重組人血清白蛋白(rHSA),特別是通過植物表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)產(chǎn)品,以其高純度和質(zhì)量一致性而受到科研和工業(yè)界的重視。以下是高純度rHSA的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和意義:1.**純度標(biāo)準(zhǔn)**:高純度的rHSA通常意味著蛋白質(zhì)含量達(dá)到99%以上,這通常通過高效液相色譜(HPLC)、SDS-PAGE電泳等方法進(jìn)行驗(yàn)證。2.**內(nèi)素水平**:內(nèi)素水平是衡量蛋白質(zhì)純度的一個(gè)重要指標(biāo)。高純度rHSA的內(nèi)素水平通常非常低(例如,≤0.5EU/ml),這有助于減少細(xì)胞培養(yǎng)中潛在的內(nèi)素污染。3.**宿主細(xì)胞蛋白(HCP)殘留**:高純度rHSA的宿主細(xì)胞蛋白殘留量非常低,這有助于減少細(xì)胞培養(yǎng)中外來(lái)蛋白的干擾。4.**無(wú)動(dòng)物源成分**:由于rHSA是通過植物表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的,因此不含有動(dòng)物源性成分,這降低了動(dòng)物源性疾病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。5.**批次一致性**:高純度rHSA的生產(chǎn)過程通常在嚴(yán)格控制的條件下進(jìn)行,確保不同批次之間的質(zhì)量一致性,這對(duì)于科學(xué)研究和商業(yè)生產(chǎn)至關(guān)重要。6.**應(yīng)用廣**:高純度rHSA在細(xì)胞培養(yǎng)、生物制藥、藥物載體、疫苗開發(fā)等領(lǐng)域有著廣的應(yīng)用。7.**安全性**:高純度rHSA的生產(chǎn)過程不涉及動(dòng)物源材料,因此可以降低血源性疾病的風(fēng)險(xiǎn),提高產(chǎn)品的安全性。Multiplex Probe qPCR Mix 是一種濃縮預(yù)混液,含有抗體技術(shù)修飾的熱啟動(dòng)酶Hotstart Taq DNA聚合酶。Recombinant Human B7-2/CD86 Protein,His-Avi Tag
重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白(SpCas9)是一種用于基因組編輯的核酸酶。它是CRISPR-Cas系統(tǒng)的一部分,該系統(tǒng)是一種細(xì)菌和古菌的適應(yīng)性免疫防御機(jī)制,能夠識(shí)別并切割入侵的外源核酸。Cas9蛋白在CRISPR系統(tǒng)中起到關(guān)鍵作用,它能夠識(shí)別特定的原間隔子相鄰基序(PAM),在引導(dǎo)RNA(gRNA)的引導(dǎo)下與目標(biāo)DNA結(jié)合并進(jìn)行切割。SpCas9蛋白由1053個(gè)氨基酸組成,相對(duì)較小的體積使其便于在體內(nèi)遞送,因此它在多種生物中都能進(jìn)行有效的基因組編輯。為了提高SpCas9的表達(dá)量和溶解度,研究人員采用了多種策略,例如使用GB1促溶標(biāo)簽和多重啟動(dòng)子策略,這些策略可以顯著提高蛋白的產(chǎn)量和活性,同時(shí)保持其功能活性不受影響。在基因編輯過程中,SpCas9與gRNA形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,通過gRNA與基因組DNA的序列匹配來(lái)識(shí)別目標(biāo)位點(diǎn),并在距離NGGPAM序列3個(gè)堿基以內(nèi)的位置切割DNA。為了增強(qiáng)SpCas9的基因組編輯效率,研究人員還開發(fā)了嵌合融合蛋白,例如與5’至3’核酸外切酶重組J(RecJ)或GFP融合的SpyCas9蛋白,這些嵌合蛋白可以顯著提高靶向基因編輯效率,同時(shí)保持較低的脫靶效應(yīng)。
PNGaseF,Recombinant,ExpressedinYeast(酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F)的高效性體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.**高比活性**:該酶具有高比活性,例如可達(dá)到750,000U/mL,這意味著單位體積的酶可以進(jìn)行更多的反應(yīng)循環(huán),從而提高去糖基化的效率。2.**快速反應(yīng)**:與傳統(tǒng)PNGaseF相比,某些優(yōu)化版本的PNGaseF,如FastPNGaseF,能在更短的時(shí)間內(nèi)完成去糖基化,要10分鐘。3.**徹底去糖基化**:該酶能迅速且無(wú)偏好性地去除幾乎所有N-連接的寡糖,包括高甘露糖型、雜合型和復(fù)雜型糖鏈,確保了去糖基化的徹底性。4.**直接分析**:去糖基化后的產(chǎn)物可以直接用于下游的色譜或質(zhì)譜分析,無(wú)需額外的純化步驟,從而節(jié)省時(shí)間并提高分析的效率。5.**適用性**:適用于多種糖蛋白的去糖基化,包括抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白,增加了該酶的實(shí)用性。6.**優(yōu)化的反應(yīng)條件**:可以在變性或非變性條件下使用,增加了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的靈活性,并允許在不同條件下優(yōu)化去糖基化效率。7.**簡(jiǎn)化的實(shí)驗(yàn)流程**:由于酶的高效性,實(shí)驗(yàn)流程得以簡(jiǎn)化,減少了反應(yīng)體積和酶的使用量,同時(shí)保持了反應(yīng)的靈敏度和重復(fù)性。
NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白,它在N端和C端都添加了核定位信號(hào)(NLS),這使得它能夠更有效地進(jìn)入細(xì)胞核并進(jìn)行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導(dǎo)RNA(gRNA)形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物,可以在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核,從而誘導(dǎo)特定的DNA雙鏈斷裂,實(shí)現(xiàn)基因編輯。與傳統(tǒng)的mRNA或質(zhì)粒系統(tǒng)相比,使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉(zhuǎn)錄和翻譯過程,因此可以避免將外源DNA插入基因組的風(fēng)險(xiǎn),這對(duì)于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點(diǎn)包括:1.無(wú)DNA:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的風(fēng)險(xiǎn)。2.高切割效率:雙NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核。3.低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性。4.節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA,以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。產(chǎn)品的保存條件通常是在-25~-15℃,有效期為一年。使用時(shí),可以根據(jù)推薦的反應(yīng)體系進(jìn)行體外DNA裂解實(shí)驗(yàn),并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)消化效率。具體產(chǎn)品的詳細(xì)信息和應(yīng)用指南,可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。泛素化蛋白隨后被靶向到26S蛋白酶體進(jìn)行降解,或出現(xiàn)蛋白位置或活性變化。
BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads是一種利用磁珠技術(shù)從血液中提取基因組DNA的試劑盒。以下是一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**高效提取**:該試劑盒采用特殊的磁珠和緩沖體系,能夠快速且高效地從100μl至1ml的血液中分離和純化高質(zhì)量的基因組DNA。2.**磁珠特性**:獨(dú)特的磁珠具有很強(qiáng)的核酸親和力,在特定條件下可以快速分離和純化核酸。這些磁珠對(duì)磁場(chǎng)響應(yīng)迅速,使得提取過程既安全又便捷。3.**提取過程**:血液樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下迅速裂解,釋放出的基因組DNA與磁珠特異性結(jié)合。通過磁分離架的作用,磁珠與溶液快速分離,經(jīng)過洗滌去除雜質(zhì),用洗脫液將基因組DNA從磁珠上洗脫下來(lái)。4.**應(yīng)用廣**:提取的基因組DNA可用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如PCR擴(kuò)增、酶切、基因分型、Southern雜交、高通量測(cè)序、基因組DNA文庫(kù)構(gòu)建等。5.**操作簡(jiǎn)便**:整個(gè)抽提過程大約需要50分鐘,操作簡(jiǎn)便,無(wú)需使用有毒有害的有機(jī)試劑,如酚或氯仿,提高了實(shí)驗(yàn)的安全性。6.**高純度和高回收率**:提取的DNA純度高,A260/A280通常在1.7-1.9之間,表明蛋白和RNA的污染低?;厥章释ǔ3^80%。
隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。Recombinant Human B7-2/CD86 Protein,His-Avi Tag
重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一種用于生物科學(xué)研究的工具。以下是重組EGFP的一些特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**高熒光強(qiáng)度**:EGFP比野生型GFP具有更強(qiáng)的熒光,這使得它在成像和檢測(cè)時(shí)更為敏感和有效。2.**改進(jìn)的折疊效率**:EGFP在生理溫度(如37℃)下的折疊效率更高,這有助于在細(xì)胞內(nèi)快速形成成熟的熒光蛋白。3.**單一激發(fā)峰**:與野生型GFP相比,EGFP具有單一的激發(fā)峰,這簡(jiǎn)化了成像條件的設(shè)置,并提高了信號(hào)的穩(wěn)定性。4.**適合多種生物系統(tǒng)**:EGFP可以用于多種生物系統(tǒng),包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。5.**多功能性**:EGFP可以作為報(bào)告基因用于基因表達(dá)分析,也可以作為融合標(biāo)簽用于蛋白質(zhì)定位和動(dòng)態(tài)研究。6.**非糖基化**:在大腸桿菌中表達(dá)的重組EGFP是非糖基化的,這有助于減少翻譯后修飾的復(fù)雜性。7.**純度高**:重組EGFP通常具有高純度,適合用于各種生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。8.**穩(wěn)定性**:EGFP的熒光穩(wěn)定性好,適合長(zhǎng)時(shí)間觀察和成像。9.**分子量**:重組EGFP的分子量約為26.9kDa,由239個(gè)氨基酸構(gòu)成。Recombinant Human B7-2/CD86 Protein,His-Avi Tag