1MTris-HCl(,,)組份濃度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分攪拌溶解。3.按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后，室溫保存。注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低。10&timeTEBuffer(,,)組份濃度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L配制方法：1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水，均勻混合。3.將溶液定容至1L后，高溫高壓**。4.室溫保存。MTris-HCl()組份濃度：MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分攪拌溶解。3.用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后，室溫保存。注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低。3M醋酸鈉()組份濃度：3M醋酸鈉配制量：100ml配制方法：1.稱量NaAc·3H2O置于100-200ml燒杯中，加入月40ml的去離子水攪拌溶解2.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.加去離子水將溶液定容至100ml4高溫高壓**后，室溫保存。此外,PBS緩沖液也可能會對皮膚產(chǎn)生一定的刺激性,長期使用可能會導(dǎo)致皮膚老化和干燥。海南有酚紅緩沖液哪家好

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽性和陰性背景的標本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優(yōu)包被條件需進行試驗選擇）4度過夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標記的抗原或二抗用酶標稀釋液進行稀釋（倍比稀釋4個梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時帶上陽性、陰性通過試驗確定**佳P/N的包被搭配E的試驗2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進行，ELISA反應(yīng)試劑多，其工作濃度不同對結(jié)果影響較大，因此必須對包被抗原(抗體)和酶標抗體(抗原)進行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達到**佳的測定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。緩沖液技術(shù)指導(dǎo)PBS緩沖液是一種常用的生物學緩沖液。

生化實驗中加入緩沖液的目的和作用生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液，多種細胞只能在很小的PH范圍內(nèi)活動，需要有緩沖體系來維持整個過程不受干擾。尤其是在生化實驗中，生物緩沖液極其受重視，因為實驗中的各類物質(zhì)非常容易使PH發(fā)生變化，而這就直接影響到整體工作進程。例如在酶活性實驗中，有時因為PH的變化大，會使酶活性下降甚至失活，導(dǎo)致實驗無法進行下去，所以在生化實驗中加入緩沖液的主要目的就是維持PH的穩(wěn)定。

在前面提到，將等式同時取對數(shù)，并簡化就可以得到： 或者這就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共軛堿的濃度都是平衡時的濃度，除了酸性過于強的情況下，由于同離子效應(yīng)的存在，一般都可用此式計算，根據(jù)此式可得出下列幾點結(jié)論：1 緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時，就會得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時，溶液的pH值與PKa值相同。2 酸和鹽濃度等比例增減時，溶液的pH值不變。3 酸和鹽濃度相等時，緩沖液的緩沖效率為比較高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]由弱酸及其鹽組合一起使具有緩沖作用。

PBS緩沖液的性質(zhì)和優(yōu)點4.無毒性：PBS緩沖液是一種非常安全的緩沖液，對生物樣品和細胞沒有毒性。5.維持穩(wěn)定性：PBS緩沖液能夠維持生物樣品的穩(wěn)定性，防止樣品的變性和降解。6.pH穩(wěn)定：PBS緩沖液的pH值一般在7.2-7.4之間，非常適合細胞和生物樣品的生長和保存。7.離子平衡：PBS緩沖液中的適當離子濃度可以提供細胞所需的離子環(huán)境，維持細胞的正常生理功能。8.易于制備：PBS緩沖液的制備非常簡單，只需要將磷酸鹽和鹽溶解在適量的水中即可。Pbs緩沖也是磷酸鹽緩沖生理鹽水，屬于等張液對于細胞并無毒性作用。四川DPBS緩沖液答疑解惑

緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時抵抗pH改變的溶液。海南有酚紅緩沖液哪家好

為什么緩沖溶液的ph值在4.75~7.25之間？

緩沖溶液的緩沖范圍在PKa±16531=4.75±1之間。水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共扼堿的濃度比。當加入少量強堿時，酸被中和，導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積。從而C（A一）的濃度增加，C（HA）的濃度減少?？梢钥吹剑m然加入了強堿，但是溶液里的氫氧根離子變化很少，同時，濃度較大，相對的變化小，兩者比值幾乎無變化，因此根據(jù)公式，水合氫離子的濃度變化很小。所以緩沖溶液的ph值在4.75~7.25 海南有酚紅緩沖液哪家好