只要知道緩沖對(duì)的PH值,和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度),就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算,較麻煩,前人為減少后人的計(jì)算麻煩,已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH,經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制100nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。計(jì)算好后,按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分,放于燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,就能得到所需的緩沖液。各種緩沖溶液的配制,均按表格按比例混合,某些試劑,必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行,如醋酸、氫氧化鈉等。另外,所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 [2]緩沖液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液。福建HBSS緩沖液哪家便宜
ph值測(cè)定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液有哪幾種
ph值測(cè)定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時(shí),酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時(shí),緩沖容量比較大。 湖北HBSS緩沖液大概價(jià)格多少一種溶液是否是緩沖溶液,可以通過(guò)在溶液中加入少量的酸或堿,觀察pH值的變化來(lái)判斷。
磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常***,可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液,配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范圍在1-5;堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范圍在9-12;中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,pH在。通常所說(shuō)的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度,而不是鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度。正是因?yàn)槿绱?,在配制中性緩沖液時(shí),用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,并不影響磷酸根離子的濃度,所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來(lái)的濃度,但是緩沖液中的鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。
3.高溫高壓**后,4℃保存。SolutionI(質(zhì)粒提取用)組份濃度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。2.高溫高壓**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml燒杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混勻3.室溫保存,此溶液保存時(shí)間比較好不要超過(guò)一個(gè)月注意:SDS易產(chǎn)生氣泡,不要?jiǎng)×覕嚢鑃olutionIII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.稱量下列試劑,置于500ml燒杯中。2.加入300ml去離子水后攪拌溶解。3.加去離子水將溶液定容至500ml。4.高溫高壓**后,4℃保存。MEDTA()組份濃度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.稱取gNa2EDTA·2H2O,置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢琛?.用NaOH調(diào)節(jié)pH值至(約20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去離子水將溶液定容至1L。5.適量分成小份后,高溫高壓**。6.室溫保存。1MDTT組份濃度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.稱取gDTT,加入到50ml塑料離心管內(nèi)。2.加20ml的MNaOAc()。在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說(shuō)明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。緩沖液使用中的注意事項(xiàng)。北京緩沖液技術(shù)指導(dǎo)
在生物化學(xué)研究中,為什么要使用緩沖液?在使用緩沖液時(shí)應(yīng)注意那些問(wèn)題?福建HBSS緩沖液哪家便宜
酶活性實(shí)驗(yàn)中緩沖液的作用在?酶活性實(shí)驗(yàn)中,?緩沖液的主要作用是?維持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的pH穩(wěn)定?,為酶提供一個(gè)**適的pH環(huán)境,從而確保酶的活性得到**佳發(fā)揮。緩沖液通過(guò)其抗酸抗堿能力,對(duì)抗溶液中H+濃度的變化,從而對(duì)溶液的酸度起到調(diào)節(jié)和控制的作用緩沖液的選擇與作用?提供**適pH值?:緩沖液能夠提供酶所需的**適pH值,這對(duì)于酶的活性至關(guān)重要。不同的酶有不同的**適pH值,通過(guò)選擇合適的緩沖液可以確保酶在**佳條件下進(jìn)行催化反應(yīng)。?3?維持pH穩(wěn)定?:緩沖液能夠抵抗外來(lái)的酸或堿的影響,保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定,從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。這對(duì)于酶活性實(shí)驗(yàn)尤為重要,因?yàn)槊傅幕钚詫?duì)pH變化非常敏感。?4?提供金屬離子?:在某些情況下,緩沖液還能提供酶所需的金屬離子或其他必要的離子,進(jìn)一步優(yōu)化酶的反應(yīng)條件。 福建HBSS緩沖液哪家便宜