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Recombinant Rat IL-1 beta Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-11-01

重組增強型綠色熒光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一種用于生物科學(xué)研究的工具。以下是重組EGFP的一些特點和應(yīng)用:1.**高熒光強度**:EGFP比野生型GFP具有更強的熒光,這使得它在成像和檢測時更為敏感和有效。2.**改進的折疊效率**:EGFP在生理溫度(如37℃)下的折疊效率更高,這有助于在細胞內(nèi)快速形成成熟的熒光蛋白。3.**單一激發(fā)峰**:與野生型GFP相比,EGFP具有單一的激發(fā)峰,這簡化了成像條件的設(shè)置,并提高了信號的穩(wěn)定性。4.**適合多種生物系統(tǒng)**:EGFP可以用于多種生物系統(tǒng),包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞。5.**多功能性**:EGFP可以作為報告基因用于基因表達分析,也可以作為融合標簽用于蛋白質(zhì)定位和動態(tài)研究。6.**非糖基化**:在大腸桿菌中表達的重組EGFP是非糖基化的,這有助于減少翻譯后修飾的復(fù)雜性。7.**純度高**:重組EGFP通常具有高純度,適合用于各種生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗。8.**穩(wěn)定性**:EGFP的熒光穩(wěn)定性好,適合長時間觀察和成像。9.**分子量**:重組EGFP的分子量約為26.9kDa,由239個氨基酸構(gòu)成。Ultra-Long Master Mix 在分子生物學(xué)實驗中的應(yīng)用主要集中在需要擴增長片段DNA序列的場合。Recombinant Rat IL-1 beta Protein

Recombinant Rat IL-1 beta Protein,標準物質(zhì)

PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點:1.**特異性識別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進行酶切。2.**依賴結(jié)構(gòu)**:底物的識別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結(jié)構(gòu),還依賴于融合蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)。3.**分離GST標簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達出的帶有酶底物識別多肽序列融合蛋白的GST標簽進行分離。4.**表達宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達,并以無菌液體形式提供。5.**物理性質(zhì)**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應(yīng)16小時,能夠切割10μg的GST標簽的融合蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。Recombinant Rat IL-1 beta Protein隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。

Recombinant Rat IL-1 beta Protein,標準物質(zhì)

BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)在PCR中的應(yīng)用具有多個優(yōu)勢,以下是一些關(guān)鍵點:1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase具有很強的鏈置換活性,這使得它非常適合于等溫擴增技術(shù),如重組酶聚合酶擴增(RPA)。在這些技術(shù)中,BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特異性地擴增模板,在10到30分鐘內(nèi)將痕量的核酸模板(低至單拷貝)擴增至可以檢出的水平。2.**高溫穩(wěn)定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它在一些需要高溫反應(yīng)的實驗條件下表現(xiàn)出色。3.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫擴增中展現(xiàn)出高靈敏度,能夠?qū)⑽⒘亢怂崮0鍞U增到可檢測水平。同時,它也具有高特異性,減少了非特異性擴增的風(fēng)險。4.**簡化的樣品處理**:BsuDNAPolymerase可以直接對復(fù)雜樣品進行擴增,無需事先進行復(fù)雜的核酸純化和提取步驟,節(jié)省了時間和成本。5.**可擴增DNA和RNA**:BsuDNAPolymerase不僅可以擴增DNA,還可以直接擴增RNA,省去了額外的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(cDNA合成)步驟,這對于RNA的檢測和分析更加方便快捷。6.**無核酸外切酶和RNase殘留**:BsuDNAPolymerase在生產(chǎn)過程中確保無核酸外切酶、切口酶及RNase殘留,這有助于提高實驗的準確性和重復(fù)性。

使用PreScissionProtease進行蛋白質(zhì)切割后,可以采用以下方法來提高產(chǎn)品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換層析進一步純化蛋白質(zhì)。3.**凝膠滲透層析**:通過分子大小的排阻,去除分子量較大或較小的雜質(zhì)。4.**反向?qū)游?*:使用反相高效液相色譜(HPLC)技術(shù),根據(jù)蛋白質(zhì)與固定相的疏水相互作用進行分離。5.**超濾/透析**:使用超濾膜或透析袋去除低分子量的雜質(zhì),如鹽分、緩沖液成分或小分子蛋白質(zhì)。6.**二次親和層析**:在初次親和層析后,可以進行二次親和層析以進一步提高純度。7.**蛋白質(zhì)純化柱**:使用商業(yè)化的蛋白質(zhì)純化柱,如GST-Sepharose或Ni-NTA柱,進行快速純化。8.**等電聚焦電泳**:通過等電聚焦電泳(IEF)分離具有不同等電點的蛋白質(zhì)。9.**SDS-PAGE**:使用SDS-PAGE凝膠電泳分析蛋白質(zhì)的純度,并可通過凝膠切片回收相對純凈的蛋白質(zhì)條帶。10.**質(zhì)譜分析**:利用質(zhì)譜技術(shù)鑒定蛋白質(zhì)的確切質(zhì)量和序列來確保蛋白質(zhì)的純度和正確性。去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化蛋白上的泛素鏈,使泛素分子得以回收和再利用。

Recombinant Rat IL-1 beta Protein,標準物質(zhì)

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)和它的大片段(LargeFragment)是兩種在分子生物學(xué)實驗中常用的酶。它們的主要區(qū)別在于結(jié)構(gòu)和活性:1.**結(jié)構(gòu)**:-完整的BstDNAPolymeraseI包含一個5'→3'的核酸外切酶活性區(qū)域,而大片段是通過基因工程改造或蛋白酶處理去掉了這個外切酶活性區(qū)域的酶。因此,大片段沒有5'→3'的核酸外切酶活性,但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性。2.**活性**:-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性,這意味著它在合成DNA的同時可以“校對”錯誤,切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性區(qū)域,不具有這種校對能力。-大片段具有更強的鏈置換能力,這使得它非常適合于等溫擴增反應(yīng),如環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增(LAMP)和滾環(huán)擴增(RCA)。3.**應(yīng)用**:-BstDNAPolymeraseI由于具有校對功能,可能更適合于需要高保真度的DNA合成反應(yīng)。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其鏈置換能力,更適合于等溫擴增技術(shù),這些技術(shù)不需要熱循環(huán)儀,可以在恒定溫度下進行DNA擴增。4.**熱穩(wěn)定性**:-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的溫度下進行反應(yīng),而BstDNAPolymeraseI可能具有更寬的反應(yīng)溫度范圍。研究表明,優(yōu)化后的Cas12a系統(tǒng)在多種細胞類型中表現(xiàn)出良好的編輯效率。Recombinant Human/Mouse/Goat Cpn10/HSPE1 Protein,His-Avi Tag

One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種用于實時熒光定量PCR的試劑盒,它結(jié)合了反轉(zhuǎn)錄和PCR擴增步驟。Recombinant Rat IL-1 beta Protein

BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種經(jīng)過改造的酶,它來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)DNA聚合酶I,通過重組技術(shù)在大腸桿菌中表達并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性,但不具有5'→3'的核酸外切酶活性,因此它在等溫擴增反應(yīng)中非常有用,如環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增(LAMP)和滾環(huán)擴增(RCA)等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**等溫擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強的鏈置換能力,適用于多種等溫擴增反應(yīng),這些反應(yīng)通常在50-68°C之間進行,比較好反應(yīng)溫度為65°C。2.**快速測序**:由于其高聚合酶活性,BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測序,特別是對于高GC含量的DNA模板或微量(納克量級)DNA模板的測序。3.**全基因組擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴增(WGA),這是一種在不需要熱循環(huán)儀的情況下擴增整個基因組DNA的技術(shù)。4.**高dUTP耐受性**:與BstDNAPolymerase2.0相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment在進行等溫擴增時不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力,這使得它在某些應(yīng)用中更具優(yōu)勢。Recombinant Rat IL-1 beta Protein