和散射光信號(hào)同時(shí)被光電倍增管接收。細(xì)胞分析儀非常適合進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞熒光檢測(cè)、單個(gè)細(xì)胞質(zhì)量控制、單個(gè)細(xì)胞精確鑒定等操作。嘉興Agilent流式細(xì)胞儀
細(xì)胞分析儀可檢測(cè)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)軌跡以及在不同環(huán)境下的反應(yīng)情況,為研究細(xì)胞動(dòng)態(tài)提供數(shù)據(jù)支持。江蘇BioTek酶標(biāo)儀供應(yīng)價(jià)格
流式細(xì)胞儀的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng):流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染料染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè),這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大小;熒光信號(hào)的接收方向與激光束垂直,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。光電倍增管接收的信號(hào)被積分放大反轉(zhuǎn)換為電子信號(hào)輸入電子信息接收器,傳輸給與流式細(xì)胞儀相連的計(jì)算機(jī)。江蘇BioTek酶標(biāo)儀供應(yīng)價(jià)格