為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。?為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般**常用的是PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時間放置。?血清是否需要做滅活處理?這取決于您的應(yīng)用。滅活過程中,會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。**常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程。胎牛血清(FBS)是從剖腹產(chǎn)的胎牛中提取的。吉林新生牛血清代理商
如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用於貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細(xì)胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝***中起重要作用,如SeO3,硒等常見問題保存血清比較好的方法?血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而,若存放於4C時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出後,先置於2-8C冰箱使之溶解,然後在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如何避免沉澱物的產(chǎn)生?1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉澱物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發(fā)生3、請勿將血清置於37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害。黑龍江國產(chǎn)血清血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點:(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物***增多,而且還會影響血清的質(zhì)量,補體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。(4)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。。
元素百科為您介紹胎牛血清有什么用以及胎牛血清怎么生產(chǎn)的。胎牛血清對于實驗室人員來說應(yīng)該再熟悉不過了,胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清有什么用牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞**生長的***,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他***等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與**金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到***作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。胎牛血清怎么生產(chǎn)的國產(chǎn)的胎牛血清,國內(nèi)沒有嚴(yán)格意義的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而國內(nèi)都是剖腹產(chǎn)出胎牛,8小時左右取血,然后,進行過濾分裝。所以,國產(chǎn)的胎牛血清不是嚴(yán)格意義的胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胎牛血清編輯鎖定胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)**高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分**少。中文名胎牛血清外文名fetalbovineserum,FBS文件《中華******典》性狀淺黃色澄清、無溶血無菌檢驗陰性目錄1簡介2血清的主要成分3功能4儲存5運輸胎牛血清簡介編輯一、胎牛血清各項質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華******典》第三部附錄的要求。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量~(w/v)3、血紅蛋白含量≤(w/v)4、無菌檢驗陰性5、支原體檢驗陰性6、**內(nèi)***≤5(EU/ml)7、牛腹瀉**陰性8、大腸桿菌噬菌體陰性9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)**大增殖濃度≥×106個/ml細(xì)胞倍增時間≤15h克隆率≥85%胎牛血清血清的主要成分編輯血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清如何進行血清滅活處理?寧夏血清供應(yīng)商
胎牛血清是從未出生的胎牛臍靜脈血中采集的血漿。吉林新生牛血清代理商
胎牛血清是實驗室里細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,因為胎牛從未接觸過外界,而使得其血清中所含的抗體和補體幾乎沒有對細(xì)胞有害的成分。并且高質(zhì)量的胎牛血清含有的豐富營養(yǎng)成分可以滿足細(xì)胞生長需求,在應(yīng)用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)中發(fā)揮出重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區(qū)別不妨看看以下小編歸納的幾點內(nèi)容:胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們在未發(fā)育完全的胎牛的心臟進行穿刺取血,完成**的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集自已經(jīng)出生一段時間的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加完全。2、組份與比例不同雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細(xì)胞生長因子和促貼附因子等組份并不相同,而且兩者之間的***還有其他活性物質(zhì)的比例也不同。另外,胎牛血清的免*球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對來說比較純,所以培養(yǎng)細(xì)胞的效果會更佳。3、用途與用法不同由于胎牛血清與新生牛血清存在細(xì)微差異。吉林新生牛血清代理商