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PBS緩沖液是實(shí)驗(yàn)室中常用的緩沖液之一,不管是免疫組化實(shí)驗(yàn)還是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),都經(jīng)常會(huì)用到PBS緩沖液。以下是我整理的一些PBS緩沖液的配置方法。PBS緩沖液的配制:方法一:含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:1.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20,加水;2.PBS:PhosphateBufferedSaline;3.PBS1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g;4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;5.氯化鈉(NaCl):8g;6.氯化鉀(KCl)0.2g;7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,***定容到1L;由于 HBSS 反應(yīng)性低,常用于大氣條件下。上海無酚紅平衡鹽溶液常用知識
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(簡稱pH7.2PBS)。1.PBS貯存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml雙蒸水中。2.PBS應(yīng)用液配法取貯存液50ml加雙蒸水450m1即成,經(jīng)103kPa(121.3℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆?。除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等??捎糜谂渲葡汉拖礈旒?xì)胞(可防止抑制酶活性和致細(xì)胞凝聚等)。其成分見表1-5,配制方法可參照上述幾種平衡鹽溶液的方法進(jìn)行。
平衡鹽溶液是溶液中電解質(zhì)含量與血漿內(nèi)含量相仿的鹽溶液稱為平衡鹽溶液。等滲鹽水含Na+和Cl-為154mmol/L,而血液內(nèi)Na+和Cl-含量分別為142mmol/L和103mmol/L,兩者相比,等滲鹽水的Cl-含量比血液的Cl-含量高50mmol/L,在重度缺水或休克狀態(tài)下,腎臟血液減少,會(huì)影響正常的排氯功能,從靜脈內(nèi)輸給大量等滲鹽水,有導(dǎo)致血Cl-過高,引起高氯性酸中毒的危險(xiǎn)。因此,用等滲鹽水***缺水有不足之處,而使用平衡鹽溶液可避免輸入過多的Cl-,***缺水更符合生理,且能有助于糾正酸中毒。常用的平衡鹽溶液有乳酸鈉和復(fù)方氯化鈉溶液(1/6M乳酸鈉溶液1/3加復(fù)方氯化鈉溶液2/3);與碳酸氫鈉和等滲鹽水溶液(1.25%碳酸氫鈉溶液1/3和等滲鹽水2/3)兩種。磷酸緩沖液,它的緩沖能力怎么理解?
目前**常用的BSS是Hanks液、Earle液和PBS等。(一)BSS的配制要求1.要防止鈣的沉淀BSS配制時(shí)應(yīng)將其中的CaCl2單獨(dú)配制,并將平衡鹽溶液配成濃縮液,使其在稀釋前不讓Ca2+與P042-和C032-接觸,以免產(chǎn)生不溶解的CaP04和CaCO3。避開產(chǎn)生CaC03的辦法是將NaHC03單獨(dú)配制,用法時(shí)現(xiàn)加。2.要有良好的緩沖作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。因此應(yīng)將瓶蓋(橡皮塞)蓋緊,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。pH調(diào)整液單獨(dú)滅菌時(shí),亦應(yīng)將瓶蓋塞緊,臨時(shí)不用的可凍存,否則NaHC03受熱分解為NaOH和C02,失去其調(diào)整pH之功能。(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和削減有關(guān)成分的化學(xué)反應(yīng),此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲(chǔ)存液(母液)?,F(xiàn)以l0×為例,將其配制辦法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·7H202gCaCl2(含2H20者)待徹低溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑Na2HP04(含12H2O者)KH2P04l0g50ml待徹低溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500ml。、等量用三蒸水稀釋10倍,即成用法液。用前高壓滅菌。例如配制1000m1Hanks用法液。 平衡鹽溶液HBSS 由微生物學(xué)家 John Hanks 在1940年配制,富含碳酸氫根離子。內(nèi)蒙古HBSS平衡鹽溶液答疑解惑
平衡鹽溶液適用于各種細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。上海無酚紅平衡鹽溶液常用知識
平衡鹽又稱為平衡鹽溶液或平衡液。?12平衡鹽是一種特殊的溶液,主要用于調(diào)節(jié)體液電解質(zhì)和酸堿平衡,特別是在醫(yī)療領(lǐng)域中,它被***用于補(bǔ)充血容量、防止低血容量休克以及防止彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)等擴(kuò)容***。這種溶液之所以被稱為平衡鹽,是因?yàn)樗碾娊赓|(zhì)成分,如氯離子、鈉離子、鉀離子等,與血漿非常接近,這使得它在***各種缺水時(shí)更符合人體生理。與輸注生理鹽水相比,使用平衡鹽溶液可以避免輸入過多的氯離子,從而減少對人體的不良影響。此外,平衡鹽還可以指健康平衡鹽,這是一種將碘、鉀、鎂、硒、鋅等人體必需的微量元素調(diào)和在一起的食鹽,綜合了加碘鹽、低鈉鹽、加鋅鹽、加硒鹽等特性,旨在提供一種更健康的食鹽選擇。綜上所述,平衡鹽不僅在醫(yī)療領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用,而且在日常生活中,作為一種健康的食鹽選擇,也受到了廣泛的關(guān)注和使用。 上海無酚紅平衡鹽溶液常用知識