dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)在細(xì)胞分裂中扮演著至關(guān)重要的角色,尤其是在DNA復(fù)制過(guò)程中。細(xì)胞分裂包括有絲分裂和減數(shù)分裂,其中DNA復(fù)制主要發(fā)生在細(xì)胞周期的S階段(合成階段)。以下是dNTPs在細(xì)胞分裂中的主要作用:1.**DNA復(fù)制**:在細(xì)胞分裂前的S階段,細(xì)胞的DNA需要被復(fù)制,以確保每個(gè)新產(chǎn)生的細(xì)胞都能獲得一套完整的遺傳信息。dNTPs是DNA聚合酶用來(lái)合成新DNA鏈的原料。每個(gè)dNTP分子由一個(gè)去氧核糖、一個(gè)磷酸基團(tuán)和一個(gè)堿基(腺嘌呤、胞嘧啶、鳥(niǎo)嘌呤或胸腺嘧啶)組成。DNA聚合酶通過(guò)添加互補(bǔ)的dNTPs到生長(zhǎng)的DNA鏈上,從而合成新的DNA分子。2.**確保復(fù)制準(zhǔn)確性**:dNTPs的濃度和純度對(duì)DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。DNA聚合酶具有校對(duì)功能,能夠識(shí)別并糾正錯(cuò)誤配對(duì)的dNTPs,從而確保復(fù)制過(guò)程的高保真性。3.**DNA修復(fù)**:在細(xì)胞分裂過(guò)程中,DNA可能會(huì)受到損傷。dNTPs也參與DNA修復(fù)過(guò)程,幫助細(xì)胞修復(fù)受損的DNA堿基,維持基因組的穩(wěn)定性。4.**細(xì)胞周期調(diào)控**:dNTPs的水平可以影響細(xì)胞周期的進(jìn)程。例如,dNTPs的缺乏可以觸發(fā)細(xì)胞周期的檢查點(diǎn),暫停細(xì)胞周期的進(jìn)程,直到dNTPs的水平恢復(fù)到足夠進(jìn)行DNA復(fù)制。
RNaseInhibitor,HumanPlacenta是一種從人胎盤(pán)中提取的核糖核酸酶抑制劑,或通過(guò)大腸桿菌重組表達(dá)。以下是其主要特點(diǎn)和用途:1.**抑制作用**:能夠有效抑制RNaseA、RNaseB、RNaseC和人胎盤(pán)核糖核酸酶的活性,保護(hù)RNA不被這些酶降解。2.**高親和力結(jié)合**:RNaseInhibitor與RNA酶的結(jié)合非常快速,幾乎在加入的瞬間就會(huì)形成復(fù)合物從而抑制其酶活性,且這種結(jié)合是非競(jìng)爭(zhēng)性的,按1:1比例結(jié)合。3.**pH穩(wěn)定性**:在pH5-8范圍內(nèi)保持其RNA酶抑制活性,在pH7-8時(shí)抑制活性比較高。維持其活力需要至少在溶液中含有1mMDTT。4.**兼容性**:與TaqDNAPolymerase、AMV或M-MuLVReverseTranscriptases、SP6、T7、T3RNApolymerase等酶兼容,不會(huì)抑制這些酶的活性。5.**應(yīng)用領(lǐng)域**:用于cDNA合成,體外轉(zhuǎn)錄,體外翻譯,以及mRNA-protein復(fù)合物分離純化等過(guò)程中保護(hù)RNA不被降解;還可用于特定RNase活性的鑒定等。6.**儲(chǔ)存條件**:-20℃保存,兩年有效。使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20oC保存。7.**活性定義**:將能夠抑制5ngRNaseA的50%活性的酶量定義為一個(gè)活性單位。8.**純度**:不含DNA內(nèi)切酶和外切酶,不含RNA酶。人源膠原蛋白開(kāi)發(fā)技術(shù)服務(wù)臨床前研究隨著合成生物學(xué)的快速發(fā)展,重組人膠原蛋白已成為全球高級(jí)生物材料。其在材料科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有創(chuàng)新應(yīng)用。
M-MLVAdvanceFastReverseTranscriptase(200U/μL)是一種高效的逆轉(zhuǎn)錄酶,用于將RNA模板轉(zhuǎn)換成cDNA。這種酶是從MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)衍生而來(lái),經(jīng)過(guò)基因工程改造,以提高其熱穩(wěn)定性和合成效率。以下是該產(chǎn)品的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**高濃度**:提供200U/μL的高濃度,便于進(jìn)行各種規(guī)模的實(shí)驗(yàn)。2.**熱穩(wěn)定性**:該酶具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高達(dá)55°C的溫度下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),這有助于打開(kāi)RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu),提高長(zhǎng)鏈cDNA的合成效率。3.**低RNaseH活性**:與野生型M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶相比,這種酶的RNaseH活性較低,有助于保護(hù)RNA模板不被降解,從而提高長(zhǎng)鏈cDNA的合成。4.**合成長(zhǎng)鏈cDNA的能力**:能夠合成長(zhǎng)達(dá)7kb的cDNA,適合于需要合成長(zhǎng)片段cDNA的實(shí)驗(yàn)。5.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA鏈,適用于實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR、3'-和5'-RACE等實(shí)驗(yàn)。6.**儲(chǔ)存條件**:建議在-20°C下保存,以保持酶的活性和穩(wěn)定性。7.**使用方便**:通常,該酶會(huì)與5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等組分一起提供,方便用戶(hù)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。8.**產(chǎn)品規(guī)格**:提供不同規(guī)格的產(chǎn)品,以滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)規(guī)模的需求。
StrandcDNASynthesisKit在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中保證cDNA特異性的特點(diǎn)主要包括:1.**高效的逆轉(zhuǎn)錄酶**:該試劑盒通常包含高效且熱穩(wěn)定的逆轉(zhuǎn)錄酶,如HiScriptIIReverseTranscriptase,能夠在高溫條件下打開(kāi)RNA的復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu),從而提高逆轉(zhuǎn)錄效率。2.**寬泛的模板起始量**:試劑盒可以從1pg到5μg的總RNA模板合成cDNA,且能擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)15kb以上的片段。3.**高效的cDNA合成**:AnchoredOligo(dT)23VN設(shè)計(jì)結(jié)合位點(diǎn)錨定,特異性高,保證鏈cDNA合成效率和成功率。4.**靈活的引物選擇**:提供不同類(lèi)型的逆轉(zhuǎn)錄引物,如Oligo(dT)、隨機(jī)六聚體引物或基因特異性引物,以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。5.**去除基因組DNA**:部分試劑盒包含gDNA去除模塊,如gDNAwiperMix,可以去除RNA模板中殘留的基因組DNA污染,保證后續(xù)結(jié)果更加可靠。6.**RNase抑制劑**:試劑盒中包含RNase抑制劑,保護(hù)模板RNA在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中不被降解,確保逆轉(zhuǎn)錄效率和特異性。7.**優(yōu)化的反應(yīng)條件**:試劑盒通常提供優(yōu)化的反應(yīng)條件,包括反應(yīng)緩沖液、dNTP混合物、逆轉(zhuǎn)錄酶和引物的組合,以確保高效的cDNA合成。 ?物活性膠原蛋?的制備是將其?的基因?qū)?特定宿主細(xì)胞,經(jīng)基因表達(dá) 和蛋?翻譯,來(lái)提取純化?實(shí)現(xiàn)。
在生物科技日新月異的發(fā)展浪潮中,江畢赤酵母表達(dá)VLP(病毒樣顆粒)技術(shù)服務(wù)正逐漸嶄露頭角,為眾多科研和應(yīng)用領(lǐng)域帶來(lái)了新的契機(jī)與突破。江畢赤酵母作為一種的表達(dá)系統(tǒng),在VLP的生產(chǎn)中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。它能夠?qū)?fù)雜的蛋白質(zhì)進(jìn)行正確的折疊和修飾,使得表達(dá)出的VLP更接近天然病毒的結(jié)構(gòu)和功能。與其他表達(dá)系統(tǒng)相比,江畢赤酵母具有生長(zhǎng)速度快、易于培養(yǎng)和大規(guī)模發(fā)酵的特點(diǎn),能夠高效地生產(chǎn)大量的VLP。這不僅降低了生產(chǎn)成本,還提高了生產(chǎn)效率,為VLP的廣泛應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。通過(guò)各種生物學(xué)活性測(cè)定方法,如補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒法(CDC)、細(xì)胞/生長(zhǎng)因子信號(hào)通路阻斷法。遼寧類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)
利用硫酸銨沉淀、離子交換層析和疏水相互作用層析等方法,從大腸桿菌培養(yǎng)物中提取和純化病毒樣顆粒。北京類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)研發(fā)
熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)是一種用于快速、安全地去除RNA樣品中基因組DNA污染的重組表達(dá)的酶。以下是其主要特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**dsDNA特異性**:ThermolabiledsDNase能夠特異性剪切雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生帶有5’-磷酸與3’-羥基末端的寡核苷酸,而對(duì)單鏈DNA(如cDNA)和RNA幾乎無(wú)酶切活性。在鎂離子存在的情況下,對(duì)dsDNA的酶切活性比對(duì)ssDNA的酶切活性高約5000倍。2.**熱不穩(wěn)定性**:該酶在55℃加熱5分鐘即可被不可逆地失活,這使得它非常適合在反轉(zhuǎn)錄之前快速去除RNA樣品中的基因組DNA污染。3.**活性強(qiáng)**:ThermolabiledsDNase在20-40℃保持高活性狀態(tài),比牛DNaseI的活力約高30倍。2分鐘孵育即可將RNA樣品中所含有的基因組DNA或1μg基因組DNA消化完畢。4.**用途**:主要用于制備不含DNA的RNA樣品;在反轉(zhuǎn)錄前去除RNA樣品中的基因組DNA污染;以及在體外T3、T7、SP6等RNAPolymerases催化的RNA合成后消化去除模板DNA。5.**來(lái)源**:通過(guò)_Pichiapastoris_重組表達(dá)ThermolabiledsDNase基因。6.**分子量**:43kDa。7.**純度**:不含其他DNA內(nèi)切酶與外切酶活性,不含RNA酶活性。北京類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)研發(fā)