dCTPSolution(脫氧胞苷三磷酸溶液)是一種分子生物學(xué)試劑,它是進(jìn)行DNA合成反應(yīng)的關(guān)鍵成分之一。dCTP與dATP、dGTP和dTTP一起,構(gòu)成DNA聚合過(guò)程中所需的四種脫氧核苷三磷酸(dNTPs)。每種dNTP對(duì)應(yīng)DNA中的一個(gè)堿基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鳥(niǎo)嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化學(xué)名稱是2'-脫氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和其他DNA合成過(guò)程中,dCTP作為底物,由DNA聚合酶催化,與DNA模板鏈上的鳥(niǎo)嘌呤(G)配對(duì),形成新的DNA鏈。-**DNA測(cè)序**:在某些DNA測(cè)序方法中,dCTP可能用于標(biāo)記或合成測(cè)序產(chǎn)物。-**分子克隆和其他技術(shù)**:dCTP在分子克隆、基因表達(dá)分析和其他涉及DNA合成的實(shí)驗(yàn)中也有應(yīng)用。dCTPSolution通常以高濃度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在實(shí)驗(yàn)中使用時(shí)進(jìn)行稀釋。這種溶液需要在低溫(通常是-20°C)條件下儲(chǔ)存,以保持其穩(wěn)定性和避免分解。在購(gòu)買和使用dCTPSolution時(shí),用戶應(yīng)確保產(chǎn)品具有高純度、無(wú)PCR抑制劑、無(wú)核酸酶污染等特性,以保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。此外,dCTPSolution應(yīng)用于研究用途,不應(yīng)用于臨床診斷過(guò)程。FnCas12a特異性識(shí)別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標(biāo),其PAM序列為5'-TTN-3',與Cas9的PAM序列不同。Recombinant Human TL-1A/TNFSF15 Protein
dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的"特異性"一詞在不同的上下文中可能有不同的含義。在分子生物學(xué)領(lǐng)域,特異性通常指的是分子識(shí)別和相互作用的精確性。對(duì)于dNTPMix,特異性可以指以下幾個(gè)方面:1.**堿基特異性**:dNTPMix包含四種dNTPs(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),每種對(duì)應(yīng)DNA中的一個(gè)特定堿基。在DNA合成過(guò)程中,DNA聚合酶確保只有正確的互補(bǔ)dNTP與模板鏈上的堿基配對(duì),這體現(xiàn)了堿基配對(duì)的特異性。2.**酶特異性**:某些DNA聚合酶具有校正(proofreading)功能,它們可以識(shí)別并修正配對(duì)錯(cuò)誤,提高DNA合成的特異性。3.**應(yīng)用特異性**:dNTPMix可以為特定的DNA合成應(yīng)用提供所需的所有四種核苷酸,例如PCR、cDNA合成、DNA測(cè)序等。不同的應(yīng)用可能需要特定的dNTP濃度或配方。4.**質(zhì)量控制特異性**:dNTPMix在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保沒(méi)有雜質(zhì)、DNase和RNase污染,保證產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)中的特異性表現(xiàn)。5.**穩(wěn)定性和純度特異性**:dNTPMix的穩(wěn)定性和純度(通?!?9%)對(duì)于實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要,高純度的dNTPMix可以減少非特異性反應(yīng)的發(fā)生。6.**反應(yīng)條件特異性**:使用dNTPMix時(shí),需要考慮反應(yīng)條件的特異性,如Mg2+濃度、pH值、溫度等,這些條件都會(huì)影響DNA合成的特異性。Recombinant Mouse CD200 R1 Protein,His TagPfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性和保真性使其在優(yōu)化PCR條件時(shí)更為靈活,比如在GC含量較高的模板中。
PCR抑制劑是指那些在PCR反應(yīng)中能夠干擾或阻礙DNA擴(kuò)增的物質(zhì)。這些物質(zhì)通常來(lái)源于生物樣本本身或者樣本的收集和處理過(guò)程。以下是一些PCR抑制劑的特點(diǎn):1.**多樣性**:PCR抑制劑可以是多種不同的化合物,包括膽酸鹽、尿素、血紅素、酚類化合物、蛋白質(zhì)、多糖、植物或血液成分等。2.**來(lái)源**:它們可能來(lái)自血液(如血紅素)、尿液(如尿素)、糞便(如膽酸鹽)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化學(xué)物質(zhì)(如酚類化合物)。3.**影響**:抑制劑可以影響DNA聚合酶的活性,干擾引物的退火,或與DNA模板發(fā)生非特異性結(jié)合,導(dǎo)致PCR擴(kuò)增效率降低或特異性下降。4.**復(fù)雜性**:由于樣本來(lái)源的復(fù)雜性,不同的抑制劑可能需要不同的策略來(lái)克服。某些抑制劑可能通過(guò)物理方法(如離心、過(guò)濾)去除,而其他抑制劑可能需要化學(xué)處理或使用特定的PCR增強(qiáng)劑。5.**濃度依賴性**:抑制效果通常與抑制劑的濃度有關(guān)。在較低濃度下,某些抑制劑可能不會(huì)影響PCR,但隨著濃度增加,抑制效果會(huì)變得更加明顯。6.**特異性**:某些抑制劑可能對(duì)特定的DNA聚合酶或PCR體系有特定的影響。例如,一些抑制劑可能特別影響高GC含量的模板擴(kuò)增。
pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的高活性是其重要特性之一,這種高活性主要來(lái)源于以下幾個(gè)方面:1.**轉(zhuǎn)座酶突變體**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是由Tn5轉(zhuǎn)座酶的高活性突變體構(gòu)成的。這種突變體相比野生型Tn5轉(zhuǎn)座酶,在體外的轉(zhuǎn)座效率顯著提高,通常提升1000倍以上。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶將ProteinA與高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶融合,這種融合不僅保留了Tn5轉(zhuǎn)座酶的高效DNA切割能力,還通過(guò)ProteinA的抗體結(jié)合特性,提高了對(duì)特定DNA序列的靶向能力。3.**轉(zhuǎn)座隨機(jī)性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶能夠在整個(gè)基因組上實(shí)現(xiàn)隨機(jī)的DNA切割,這為高通量測(cè)序提供了廣的覆蓋度。4.**穩(wěn)定性**:高活性的pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶在各種實(shí)驗(yàn)條件下都能保持穩(wěn)定,包括在不同的溫度和pH值條件下。5.**插入位點(diǎn)易測(cè)序**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶產(chǎn)生的DNA片段具有明確的插入位點(diǎn),這些位點(diǎn)容易被高通量測(cè)序技術(shù)識(shí)別和分析。6.**高效片段化**:在CUT&Tag等實(shí)驗(yàn)中,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶能夠高效地實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白結(jié)合DNA的片段化,為后續(xù)的測(cè)序和分析打下基礎(chǔ)。7.**低細(xì)胞投入量**:由于其高活性,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶允許從極少量的細(xì)胞中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如單細(xì)胞水平的研究。
Benzonase核酸酶是一種來(lái)自粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens)的非特異性核酸內(nèi)切酶,它能夠高效降解所有形式的DNA和RNA,包括單鏈、雙鏈、線性和環(huán)狀核酸,將其消化成2至5個(gè)堿基長(zhǎng)度的5'-單磷酸寡核苷酸。這種酶在生物技術(shù)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,包括:1.**降低粘度**:在蛋白樣品制備過(guò)程中,Benzonase核酸酶可以降低由于核酸引起的高粘度,從而便于樣品處理和提高蛋白產(chǎn)量。2.**去除核酸污染**:在蛋白提取、疫苗生產(chǎn)、生物制藥等領(lǐng)域,Benzonase核酸酶用于去除樣品中的核酸污染,確保產(chǎn)品質(zhì)量。3.**提高蛋白質(zhì)分離效果**:在雙向SDS-PAGE蛋白樣品制備中,Benzonase核酸酶可以去除帶負(fù)電荷的核酸,改善蛋白質(zhì)的分離效果,增強(qiáng)2-DE分辨率。4.**促進(jìn)蛋白質(zhì)復(fù)性**:在高質(zhì)量包涵體制備中,Benzonase核酸酶有助于降解核酸,從而促進(jìn)不可溶性蛋白的復(fù)性。5.**穩(wěn)定性和兼容性**:Benzonase核酸酶在多種條件下穩(wěn)定,包括高濃度的尿素,且與蛋白酶抑制劑兼容,但需注意EDTA對(duì)其活性的抑制作用。此外,Benzonase核酸酶的活性單位定義為在30分鐘內(nèi)使△A260值降低1.0的酶量,相當(dāng)于完全消化37μgDNA。Taq DNA Polymerase 能夠在相對(duì)較高的溫度下保持穩(wěn)定,其適催化溫度在75-80°C。Recombinant Human Osteoactivin/GPNMB Protein,His Tag
在50 μL的反應(yīng)體系中,建議使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。Recombinant Human TL-1A/TNFSF15 Protein
5'DNA腺苷?;噭┖惺且环N用于將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷?;揎椀膶?shí)驗(yàn)工具,其主要應(yīng)用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測(cè)序建庫(kù)或PCR檢測(cè)等時(shí),在3'端添加的接頭的制備。以下是5'DNA腺苷?;噭┖械囊恍╆P(guān)鍵特點(diǎn)和使用方法:1.**高效轉(zhuǎn)化**:該試劑盒能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉(zhuǎn)化成腺苷?;疍NA(AppDNA),從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟。2.**操作簡(jiǎn)便**:?jiǎn)尾椒磻?yīng)即可完成腺苷酰化,無(wú)需復(fù)雜的操作或額外的純化步驟。3.**高溫反應(yīng)**:在65℃的高溫下進(jìn)行反應(yīng),這有助于避免DNA或RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)腺苷?;磻?yīng)的干擾。4.**適用性廣**:適用于pmol級(jí)別至μmol級(jí)別的底物量,可以方便地根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要放大反應(yīng)體系。5.**組成成分**:試劑盒通常包含腺苷?;?Adenylase)、ATP和所需的緩沖液,以及用于啟動(dòng)反應(yīng)的5'-磷酸化的單鏈DNA。6.**保存條件**:一般建議在-20℃保存,有效期至少一年,長(zhǎng)期儲(chǔ)存建議在-70℃。7.**注意事項(xiàng)**:底物單鏈DNA或RNA的5'端磷酸化是必須的,而3'端可以進(jìn)行氨基化等封閉,也可以不封閉。反應(yīng)完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活A(yù)denylase,防止去腺苷?;F(xiàn)象。Recombinant Human TL-1A/TNFSF15 Protein