所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說(shuō)明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。每種緩沖體系所占的分量在各類(lèi)細(xì)胞中是不同的.福建有酚紅緩沖液價(jià)格查詢
pH標(biāo)準(zhǔn)液如何正確使用及其主要作用
pH標(biāo)準(zhǔn)液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿,或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿,以及將溶液適當(dāng)稀釋?zhuān)@個(gè)溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變,這種能對(duì)抗少量酸堿或大或稀釋?zhuān)筽H值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。 pH標(biāo)準(zhǔn)液的如何正確使用: 1、復(fù)合電極不用時(shí),可充分浸泡溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑1/4浸洗。 2、使用前,檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下,電極應(yīng)該透明而無(wú)裂紋;球PH計(jì)標(biāo)準(zhǔn)液配制泡內(nèi)要充滿溶液,不能有氣泡存在。 3、測(cè)量濃度較大的溶液時(shí),盡量縮短測(cè)量時(shí)間,用后仔細(xì)清洗,防止被測(cè)液粘附在電極上而污染電極。 4、清洗電極后,不要用濾紙擦拭玻璃膜,而應(yīng)用濾紙吸干,避免損壞玻璃薄膜、防止交叉污染,影響測(cè)量精度。 5.測(cè)量中注意電極的銀一氯化銀內(nèi)參比電極應(yīng)浸入到球泡內(nèi)氯化物緩沖溶液中,避免電計(jì)顯示部分出現(xiàn)數(shù)字亂跳現(xiàn)象。使用時(shí),注意將電極輕輕甩幾下。 福建有酚紅緩沖液價(jià)格查詢此外,PBS緩沖液也可能會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生一定的刺激性,長(zhǎng)期使用可能會(huì)導(dǎo)致皮膚老化和干燥。
該酶標(biāo)IsC的工作濃度應(yīng)為1/1?600。?????棋盤(pán)滴定法選擇包被抗原工作濃度:①用包被液將抗原由1:50開(kāi)始作比倍稀釋后進(jìn)行包被,洗滌。②將強(qiáng)陽(yáng)性參考血清、弱陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋?zhuān)訕?,保溫、洗滌。③加按工作濃度稀釋的酶?biāo)IsC抗體,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后讀取A值。⑤選擇強(qiáng)陽(yáng)性參考血清的A值為0.8左右、陰性參考血清的A值小于0.1的包被抗的稀釋度作為工作濃度,從中選取**適工作濃度。?1.2夾心法測(cè)抗原?????在夾心ELISA法中,可用棋盤(pán)滴定法同時(shí)選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度。①抗體免*球蛋白用包被緩沖液稀釋至蛋白濃度為10.0、1.0和0.1微克/毫升,分別在ELISA板上進(jìn)行包被,每一濃度包括3個(gè)縱行,洗滌。②在1個(gè)橫行各包被孔中加入強(qiáng)陽(yáng)性抗原液,另1橫行加入弱陽(yáng)性抗原液,第3橫行加入陰性對(duì)照液,保溫、洗滌。③將酶標(biāo)抗體用稀釋液稀釋成3個(gè)濃度,例如1:1?000、1:5?000和1:25000。分別加入每個(gè)包被濃度的1個(gè)縱行中,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后,讀取A值。⑤以強(qiáng)陽(yáng)性抗原的A值在0.8左右、陰性參考的A值小于0.1的條件作**適條件,據(jù)此選擇包被抗體和酶抗體的工作濃度。
法蘭10沿圓周方向排列開(kāi)設(shè)有固定孔18,固定孔18位于密封墊圈二19的外側(cè),通過(guò)密封墊圈二19起到密封的作用;頂蓋9:頂蓋9置于法蘭10的上表面,頂蓋9上表面邊沿的通孔內(nèi)沿圓周方向排列設(shè)有固定螺栓6,固定螺栓6的底端穿過(guò)固定孔18延伸至法蘭10的下表面,固定螺栓6的底端設(shè)有螺母5,頂蓋9上表面的一側(cè)設(shè)有進(jìn)液管7,進(jìn)液管7的底端與筒體3的內(nèi)腔連通,進(jìn)液管7的頂端設(shè)有密封蓋8,通過(guò)密封蓋8對(duì)進(jìn)液管7進(jìn)行密封,頂蓋9下表面的中部設(shè)有攪拌單元17,攪拌單元17包括伺服電機(jī)171、攪拌軸172和葉片173,攪拌軸172通過(guò)軸承轉(zhuǎn)動(dòng)連接在頂蓋9下表面的中部,葉片173陣列設(shè)在攪拌軸172的圓周面,伺服電機(jī)171固定在頂蓋9的上表面,伺服電機(jī)171的輸出軸與攪拌軸172的頂端固定連接,伺服電機(jī)171的輸入端與plc控制器2的輸出端電連接,通過(guò)伺服電機(jī)171的轉(zhuǎn)動(dòng),帶動(dòng)攪拌軸172和葉片173的轉(zhuǎn)動(dòng),可以對(duì)筒體內(nèi)的液體進(jìn)行攪拌;出液斗11:出液斗11設(shè)在固定座1的底部,出液斗11的頂端與筒體3的內(nèi)腔連通,出液斗11的底端設(shè)有出液管13,出液管13上對(duì)應(yīng)設(shè)有電磁閥12,通過(guò)出液斗11和出液管13將液體排出,通過(guò)電磁閥12控制出液管13的開(kāi)閉;其中:還包括plc控制器2,plc控制器2設(shè)在固定座1的上表面。緩沖體系來(lái)抵抗在代謝過(guò)程中出現(xiàn)的pH變化.
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(應(yīng)選擇與供試液pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液),目前標(biāo)準(zhǔn)溶液有7種,在我國(guó)一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時(shí))。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置方法:1.pH4,鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml。2.pH7,磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的無(wú)水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml。3.pH9,硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風(fēng)化),加水使溶解并稀釋至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸。 緩沖液能夠提供酶所需的適pH值,這對(duì)于酶的活性至關(guān)重要。上海PBS緩沖液代理商
酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。福建有酚紅緩沖液價(jià)格查詢
緩沖溶液的pH通常由酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度以及所在的環(huán)境、溫度等因素來(lái)決定;4.75~7.25屬于正常ph范圍內(nèi)。緩沖溶液是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對(duì)溶液酸堿度的影響,從而保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定。緩沖溶液的pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對(duì)及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。1、酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。2、酸和鹽濃度相等時(shí),緩沖液的緩沖效率為比較高,比例相差越大,緩沖效率越低。福建有酚紅緩沖液價(jià)格查詢