Endo H糖苷內(nèi)切酶H：結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Endo H）是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶，對(duì)研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識(shí)別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌，其分子量約為130 kDa。該酶具有一個(gè)催化中心，能夠識(shí)別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析，但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定。催化機(jī)制Endo H通過(guò)水解N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）與N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）之間的β-1,4糖苷鍵，從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈。該過(guò)程不涉及輔因子，表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點(diǎn)的氨基酸殘基。泛素是一種小分子蛋白，存在于真核生物中，它在細(xì)胞內(nèi)起到調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期控制。Recombinant Biotinylated Human ACE2/ACEH Protein,hFc-Avi Tag

ERBB3,又稱HH3(人表皮生長(zhǎng)因子受體3),是一種I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受體ERBC家族的成員。ERBP家族成員作為表皮生長(zhǎng)因子(LU)家族的生長(zhǎng)因子的受體。在ERBP家庭成員中,因?yàn)樗幸粋€(gè)缺陷的激酶域。ERBB3在角化細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、成肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞中都有表達(dá)。單體ERbb3是一種低親和性的受體。ERBB3與ERBB2的異聚反應(yīng)形成高親和性受體復(fù)合物。與此相反,ERBB3同向聚合或異向聚合形成了一個(gè)低親和性的結(jié)合物。因?yàn)镋RBB3含有一個(gè)有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域負(fù)責(zé)通過(guò)異二重瓣受體啟動(dòng)酪氨酸磷酸化信號(hào)。研究發(fā)現(xiàn),ERBB3細(xì)胞質(zhì)區(qū)內(nèi)的三個(gè)離散氨基酸信號(hào)對(duì)ERBB2的轉(zhuǎn)導(dǎo)至關(guān)重要。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)重組的人HR3/ERBB3蛋白表達(dá)自于C-端的HK293細(xì)胞和AVI標(biāo)記。里面有血清20-Thr643。分子量大約71.6Recombinant Human TIM-1/HAVCR1 Protein,His Tag酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F（PNGase F）是一種通過(guò)酵母重組表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的酶。

SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.

AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.在藥物篩選中，全長(zhǎng)CB1受體可用于高通量篩選實(shí)驗(yàn)，以發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化潛在的藥物候選物。

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶，在病毒復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。鼻病毒屬于小RNA病毒科，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長(zhǎng)552bp，編碼的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量約為22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性，能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵，識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因，在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá)，純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶，該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點(diǎn)的融合蛋白，具有良好的生物學(xué)活性。同時(shí)，本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標(biāo)簽蛋白，有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名（Chinesesynonym）:3C蛋白酶英文別名（Englishsynonym）:3CProtease來(lái)源（Source）:大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽（label）:GST-3CProtease-MAT純度（Purity）:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度>95%分子量（Molecularweight）:47.38kDa比活性（Specificactivity）:500U/ml緩沖液組分（Buffer）:50mMTris-HCl，150mMNaCl，1mMEDTA，1mMDTT，pH7.0酶活定義（UnitDefinition）:在緩沖液中切割100μg被檢測(cè)的融合蛋白，反應(yīng)條件為4℃16小時(shí),切割率≥90%運(yùn)輸和保存方法:干冰運(yùn)輸；保存于-20℃。酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F，是一種利用酵母作為宿主細(xì)胞，通過(guò)基因工程技術(shù)表達(dá)特定酶的過(guò)程。Recombinant Human CALCA/CGRP Protein,hFc Tag

由于其在細(xì)胞外基質(zhì)中的存在，透明質(zhì)酸在細(xì)胞黏附、遷移、增殖和分化過(guò)程中扮演著關(guān)鍵角色。Recombinant Biotinylated Human ACE2/ACEH Protein,hFc-Avi Tag

牙花(GPC)是硫酸肝素蛋白聚糖的一個(gè)家族,它是由糖磷酸肌醇(GPI)錨連接在細(xì)胞表面的。在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)了這個(gè)家族的六名成員(GPC-GPC6)。已經(jīng)研制出幾種抗gpc3抗體。產(chǎn)品性質(zhì)同義詞Gpc3;dgsx;gbs1;sgbs1;sgbs1;工會(huì)編號(hào)P51654-1來(lái)源重組人的Gpc3/葡萄糖3蛋白表達(dá)于C-端的HK293細(xì)胞和AVI標(biāo)記。里面有GLN-25-559。分子量該蛋白質(zhì)的預(yù)測(cè)兆瓦為63.6kda。由于糖基化,蛋白質(zhì)遷移到42kda,80-135kda基于三聯(lián)頁(yè)面結(jié)果。純潔根據(jù)三-BIS頁(yè)面確定的90%產(chǎn)品用Lal法測(cè)定每一種蛋白質(zhì)。公式化在PBS(PPS)中用0.22離子過(guò)濾溶液凍干(PH7.4)。通常在凍干前添加5%海藻糖作為保護(hù)劑。重建離心管打開(kāi)前。建議將其重組為超過(guò)100克/毫升的濃度(凍干時(shí)通常使用1毫克/毫升的溶液)。在蒸餾水中溶解凍干蛋白。Recombinant Biotinylated Human ACE2/ACEH Protein,hFc-Avi Tag