冰凍保存，但不得反復(fù)凍融。供試品溶液的制備取本品適量，精密稱定，加。測定法取底物溶液、（pH）1ml，混勻，作為空白。取供試品溶液（預(yù)熱至25℃±℃），立即計(jì)時(shí)并搖勻，使比色池內(nèi)的溫度保持在25℃±℃，照紫外－可見分光光度法（2010年版*典二部附錄ⅣA），在237nm的波長處，每隔30秒讀取吸光度，共5分鐘，每30秒鐘吸光度的變化率應(yīng)恒定，且恒定時(shí)間不得少于3分鐘。以吸光度為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，作圖，取在3分鐘內(nèi)成直線部分的吸光度，按下式計(jì)算。式中P為每2500胰蛋白酶單位中含糜蛋白酶的量，單位；A2為直線上開始的吸光度；A1為直線上終止的吸光度；T為A2至A1讀數(shù)的時(shí)間，分；W為測定液中含供試品的量，mg;，吸光度每分鐘改變，即相當(dāng)于1個(gè)糜蛋白酶單位。每2500單位胰蛋白酶中不得多于50單位的糜蛋白酶。干燥失重取本品適量，以五氧化二磷為干燥劑，在60℃減壓干燥4小時(shí)，減失重量不得過（2010年版*典二部附錄ⅧL）。胰蛋白酶效價(jià)測定底物溶液的制備取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽，加水溶解使成100ml，作為底物原液；取10ml，用磷酸鹽緩沖液（取，pH值為）稀釋成100ml，照紫外－可見分光光度法（2010年版*典二部附錄ⅣA），恒溫于℃±℃，以水作空白。淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎？遼寧胰酶代理商

淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎？能，對于胰酶呈黃色的問題，不同品牌也都對此現(xiàn)象進(jìn)行了測試實(shí)驗(yàn)。變色的胰酶同樣能很好的用于細(xì)胞的解離，請放心使用。細(xì)胞消化時(shí)，胰酶不去除對細(xì)胞的影響？細(xì)胞消化時(shí)，如果消化液中只有胰酶，不含EDTA，不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA，比較好去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細(xì)胞分離。但EDTA不能被血清中和，消化后要徹底清洗去除，否則細(xì)胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率，所以常二者合用。胰酶的保存中國澳門胰酶常見問題胰蛋白酶消化液都由已經(jīng)過豬細(xì)小病毒檢測和支原體檢測的原料制備。

胰酶和雙抗怎么保存？

胰酶和雙抗怎么保存？

胰酶和雙抗怎么保存？

雙抗的保存:雙抗通常情況下在-20°C保存一年。由于該試劑在4°C下長期存放是不穩(wěn)定的，分裝后在-20°C下避光保存。青霉素在2-8°C存放時(shí)間不應(yīng)超過4天，鏈霉素相對穩(wěn)定一點(diǎn)，在2-8°C可以存放30天左右。雙抗從凍融后基本成分已開始降解。胰酶的保存：胰酶可在-20°C下保存一年。隨著時(shí)間延長，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20°C冰箱取出。盡量避免在4C長期保存。

    (含)英文名:(含)儲存條件:-20℃產(chǎn)品簡介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用說明(*供參考):1.貼壁細(xì)胞的消化①吸除培養(yǎng)液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,去除殘余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置。(不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同)③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化。⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落。 胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會極少部分的氣體交換。

常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)干細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的干細(xì)胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于干細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-20度。膠原酶：膠原酶是比較少用的，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下干細(xì)胞。這種方法作用溫和，對干細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。胰酶的質(zhì)量是影響干細(xì)胞的消化的關(guān)鍵因素之一，如果配的比較標(biāo)準(zhǔn)，消化的時(shí)候就容易消化，反之就不易消化。還要在你看到消化過頭的情況下，如果干細(xì)胞下來的比較多了，這時(shí)可以連同cmf或pbs加上營養(yǎng)液一起傳。營養(yǎng)液中有血清，胰酶遇到血清就會自動終止消化，但這樣操作對干細(xì)胞是有一定的影響的。對于容易消化的干細(xì)胞，加入pbs緩沖液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），棄之，再加入適量胰酶作用10s-40s（根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度），棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將干細(xì)胞消化單細(xì)胞。胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。中國臺灣國產(chǎn)胰酶供應(yīng)商

胰酶在PH值7.2-8.0的時(shí)候，溶液呈淡紅色。遼寧胰酶代理商

乙二胺四乙酸：（EDTA）是一種有機(jī)化合物，常溫常壓下為白色粉末。它是一種能與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二價(jià)金屬離子結(jié)合的螯合劑。動物細(xì)胞在粘附的時(shí)候，需要有Ca或Mg離子的參與，EDTA與他們結(jié)合后，導(dǎo)致動物細(xì)胞粘附能力降低，再加上胰蛋白酶的消化作用，使得細(xì)胞與瓶壁快速脫離。兩者起到了協(xié)同消化的作用。難消化的細(xì)胞，胰酶中可填加EDTA。EDTA對細(xì)胞貼壁性有影響，因此使用時(shí)要甚重。如果影響貼壁，但消化時(shí)必須要用，那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，可去除EDTA。如果對貼壁沒影響，那么可不離心。遼寧胰酶代理商