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N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說(shuō)明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。全長(zhǎng)A2aR蛋白可應(yīng)用于免疫、ELISA、SPR(表面等離子共振)、BLI(生物層干涉)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等場(chǎng)景。Bradykinin (1-7)
IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶,酶活(Enzymeactivity)40U/μL酶活定義(UnitDefinition)在37℃條件下,反應(yīng)30min,剪切>95%的1μg重組單克隆IgG所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1.在消化液中加入適量IgG(加至5mg);2.在IgG樣本中加入IdeS蛋白酶(每1μgIgG加入1個(gè)單位的IdeS);3.將樣品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的緩沖中活性強(qiáng)。推薦反應(yīng)緩沖是50mM磷酸鈉,150mMNaCl(pH6.6),多數(shù)常見(jiàn)的生物緩沖也適用,比如Tris或PBS;注意:不在此pH范圍(例如乙酸鹽緩沖液)的緩沖也可能適用,但是孵育時(shí)間或酶量需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行優(yōu)化。注意事項(xiàng)1.IdeS不能識(shí)別切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、豬、牛和山羊IgG,對(duì)小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性,酶切小鼠IgG2a和IgG3建議增加IdeS的用量(推薦用量為正常用量的5-10倍)。2.IdeS不能切割非IgG亞型的單抗分子,包括IgA、IgM、IgD和IgE。Recombinant Human Serpin F1/PEDF Protein,His Tag通過(guò)使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質(zhì)是否發(fā)生糖基化,以及糖基化位點(diǎn)。
牛纖維蛋白原:止血中的關(guān)鍵成分及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用摘要牛纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),也稱為凝血因子I,是一種在血液凝固過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的血漿糖蛋白。本文討論了牛纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性、提取方法以及各種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,突出其在研究和中的重要性。引言牛纖維蛋白原是一種分子量較大的糖蛋白(約340 kDa),由肝臟的肝細(xì)胞合成。它在血液凝固的然后一步中起著主要作用,在那里它被轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白網(wǎng),穩(wěn)定了血凝塊。該分子由兩個(gè)相同的半部分組成,每個(gè)半部分包含三個(gè)多肽鏈(α、β和γ),通過(guò)二硫鍵連接。結(jié)構(gòu)特性纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)完整性對(duì)其功能至關(guān)重要。每個(gè)分子的一半包含三個(gè)鏈(α、β、γ),具有不同的分子量(α約63.5 kDa,β約56 kDa,γ約47 kDa)和大約4%的碳水化合物。這些鏈通過(guò)二硫鍵相互連接,這對(duì)于維持蛋白質(zhì)的構(gòu)象和活性至關(guān)重要。提取和純化已經(jīng)開(kāi)發(fā)了各種方法來(lái)提取和純化血漿中的牛纖維蛋白原。傳統(tǒng)方法包括鹽析、色譜法和乙醇沉淀。鹽析,特別是使用硫酸銨,是一種常見(jiàn)的方法,因其簡(jiǎn)單有效而受到青睞。然而,通過(guò)這些方法獲得的纖維蛋白原純度可能會(huì)有所不同,需要進(jìn)一步的純化步驟,如離子交換色譜法,以實(shí)現(xiàn)更高程度的純化。
RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).儲(chǔ)存條件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.泛素化可以是單泛素化,也可以是多泛素化或多聚泛素化,這取決于靶蛋白上連接的泛素分子的數(shù)量和方式。
Cas9核酸酶是一種引導(dǎo)RNA引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可以催化雙鏈DNA的裂解。這種靶向核酸酶是一種高精度的基因組編輯的有力工具。Cas9蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導(dǎo)RNA(gRNA)成分形成一個(gè)非常穩(wěn)定的核糖白(RNP)復(fù)合物。Cas9RNP復(fù)合物可以在進(jìn)入細(xì)胞后,通過(guò)添加一個(gè)N端核定位信號(hào)(NLS),增加入核效率。YEASEN開(kāi)發(fā)的NLS-Cas9核酸酶在蛋白的N端包含一個(gè)核定位序列(NLS),以增加入核切割效率。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無(wú)DNA:沒(méi)有外部DNA添加。安全性好:野生型Cas9蛋白,無(wú)標(biāo)簽??蓱?yīng)用于:通過(guò)體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。產(chǎn)品信息貨號(hào)11366ES60/11366ES76規(guī)格100μg/500μg來(lái)源重組Cas9來(lái)源于大腸桿菌物種化膿性鏈球菌標(biāo)簽無(wú)分子量160KDa濃度10mg/mL(50μg);10mg/mL(100μg)在生物制藥工業(yè)中,腸激酶用于生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物,通過(guò)專一性切割去除不需要的序列,提高藥物純度和活性。Recombinant Human CD19(His Tag)
透明質(zhì)酸的生物相容性使其在生物材料領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用,如作為藥物遞送載體。Bradykinin (1-7)
Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(hào)(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過(guò)熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無(wú)DNA:沒(méi)有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測(cè)方法的選擇??蓱?yīng)用于:通過(guò)體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過(guò)電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。Bradykinin (1-7)