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N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說(shuō)明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。內(nèi)分泌腺衍生的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF),也稱為(PK1),是分泌蛋白的原蛋白蛋白家族的成員。Mas7
RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.Recombinant Human CD4/LEU3 (His-Avi Tag)RANTES是CC趨化因子,可以通過(guò)CCR1,CCR3,CCR5和US28(巨細(xì)胞病毒受體)受體發(fā)出信號(hào)。
3C樣蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro),正式名稱為C30內(nèi)肽酶或3-胰凝乳蛋白酶樣蛋白酶,[2]是在冠狀病毒中發(fā)現(xiàn)的主要蛋白酶。它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白。它是一種半胱氨酸蛋白酶,是蛋白酶PA家族的成員。它在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二聯(lián)體并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽鍵。酶委員會(huì)將這個(gè)家族稱為SARS冠狀病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69)。3CL蛋白酶對(duì)應(yīng)于冠狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5)。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶(3Cpro),是一種在小核糖核酸病毒中發(fā)現(xiàn)的同源蛋白酶。3C樣蛋白酶能夠催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸(絲氨酸、丙氨酸或甘氨酸)之間的肽鍵。例如,SARS冠狀病毒3CLpro可以自我切割以下肽:[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是對(duì)應(yīng)于SARS3C樣蛋白酶的兩個(gè)自切割位點(diǎn)的兩個(gè)肽該蛋白酶在冠狀病毒復(fù)制酶多蛋白(P0C6U8)的加工過(guò)程中很重要。它是冠狀病毒中的主要蛋白酶,對(duì)應(yīng)于非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5)。[6]它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白。3CL蛋白酶在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二元組。[4]半胱氨酸的硫作為親核試劑,組氨酸的咪唑環(huán)作為一般堿基。
糖生物學(xué)中的應(yīng)用糖基化分析Endo H常用于分析蛋白質(zhì)的糖基化狀態(tài)。通過(guò)Endo H處理,可以將蛋白質(zhì)上的高甘露糖型糖鏈去除,從而簡(jiǎn)化糖鏈結(jié)構(gòu),便于進(jìn)一步分析。蛋白質(zhì)功能研究Endo H可用于研究糖基化對(duì)蛋白質(zhì)功能的影響。通過(guò)比較Endo H處理前后蛋白質(zhì)的生物學(xué)活性,可以揭示糖基化在蛋白質(zhì)功能中的作用。藥物開發(fā)某些藥物的療效和藥代動(dòng)力學(xué)特性受其糖基化狀態(tài)影響。Endo H可用于研究藥物分子的糖基化修飾,為藥物設(shè)計(jì)提供重要信息。疾病診斷異常的蛋白質(zhì)糖基化與多種疾病相關(guān)。Endo H可用于檢測(cè)疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化改變,為疾病診斷提供新的思路。結(jié)論Endo H作為一種重要的工具酶,在糖生物學(xué)研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。深入理解Endo H的結(jié)構(gòu)與功能,將有助于揭示蛋白質(zhì)糖基化在生命過(guò)程中的作用,為相關(guān)疾病的診斷提供新策略。重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過(guò)基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,保持天然TEV酶的功能活性。
標(biāo)題:牛凝血酶(Bovine Thrombin)的高比活應(yīng)用及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要性摘要牛凝血酶(Bovine Thrombin),一種高比活度的絲氨酸蛋白水解酶,具有>2000 IU/mg的特異性活性,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床,本文綜述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用機(jī)制以及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用。引言牛凝血酶是從牛血漿中提取的酶,分子量為37KD,由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過(guò)二硫鍵組成。作為凝血過(guò)程中的關(guān)鍵酶,牛凝血酶催化纖維蛋白原(fibrinogen)水解,形成纖維蛋白單體,進(jìn)而促進(jìn)血凝塊的形成。由于其高度的序列專一性和水解效率,牛凝血酶不僅在生理止血中發(fā)揮作用,也作為分子生物學(xué)研究中的工具酶。材料與方法產(chǎn)品性質(zhì)分析:分析牛凝血酶的CAS號(hào)、分子量、比活度、外觀和純度等物理化學(xué)性質(zhì)。運(yùn)輸和保存方法:評(píng)估牛凝血酶的運(yùn)輸條件和長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性。使用方法:探討牛凝血酶在不同實(shí)驗(yàn)條件下的溶解、復(fù)溶和消化條件。隨著醫(yī)藥科技的發(fā)展,透明質(zhì)酸在醫(yī)藥這方面的應(yīng)用將越來(lái)越多,包括作為藥物載體和組織工程的基質(zhì)。Recombinant Biotinylated Human VEGF121 Protein,His-Avi Tag
UbcH5a/UBE2D1具有一個(gè)保守的E2催化結(jié)構(gòu)域,該結(jié)構(gòu)域含有一個(gè)活性位點(diǎn)半胱氨酸殘基。Mas7
分子特性的重要性:牛凝血酶的高比活度和純度使其成為科研中理想的工具酶,有助于提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:牛凝血酶在血液學(xué)研究、藥物篩選和疾病模型構(gòu)建中具有廣泛的應(yīng)用,對(duì)于理解血液凝固機(jī)制和開發(fā)新型抗凝血藥物具有重要意義。安全性與穩(wěn)定性:牛凝血酶的穩(wěn)定性好,2~8℃條件下可保存3年,室溫下可保存1年,且在生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行了病毒滅活處理,保證了科研使用的安全性。結(jié)論牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)因其高效性和專一性,在生物醫(yī)學(xué)研究中具有不可替代的作用。深入研究其分子特性和生物學(xué)功能,將有助于推動(dòng)相關(guān)疾病的診斷。未來(lái)方向未來(lái)的研究可以集中在以下幾個(gè)方面:牛凝血酶在新型抗凝血藥物開發(fā)中的應(yīng)用。牛凝血酶在疾病模型,特別是血栓性疾病研究中的應(yīng)用。牛凝血酶作為分子生物學(xué)工具酶的進(jìn)一步優(yōu)化和改進(jìn)。Mas7