PCR預(yù)混合溶液是一種為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)實驗預(yù)先配制好的混合試劑,它包含進(jìn)行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。這種預(yù)混合溶液的設(shè)計旨在簡化實驗步驟,減少實驗過程中的誤差,提高實驗的重復(fù)性和效率。通常,PCR預(yù)混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:負(fù)責(zé)在PCR過程中合成新的DNA鏈。-**dNTPs**(脫氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**緩沖體系**:提供適宜的pH和離子環(huán)境,保證DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作為DNA聚合酶的輔助因子,影響酶的活性和PCR的特異性。-**穩(wěn)定劑**:延長預(yù)混合溶液的有效期和穩(wěn)定性。-**染料**(可選):如溴酚藍(lán)或類似物質(zhì),用于在電泳時觀察DNA條帶。PCR預(yù)混合溶液的使用可以減少實驗者在每次實驗時手動添加各種成分的需要,從而節(jié)省時間并降低污染的風(fēng)險。此外,一些預(yù)混合溶液還可能包含其他添加劑,比如增強劑或保護劑,以提高PCR的效率和穩(wěn)定性。透明質(zhì)酸的生產(chǎn)可以通過動物組織提取、微生物發(fā)酵或化學(xué)合成等方法進(jìn)行。Recombinant Mouse TFPI-2 Protein,hFc Tag
牛纖維蛋白原:止血中的關(guān)鍵成分及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用摘要牛纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),也稱為凝血因子I,是一種在血液凝固過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的血漿糖蛋白。本文討論了牛纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性、提取方法以及各種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,突出其在研究和中的重要性。引言牛纖維蛋白原是一種分子量較大的糖蛋白(約340 kDa),由肝臟的肝細(xì)胞合成。它在血液凝固的然后一步中起著主要作用,在那里它被轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白網(wǎng),穩(wěn)定了血凝塊。該分子由兩個相同的半部分組成,每個半部分包含三個多肽鏈(α、β和γ),通過二硫鍵連接。結(jié)構(gòu)特性纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)完整性對其功能至關(guān)重要。每個分子的一半包含三個鏈(α、β、γ),具有不同的分子量(α約63.5 kDa,β約56 kDa,γ約47 kDa)和大約4%的碳水化合物。這些鏈通過二硫鍵相互連接,這對于維持蛋白質(zhì)的構(gòu)象和活性至關(guān)重要。提取和純化已經(jīng)開發(fā)了各種方法來提取和純化血漿中的牛纖維蛋白原。傳統(tǒng)方法包括鹽析、色譜法和乙醇沉淀。鹽析,特別是使用硫酸銨,是一種常見的方法,因其簡單有效而受到青睞。然而,通過這些方法獲得的纖維蛋白原純度可能會有所不同,需要進(jìn)一步的純化步驟,如離子交換色譜法,以實現(xiàn)更高程度的純化。Recombinant Human Osteomodulin Protein,His TagC5aR(C5a 受體)是補體系統(tǒng)的一部分,它有兩種已知的受體:C5aR1(CD88)和C5L2。
AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的特異性主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**高保真DNA聚合酶**:該產(chǎn)品含有的HieffCanace?AdvanceFastHigh-FidelityDNAPolymerase是一種高保真度的DNA聚合酶,它具有較低的錯誤率,能夠在復(fù)制DNA時減少突變的發(fā)生,特別是在高GC含量的基因區(qū)域。2.**優(yōu)化的緩沖體系**:產(chǎn)品中的緩沖體系經(jīng)過特別優(yōu)化,能夠提供適宜的反應(yīng)條件,從而提高PCR反應(yīng)的特異性,減少非特異性擴增。3.**快速擴增速度**:該產(chǎn)品具有快速擴增的特點,速度可達(dá)5秒/kb,快速的擴增速度有助于減少非特異性擴增的機會。4.**寬泛的GC含量適應(yīng)性**:它可以用于擴增20-80%GC含量的基因,這表明它對不同基因序列的適應(yīng)性強,有助于提高特異性擴增。5.**良好的穩(wěn)定性**:產(chǎn)品含有特異保護劑,即使在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定活性,這有助于維持PCR反應(yīng)的一致性和特異性。6.**直接電泳**:由于含有預(yù)添加的電泳指示劑,PCR產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳分析,減少了后續(xù)操作步驟中可能引入的非特異性問題。
BloodDirectPCRMasterMix(2×)是一種專為從全血樣本直接進(jìn)行PCR擴增而設(shè)計的即用型2倍濃度的預(yù)混合溶液。這種產(chǎn)品允許研究人員在不需要預(yù)先進(jìn)行DNA提取或樣品處理的情況下,直接使用抗凝血樣品或干血斑樣品進(jìn)行基因組DNA中目的基因的擴增。它通常包含以下特點:1.**耐血液樣本中的抑制劑**:含有的DNA聚合酶能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉等。2.**高效率**:特別改造的DNA聚合酶具有高效率,能夠快速擴增目標(biāo)DNA。3.**簡便性**:簡化了PCR實驗的步驟,因為不需要進(jìn)行DNA的提取和純化。4.**直接電泳**:PCR產(chǎn)物可直接上樣進(jìn)行電泳分析,無需添加額外的上樣緩沖液。5.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,并且可以與多種常見PCR儀器配合使用。6.**優(yōu)化的配方**:包含優(yōu)化的緩沖體系、dNTPs、Mg2+等,適合血液樣本的PCR擴增。例如,Easy-Load?BloodDirectPCRMasterMix(2X)就是這類產(chǎn)品中的一個,它含有耐血的HemoTaq?DNA聚合酶,適用于EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝血樣品或干血斑樣品直接PCR檢測。此外,
分子特性:牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的標(biāo)準(zhǔn),純度達(dá)到SDS-PAGE電泳無雜蛋白條帶的要求。穩(wěn)定性:牛凝血酶在室溫下運輸穩(wěn)定,在2~8℃條件下可保存3年而酶活力未有變化。應(yīng)用效果:在1:2000的質(zhì)量比下,牛凝血酶能有效切割蛋白,適用于科研和工業(yè)生產(chǎn)中的重組融合蛋白特異性斷裂。討論科研應(yīng)用:牛凝血酶因其高比活度和專一性,在分子生物學(xué)、生物化學(xué)和生物工程制藥研究中作為工具酶具有重要價值。臨床:作為止血藥物,牛凝血酶在外科手術(shù)中的應(yīng)用超過100年,因其簡便和高效而受到青睞6。生產(chǎn)優(yōu)勢:牛凝血酶的生產(chǎn)穩(wěn)定性好,純度高,不含有其他蛋白酶活性,適合大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。透明質(zhì)酸以其獨特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機體內(nèi)發(fā)揮多種重要的生理功能,如潤滑關(guān)節(jié)、調(diào)節(jié)血管壁的通透性。Recombinant Human B7-H6/NCR3LG1 Protein,hFc Tag
隨著醫(yī)藥科技的發(fā)展,透明質(zhì)酸在醫(yī)藥這方面的應(yīng)用將越來越多,包括作為藥物載體和組織工程的基質(zhì)。Recombinant Mouse TFPI-2 Protein,hFc Tag
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實驗;若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時間。Recombinant Mouse TFPI-2 Protein,hFc Tag