Cas9核酸酶是一種引導RNA引導的核酸內(nèi)切酶,可以催化雙鏈DNA的裂解。這種靶向核酸酶是一種高精度的基因組編輯的有力工具。Cas9蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導RNA(gRNA)成分形成一個非常穩(wěn)定的核糖白(RNP)復合物。Cas9RNP復合物可以在進入細胞后,通過添加一個N端核定位信號(NLS),增加入核效率。YEASEN開發(fā)的NLS-Cas9核酸酶在蛋白的N端包含一個核定位序列(NLS),以增加入核切割效率。產(chǎn)品特點如下:無DNA:沒有外部DNA添加。安全性好:野生型Cas9蛋白,無標簽??蓱?yīng)用于:通過體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。產(chǎn)品信息貨號11366ES60/11366ES76規(guī)格100μg/500μg來源重組Cas9來源于大腸桿菌物種化膿性鏈球菌標簽無分子量160KDa濃度10mg/mL(50μg);10mg/mL(100μg)通過使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質(zhì)是否發(fā)生糖基化,以及糖基化位點。Recombinant Mouse ADAM9 Protein,His Tag
RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)Protein,His-AviTag性能參數(shù)表達區(qū)間及表達系統(tǒng)(Source)RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminalItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:01),Ile21-Met119(B2M)andFLLTRILTIpeptide.[Accession|A0A140T913(HLA-A*02:01)&P61769(B2M)&FLLTRILTIpeptide]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto52-62kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.MARK Substrate透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡稱HA)是一種存在于人體和動物組織中的天然高分子多糖,稱為糖醛酸或玻尿酸。
產(chǎn)品描述纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),即凝血因子I,分子量約340kDa,由α、β、γ三對不同多肽鏈組成,多肽鏈間以二硫鍵相連。α鏈分子量63.5kDa,β鏈分子量56kDa,γ鏈分子量47kDa,纖維蛋白原約含4%碳水化合物。纖維蛋白原參與凝血的原理:在凝血酶作用下,α鏈與β鏈分別釋放出A肽與B肽,生成纖維蛋白單體。在此過程中,由于釋放了酸性多肽,負電性降低,單體易于聚合成纖維蛋白多聚體,但此時單體之間借氫鍵與疏水鍵相連,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。進一步在Ca2+與活化的ⅩⅢ因子作用下,單體之間以共價鍵相連,則變成穩(wěn)定的不溶性纖維蛋白凝塊,完成凝血過程。來源于不同物種(如來源于牛、貓、狗、豚鼠、人、綿羊、小鼠和大鼠等)的纖維蛋白原具有相似的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。因此,一般來源于一種哺乳動物的纖維蛋白原可與其他來源的凝血酶交叉反應(yīng),相反地來自一種哺乳動物蛋白的凝血酶液也可注入多種動物,發(fā)生凝血反應(yīng)。
Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進行改造,它在N端包含一個核定位信號(NLS),在C端包含一個EGFP和一個6X(His)序列。當Cas9以NLS序列表達時,Cas9RNP復合物在進入細胞后立即定位到細胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細胞的報告器,通過熒光細胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點如下:無DNA:沒有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性;節(jié)省時間:無需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動力:通過基于EGFP的FACS富集細胞群以進行所需的基因組編輯。C端His標簽增加了融合蛋白檢測方法的選擇??蓱?yīng)用于:通過體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時的體內(nèi)基因編輯。通過基于EGFP的FACS富集細胞群以進行所需的基因組編輯。儲存條件-25~-15℃保存,有效期1年。常用的跨膜蛋白表達系統(tǒng)包括大腸桿菌表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、昆蟲細胞表達系統(tǒng)和哺乳動物細胞表達系統(tǒng)等。
糖生物學中的應(yīng)用糖基化分析Endo H常用于分析蛋白質(zhì)的糖基化狀態(tài)。通過Endo H處理,可以將蛋白質(zhì)上的高甘露糖型糖鏈去除,從而簡化糖鏈結(jié)構(gòu),便于進一步分析。蛋白質(zhì)功能研究Endo H可用于研究糖基化對蛋白質(zhì)功能的影響。通過比較Endo H處理前后蛋白質(zhì)的生物學活性,可以揭示糖基化在蛋白質(zhì)功能中的作用。藥物開發(fā)某些藥物的療效和藥代動力學特性受其糖基化狀態(tài)影響。Endo H可用于研究藥物分子的糖基化修飾,為藥物設(shè)計提供重要信息。疾病診斷異常的蛋白質(zhì)糖基化與多種疾病相關(guān)。Endo H可用于檢測疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化改變,為疾病診斷提供新的思路。結(jié)論Endo H作為一種重要的工具酶,在糖生物學研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。深入理解Endo H的結(jié)構(gòu)與功能,將有助于揭示蛋白質(zhì)糖基化在生命過程中的作用,為相關(guān)疾病的診斷提供新策略。α-凝血酶,是血液凝固途徑中的關(guān)鍵酶。它負責將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,形成血凝塊的基礎(chǔ)。Recombinant Human MCEMP1 Protein,hFc Tag
PNGase F是一種酰胺水解酶,能夠特異性地裂解糖蛋白中由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜型的寡糖。Recombinant Mouse ADAM9 Protein,His Tag
IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶,酶活(Enzymeactivity)40U/μL酶活定義(UnitDefinition)在37℃條件下,反應(yīng)30min,剪切>95%的1μg重組單克隆IgG所需要的酶量定義為一個活性單位。儲存條件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1.在消化液中加入適量IgG(加至5mg);2.在IgG樣本中加入IdeS蛋白酶(每1μgIgG加入1個單位的IdeS);3.將樣品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的緩沖中活性強。推薦反應(yīng)緩沖是50mM磷酸鈉,150mMNaCl(pH6.6),多數(shù)常見的生物緩沖也適用,比如Tris或PBS;注意:不在此pH范圍(例如乙酸鹽緩沖液)的緩沖也可能適用,但是孵育時間或酶量需要根據(jù)實際情況進行優(yōu)化。注意事項1.IdeS不能識別切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、豬、牛和山羊IgG,對小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性,酶切小鼠IgG2a和IgG3建議增加IdeS的用量(推薦用量為正常用量的5-10倍)。2.IdeS不能切割非IgG亞型的單抗分子,包括IgA、IgM、IgD和IgE。Recombinant Mouse ADAM9 Protein,His Tag