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收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶編輯鎖定本詞條由“科普**”百科科學(xué)詞條編寫與應(yīng)用工作項(xiàng)目審核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,EC,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性**強(qiáng)的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中,它成為不可缺少的工具。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin別稱胰酶化學(xué)式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登錄號(hào)9002-07-7EINECS登錄號(hào)232-650-8[1]熔點(diǎn)115℃[1]水溶性易溶外觀白色或類白色目錄1生物制品簡介?物化性質(zhì)2*典標(biāo)準(zhǔn)?來源含量?制法要求?性狀?鑒別?檢查?效價(jià)測定?制劑3胰蛋白酶的醫(yī)學(xué)檢查?檢查名稱?分類?胰蛋白酶的測定原理?試劑?操作方法?正常值?化驗(yàn)結(jié)果臨床意義?附注?相關(guān)疾病4生物*品說明?*理作用?適應(yīng)證?禁忌證?用法用量?注意事項(xiàng)?不良反應(yīng):?**點(diǎn)評(píng)5其他。消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。江蘇進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式
只斷裂賴氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***過程的羧基參胰蛋白酶降解物分析與形成的肽鍵。白色或米黃色結(jié)晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000,pI,**適pH值~。pH>。Ca2+對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用;重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈**。臨床用于抗消腫,工業(yè)上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。胰蛋白酶*典標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶來源含量本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品計(jì)算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。胰蛋白酶制法要求本品應(yīng)從檢*合格的牛、羊或豬胰中提取,生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《*品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。胰蛋白酶性狀本品為白色或類白色結(jié)晶性粉末。胰蛋白酶鑒別取本品約2mg,置白色點(diǎn)滴板上,加對(duì)甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液,即顯紫色。胰蛋白酶檢查酸度取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液,依法測定(2010年版*典二部附錄ⅥH),pH值應(yīng)為~。溶液的澄清度取本品,加,依法檢查(2010年版*典二部附錄ⅨB),溶液應(yīng)澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制備取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取,混合,pH值為)50ml,溫?zé)崾谷芙猓鋮s后再稀釋至刻度,搖勻。廣東胰酶一般多少錢淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為 37°℃。Trypsin solution(2.5%)由 2.5%胰酶組成,不含 EDTA,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。該溶液濃度較高,可以稀釋到相應(yīng)濃度后使用。
(不含EDTA含酚紅)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無定形粉末。系從各種動(dòng)物胰臟制取的混合物,主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性,遇酸、堿及熱即喪失活力,水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時(shí)產(chǎn)生沉淀。為助消化藥,用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業(yè)和紡織印染,主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基,1.不含EDTA含酚紅:含酚紅,(1:250)溶于HBSS溶液,不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含,不含EDTA和酚紅,溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化,通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化:a)吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細(xì)胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時(shí)間。c)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 胰酶細(xì)胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。
0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。
胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。
胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時(shí)間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時(shí)候要注意什么?(1)在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。(2)胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差。 胰酶的使用濃度是多少?江蘇進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式
胰酶顏色的變化是由PH值的變化引起,歸因于使用干冰運(yùn)輸。江蘇進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式
胰酶的作用原理是什么呢?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上和培養(yǎng)皿結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時(shí)細(xì)胞在自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力的作用下成為球形。使用胰酶時(shí)需注意哪些細(xì)節(jié)問題?在使用胰酶(Trypsins)細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差,做流式時(shí)的CDMarker也可能會(huì)下降。胰酶進(jìn)行分裝時(shí)盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰4鏁r(shí)液體體積會(huì)膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并可能造成污染。胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對(duì)于纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。江蘇進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式