該酶標(biāo)IsC的工作濃度應(yīng)為1／1?600。?????棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度：①用包被液將抗原由1：50開始作比倍稀釋后進(jìn)行包被，洗滌。②將強(qiáng)陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1：100稀釋，加樣，保溫、洗滌。③加按工作濃度稀釋的酶標(biāo)IsC抗體，保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后讀取A值。⑤選擇強(qiáng)陽性參考血清的A值為0．8左右、陰性參考血清的A值小于0．1的包被抗的稀釋度作為工作濃度，從中選取**適工作濃度。?1．2夾心法測抗原?????在夾心ELISA法中，可用棋盤滴定法同時(shí)選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度。①抗體免*球蛋白用包被緩沖液稀釋至蛋白濃度為10．0、1．0和0．1微克／毫升，分別在ELISA板上進(jìn)行包被，每一濃度包括3個(gè)縱行，洗滌。②在1個(gè)橫行各包被孔中加入強(qiáng)陽性抗原液，另1橫行加入弱陽性抗原液，第3橫行加入陰性對照液，保溫、洗滌。③將酶標(biāo)抗體用稀釋液稀釋成3個(gè)濃度，例如1：1?000、1：5?000和1：25000。分別加入每個(gè)包被濃度的1個(gè)縱行中，保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后，讀取A值。⑤以強(qiáng)陽性抗原的A值在0．8左右、陰性參考的A值小于0．1的條件作**適條件，據(jù)此選擇包被抗體和酶抗體的工作濃度。什么是緩沖溶液?請簡述其在生物體中的作用。重慶HBSS緩沖液是什么

    1:50～l:800)后，按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對照)，保溫，洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體，洗滌，加底物顯色，加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽性參考血清A值；為0．8左右，陰性參考血清A值<0．1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg／L、lmg／L、／L三個(gè)濃度按行包被，每一個(gè)濃度包被三行(每行3孔)，分別在每個(gè)濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽性抗原，弱陽性抗原和陰性對照，將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個(gè)濃度，分別加入每個(gè)濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色，加酸終止反應(yīng)，分別讀取A值。以強(qiáng)陽性抗原液A值在，陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1．1間接法測抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇：①用IgG進(jìn)行包被，洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后，讀取吸光度(A)。讀取A值在1．0時(shí)的酶標(biāo)抗體稀釋度，作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。四川有酚紅緩沖液牌子每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞中是不同的.

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽性和陰性背景的標(biāo)本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個(gè)條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗(yàn)選擇）4度過夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋（倍比稀釋4個(gè)梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時(shí)帶上陽性、陰性通過試驗(yàn)確定**佳P/N的包被搭配E的試驗(yàn)2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行，ELISA反應(yīng)試劑多，其工作濃度不同對結(jié)果影響較大，因此必須對包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達(dá)到**佳的測定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。

pH標(biāo)準(zhǔn)液如何正確使用及其主要作用

pH標(biāo)準(zhǔn)液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿，以及將溶液適當(dāng)稀釋，這個(gè)溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變，這種能對抗少量酸堿或大或稀釋，而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。   pH標(biāo)準(zhǔn)液的如何正確使用：  1、復(fù)合電極不用時(shí)，可充分浸泡溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑1/4浸洗。   2、使用前，檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下，電極應(yīng)該透明而無裂紋；球PH計(jì)標(biāo)準(zhǔn)液配制泡內(nèi)要充滿溶液，不能有氣泡存在。   3、測量濃度較大的溶液時(shí)，盡量縮短測量時(shí)間，用后仔細(xì)清洗，防止被測液粘附在電極上而污染電極。   4、清洗電極后，不要用濾紙擦拭玻璃膜，而應(yīng)用濾紙吸干，避免損壞玻璃薄膜、防止交叉污染，影響測量精度。   5.測量中注意電極的銀一氯化銀內(nèi)參比電極應(yīng)浸入到球泡內(nèi)氯化物緩沖溶液中，避免電計(jì)顯示部分出現(xiàn)數(shù)字亂跳現(xiàn)象。使用時(shí)，注意將電極輕輕甩幾下。 為了避免PBS緩沖液對人體的負(fù)面影響,建議使用時(shí)遵循正確的使用方法和容器規(guī)格,避免長時(shí)間或過量使用。

    酶活性實(shí)驗(yàn)中緩沖液的作用在?酶活性實(shí)驗(yàn)中，?緩沖液的主要作用是?維持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的pH穩(wěn)定?，為酶提供一個(gè)**適的pH環(huán)境，從而確保酶的活性得到**佳發(fā)揮。緩沖液通過其抗酸抗堿能力，對抗溶液中H+濃度的變化，從而對溶液的酸度起到調(diào)節(jié)和控制的作用緩沖液的選擇與作用?提供**適pH值?：緩沖液能夠提供酶所需的**適pH值，這對于酶的活性至關(guān)重要。不同的酶有不同的**適pH值，通過選擇合適的緩沖液可以確保酶在**佳條件下進(jìn)行催化反應(yīng)。?3?維持pH穩(wěn)定?：緩沖液能夠抵抗外來的酸或堿的影響，保持溶液的pH值相對穩(wěn)定，從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。這對于酶活性實(shí)驗(yàn)尤為重要，因?yàn)槊傅幕钚詫H變化非常敏感。?4?提供金屬離子?：在某些情況下，緩沖液還能提供酶所需的金屬離子或其他必要的離子，進(jìn)一步優(yōu)化酶的反應(yīng)條件。 多種細(xì)胞只能在很小的PH范圍內(nèi)活動，需要有緩沖體系來維持整個(gè)過程不受干擾。浙江無酚紅緩沖液哪家便宜

此外,PBS緩沖液也可能會對皮膚產(chǎn)生一定的刺激性,長期使用可能會導(dǎo)致皮膚老化和干燥。重慶HBSS緩沖液是什么

    如何計(jì)算緩沖溶液的有效PH范圍電離平衡常數(shù)的負(fù)對數(shù)加減1之間。即pK±1之間。例如以醋酸/醋酸鹽為共軛酸堿對的緩沖溶液的有效緩沖范圍是：PKa±1=±1之間。即。緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化，緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。擴(kuò)展資料：緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時(shí)，就會得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時(shí)，溶液的pH值與PKa值相同。酸和鹽濃度等比例增減時(shí)，溶液的pH值不變。酸和鹽濃度相等時(shí)，緩沖液的緩沖效率為比較高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的，所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。采用電位滴定法測定外加酸或堿對不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線。 重慶HBSS緩沖液是什么