利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點中,得到重組質(zhì)粒pGCPI,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),超聲波破茵后,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異。泛素蛋白(Ubiquitin,簡稱Ub)是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。Recombinant Human MDC/CCL22
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實驗;若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時間。Recombinant Mouse GP1BB Protein,hFc Tag透明質(zhì)酸以其獨特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮多種重要的生理功能,如潤滑關(guān)節(jié)、調(diào)節(jié)血管壁的通透性。
Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).產(chǎn)品性質(zhì)別名SproteinRBD;SglycoproteinRBD;SpikeproteinRBDAccessionQHD43416.1表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantSARS-CoV-2SpikeRBD(OmicronBA.4/BA.5/BA.5.1.3/BA.5.2)ProteinisexpressedfromExpi293withHistagattheC-terminal.ItcontainsArg319-Phe541(G339D,S371F,S373P,S375F,T376A,D405N,R408S,K417N,N440K,L452R,S477N,T478K,E484A,F486V,Q498R,N501Y,Y505H).
透明質(zhì)酸酶活力單位(Unitdefinition)基于USP透明質(zhì)酸酶參照標(biāo)準(zhǔn),即每分鐘在37℃,pH5.7的2mL反應(yīng)液中引起OD6000.330個變化定義為一個活力單位。抑制劑(Inhibitor)Fe2+,F(xiàn)e3+,Zn2+,Cu2+,肝素,金精三羧酸,硫酸,硝酸,乙?;该髻|(zhì)酸,硫酸纖維素酯,膽汁等結(jié)構(gòu)式(Structure)運輸和保存方法冰袋運輸。-20℃保存,兩年有效。溶液配制溶于0.02MPBS(pH7.0),含77mMNaCl和0.01%BSA,濃度為1mg/mL?,F(xiàn)配現(xiàn)用。該產(chǎn)品儲存液不穩(wěn)定,使用時建議現(xiàn)配現(xiàn)用。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。在蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域,泛素蛋白可以作為一種標(biāo)簽或融合蛋白,用于提高目標(biāo)蛋白的可溶性、穩(wěn)定性或功能性。
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,對研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量約為130 kDa。該酶具有一個催化中心,能夠識別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定。催化機(jī)制Endo H通過水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)與N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之間的β-1,4糖苷鍵,從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈。該過程不涉及輔因子,表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點的氨基酸殘基。人α-凝血酶,一種絲氨酸蛋白酶,是凝血級聯(lián)反應(yīng)中的中心酶,對止血和其他多種生理過程至關(guān)重要。Recombinant Human Transferrin R/CD71 Protein,His-Avi Tag
分子膠降解劑通過誘導(dǎo)不同的Ub連接酶與目標(biāo)蛋白之間的相互作用來促進(jìn)目標(biāo)蛋白的降解。Recombinant Human MDC/CCL22
基因工程與抗體技術(shù)通過基因工程方法,可以構(gòu)建重組3C蛋白酶,并利用其切割特異性進(jìn)行活性驗證。此外,通過動物實驗獲得3C蛋白酶抗體,可以探索利用抗體技術(shù)抑制3C蛋白酶活性,進(jìn)而達(dá)到抑制病毒復(fù)制的目的4。研究進(jìn)展與挑戰(zhàn)3C蛋白酶及其抑制劑的研究進(jìn)展迅速,但仍面臨挑戰(zhàn)。例如,需要深入了解不同耐藥突變對3CLpro自身活性的影響,以及不同抑制劑之間的交叉耐藥風(fēng)險。這些研究對于開發(fā)新的廣譜抗病毒藥物具有重要意義38。結(jié)論3C蛋白酶是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶,是抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點。深入研究3C蛋白酶的結(jié)構(gòu)、功能以及耐藥機(jī)制,對于開發(fā)有效的抗病毒藥物和方法具有重要意義。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,3C蛋白酶的研究將為人類戰(zhàn)勝病毒性疾病提供更多的科學(xué)依據(jù)策略。Recombinant Human MDC/CCL22