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抑肽酶(Aprotinin),一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌(E. coli)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法,及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢。引言抑肽酶,又稱胰蛋白酶抑制劑,是一種小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究中,抑肽酶的使用對于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來源于動物,如牛肺,但存在外源病毒污染的風(fēng)險。因此,利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行重組抑肽酶的生產(chǎn),可以提供一種無動物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建:人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達(dá)的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達(dá)菌株的構(gòu)建:通過轉(zhuǎn)化,將構(gòu)建好的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌宿主菌中,構(gòu)建表達(dá)菌株。發(fā)酵培養(yǎng):利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng),以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化:通過多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。在蛋白質(zhì)的晶體學(xué)研究中,去除糖鏈可以幫助獲得去糖基化的蛋白質(zhì),這有助于更清晰地解析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)。Recombinant Cynomolgus BST2 Protein,His Tag
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS?CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.Recombinant Mouse SEMA4B Protein,His Tag跨膜蛋白的表達(dá)與制備需要采用合適的表達(dá)載體、宿主細(xì)胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法,優(yōu)化表達(dá)和純化過程。
Name:4-1BBR/TNFRSF9,Human同義:Tnfrsf9,CD137抗原,T細(xì)胞抗原ILA描述:4-1bb受體,也稱tnfrsf9是tnf超家族受體的一個成員。它主要表達(dá)在各種T細(xì)胞表面,但也存在于B細(xì)胞、單核細(xì)胞和各種轉(zhuǎn)化細(xì)胞系中。4-1bb受體結(jié)合到4-1bbl,為T淋巴細(xì)胞提供共同刺激信號。4-1b受體的信號傳遞與抗原表達(dá)過程和細(xì)胞毒性T細(xì)胞的生成有關(guān)。物種:人類資料來源:E。大腸桿菌生物活性:與標(biāo)準(zhǔn)相比具有完全生物活性。利用人外周血單核細(xì)胞產(chǎn)生的IL8的抑制作用決定了其生物活性。在4-1bb配體和4-1bb受體中,大約90%的IING都是用1g濃度進(jìn)行的。格斯序列縮短:分子式:C終端:分子量:測量的分子量:大約17.7kda,一個含有166個氨基酸的非糖化多肽鏈。Purity:>97%bySDS-PAGEandHPLCanalyses.配方:用10mmPb,PH8.0,150mm納克爾過濾濃縮液凍干.重建:我們建議在開瓶前先將此瓶簡單離心,以便將其放在底部。在無菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水緩沖液中再形成濃度為0.1-1.0毫克/毫升。庫存解決方案應(yīng)分配到工作參數(shù)中,并在20℃處儲存。應(yīng)在適當(dāng)?shù)木彌_解決方案中進(jìn)一步稀釋。水平:Lal法測定的Rhu4-1b受體小于1歐盟/克。儲藏:無菌過濾白干凍干粉。
RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.儲存條件Theproductshouldbestoredat-25~-15℃for1yearfromdateofreceipt.2-7days,2~8°Cundersterileconditionsafterreconstitution.在某些疾病中,特定蛋白質(zhì)的泛素化水平可能發(fā)生變化,因此,泛素化蛋白質(zhì)可以作為疾病的生物標(biāo)志物。
RecombinantBiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProtein,hFc-AviTag分子別名(Synonyms)Mesothelin;CAK1;MSLN;MPFSMRP表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProteinisexpressedfromHEK293withhFctagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGlu296-Gly580.[Accession|Q13421-2]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto70-80kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedAnti-MSLNAntibody,hFcTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanMSLN,hFcTagwiththeEC50of18.4ng/mldeterminedbyELISA.泛素是一種小分子蛋白,存在于真核生物中,它在細(xì)胞內(nèi)起到調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期控制。Recombinant Mouse PKM2Protein,His Tag
使用全長A2AR蛋白進(jìn)行藥物篩選:全長A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR親和分析,以篩選和優(yōu)化潛在的A2AR調(diào)節(jié)劑。Recombinant Cynomolgus BST2 Protein,His Tag
產(chǎn)品描述纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),即凝血因子I,分子量約340kDa,由α、β、γ三對不同多肽鏈組成,多肽鏈間以二硫鍵相連。α鏈分子量63.5kDa,β鏈分子量56kDa,γ鏈分子量47kDa,纖維蛋白原約含4%碳水化合物。纖維蛋白原參與凝血的原理:在凝血酶作用下,α鏈與β鏈分別釋放出A肽與B肽,生成纖維蛋白單體。在此過程中,由于釋放了酸性多肽,負(fù)電性降低,單體易于聚合成纖維蛋白多聚體,但此時單體之間借氫鍵與疏水鍵相連,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。進(jìn)一步在Ca2+與活化的ⅩⅢ因子作用下,單體之間以共價鍵相連,則變成穩(wěn)定的不溶性纖維蛋白凝塊,完成凝血過程。來源于不同物種(如來源于牛、貓、狗、豚鼠、人、綿羊、小鼠和大鼠等)的纖維蛋白原具有相似的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。因此,一般來源于一種哺乳動物的纖維蛋白原可與其他來源的凝血酶交叉反應(yīng),相反地來自一種哺乳動物蛋白的凝血酶液也可注入多種動物,發(fā)生凝血反應(yīng)。Recombinant Cynomolgus BST2 Protein,His Tag